基于细胞传感器的转化生长因子对胃癌细胞作用机理研究

成果基本信息
关键词：	传感器;转化生长因子;作用机理;癌细胞;细胞作用
成果类别：		技术成熟度：
体现形式（基础理论类）：		体现形式（应用技术类）：	无
成果登记号：	16006540	资源采集日期：	2017-02-20

研究情况
单位名称：	绍兴市上虞人民医院	技术水平：
评价证书号：	浙技促鉴字[2016]第167号	评价单位：	浙江省技术市场促进会
评价日期：	2016.05.08	评价证书号：	浙技促鉴字[2016]第167号

转化情况
转让范围：		推广形式：	无
已转让企业数（个）：	0

联系方式
联系人（平台）：	玉女士	联系人（平台）电话：	0771-5885053
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成果简介
一、简要技术说明及主要技术性能指标　　研究目的利用细胞传感器检测奥沙利铂、5-氟尿嘧啶及二者的联合用药组对人胃癌细胞的生长抑制作用，探索不同浓度的TGF-β1对癌细胞的调节作用。方法选指数生长期的人胃癌细胞系，如LS180、SW640等多种细胞系进行研究，制成1×105/mL 的细胞悬液，以每孔200μL 接种于E-plate 16（AECE Bio.）微电极芯片表面，制成细胞阻抗传感器。采用的培养基为DMEM+10%胎牛血清，于37 ℃， 5% CO2 的条件下培养24 h 后，把原本的培养液换成含有药物的的细胞培养液，继续置于原来的条件下培养。利用Zahner ZENNIUM 电化学工作站与THALES 软件（环球分析测试仪器有限公司）一起测量该细胞传感器的阻抗变化。结果 ⑴ 药物作用24 h的实验组，细胞变圆，开始从电极表面脱离，瓦解严重。随着药物作用时间的推移，电极表面的细胞最终可以完全裂解。⑵ 用药组的阻抗的整体变化趋势呈现浓度、时间相关性。（3）低浓度的TGF-β1对癌细胞的生长具有较好的抑制作用，随着浓度的增加，TGF-β1开始促进癌细胞的生长。结论我们构建的细胞传感器成功地检测到了两种化疗药：奥沙利铂、5-氟尿嘧啶对癌细胞的生长抑制作用，探索了不同浓度的TGF-β1对癌细胞的调节作用，展示了细胞传感器在检测癌细胞状态及药物作用机理等方面的潜在价值。　　二、推广应用前景与措施　　目前进展期癌症，尤其是胃肠癌等的治疗仍以手术、化疗药物5-氟尿嘧啶为基础联合奥沙利铂或伊立替康为主要的手段。肿瘤细胞对化疗药物产生耐药和发生远处转移是导致病人死亡的主要原因。转化生长因子等信号通路在细胞分化、增殖、生长方面起着重要作用，从转化生长因子等角度出发，研发高效低毒的抗癌增殖和转移药物，并对其作用机理进行细胞与分子水平的研究，具有重要的临床意义。　　细胞传感器是一种能够同时测量多组不同细胞的电阻变化、膜电容变化、以及细胞层－基底膜空间变化的电生理研究仪器。通过微安级的电流测量，可以实时连续的量化研究细胞外基质与细胞增殖之间的相互作用，测量贴壁细胞迁移过程中细胞形态变化。相对于普通光学显微镜和荧光标记观察等传统方法，细胞传感器的阻抗测试使得细胞形态研究更为直观和方便，并容易获得实时定量的测试结果。该系统已被成功的用于检测细胞的黏附、延展、增殖、凋亡等生理病理变化过程，以及细胞对药物响应的药理与毒理研究等多个领域，已成为药物高通量筛选研究的有效平台。本研究中首先将针对胃癌发生发展中的重要生长因子，利用细胞传感器技术对细胞生理病理特性（如细胞生长、伸展、形态变化、死亡和贴壁程度等）及其与细胞外基质分子的相互作用进行良好的评价，并由此建立一个有效的抗胃癌药物筛选与评价技术平台。从长远来看本研究将现代生物医学传感技术用于抗肿瘤药物的筛选分析，具有良好的应用前景，特别是能够在细胞整体功能响应层面，对转化生长因子等抗肿瘤靶点与机理，进行良好的阐释，意义重大。

成果名称：	基于细胞传感器的转化生长因子对胃癌细胞作用机理研究	关键词：	传感器;转化生长因子;作用机理;癌细胞;细胞作用
成果类别：		一级分类名称：	机械制造
二级分类名称：	仪器仪表技术	三级分类名称：	传感器
研究起止时间：	2014.08 至2015.09	成果体现形式（应用技术类）：	无
成果属性：		成果体现形式（基础理论类）：
技术成熟度：		技术水平：
研究形式：		学科分类1：
单位名称：	绍兴市上虞人民医院	学科分类2：
中图分类号1：		所属高新技术类别：
中图分类号2：		课题来源：
应用行业：		课题立项名称：
国家科技计划子类别：		课题立项编号：
经费实际投入额（万元）：	0.00	评价单位：	浙江省技术市场促进会
评价形式：	无	应用状态：	无
评价日期：	2016.05.08	转让范围：
评价证书号：	浙技促鉴字[2016]第167号	推荐单位：	绍兴市上虞区科技局
推广形式：	无	成果登记号：	16006540
成果简介：	一、简要技术说明及主要技术性能指标　　研究目的利用细胞传感器检测奥沙利铂、5-氟尿嘧啶及二者的联合用药组对人胃癌细胞的生长抑制作用，探索不同浓度的TGF-β1对癌细胞的调节作用。方法选指数生长期的人胃癌细胞系，如LS180、SW640等多种细胞系进行研究，制成1×105/mL 的细胞悬液，以每孔200μL 接种于E-plate 16（AECE Bio.）微电极芯片表面，制成细胞阻抗传感器。采用的培养基为DMEM+10%胎牛血清，于37 ℃， 5% CO2 的条件下培养24 h 后，把原本的培养液换成含有药物的的细胞培养液，继续置于原来的条件下培养。利用Zahner ZENNIUM 电化学工作站与THALES 软件（环球分析测试仪器有限公司）一起测量该细胞传感器的阻抗变化。结果 ⑴ 药物作用24 h的实验组，细胞变圆，开始从电极表面脱离，瓦解严重。随着药物作用时间的推移，电极表面的细胞最终可以完全裂解。⑵ 用药组的阻抗的整体变化趋势呈现浓度、时间相关性。（3）低浓度的TGF-β1对癌细胞的生长具有较好的抑制作用，随着浓度的增加，TGF-β1开始促进癌细胞的生长。结论我们构建的细胞传感器成功地检测到了两种化疗药：奥沙利铂、5-氟尿嘧啶对癌细胞的生长抑制作用，探索了不同浓度的TGF-β1对癌细胞的调节作用，展示了细胞传感器在检测癌细胞状态及药物作用机理等方面的潜在价值。　　二、推广应用前景与措施　　目前进展期癌症，尤其是胃肠癌等的治疗仍以手术、化疗药物5-氟尿嘧啶为基础联合奥沙利铂或伊立替康为主要的手段。肿瘤细胞对化疗药物产生耐药和发生远处转移是导致病人死亡的主要原因。转化生长因子等信号通路在细胞分化、增殖、生长方面起着重要作用，从转化生长因子等角度出发，研发高效低毒的抗癌增殖和转移药物，并对其作用机理进行细胞与分子水平的研究，具有重要的临床意义。　　细胞传感器是一种能够同时测量多组不同细胞的电阻变化、膜电容变化、以及细胞层－基底膜空间变化的电生理研究仪器。通过微安级的电流测量，可以实时连续的量化研究细胞外基质与细胞增殖之间的相互作用，测量贴壁细胞迁移过程中细胞形态变化。相对于普通光学显微镜和荧光标记观察等传统方法，细胞传感器的阻抗测试使得细胞形态研究更为直观和方便，并容易获得实时定量的测试结果。该系统已被成功的用于检测细胞的黏附、延展、增殖、凋亡等生理病理变化过程，以及细胞对药物响应的药理与毒理研究等多个领域，已成为药物高通量筛选研究的有效平台。本研究中首先将针对胃癌发生发展中的重要生长因子，利用细胞传感器技术对细胞生理病理特性（如细胞生长、伸展、形态变化、死亡和贴壁程度等）及其与细胞外基质分子的相互作用进行良好的评价，并由此建立一个有效的抗胃癌药物筛选与评价技术平台。从长远来看本研究将现代生物医学传感技术用于抗肿瘤药物的筛选分析，具有良好的应用前景，特别是能够在细胞整体功能响应层面，对转化生长因子等抗肿瘤靶点与机理，进行良好的阐释，意义重大。
联系人：	罗森飚	成果登记日期：	2016-09-23
联系人email：		单位代码：	93310682
邮政编码222：	312300	联系人电话：	15088520006
单位传真：		单位通讯地址：	浙江省绍兴市上虞区百官街道市民大道517号
单位所在省市：		单位电话：	0575-81266120
转让收入（万元）：	0	单位属性：
合作完成单位：		已转让企业数（个）：	0
成果发布年份：	2016	知识产权形式：
成果完成人：	罗森飚;蔡华;周龙山;陈可;张迪鸣;戴烨枫;张倩	资源采集日期：	2017-02-20

基于细胞传感器的转化生长因子对胃癌细胞作用机理研究

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