一、课题来源与背景 　　1、课题来源： 　　（1）计划名称：2010年南宁市科学研究与技术开发计划重大专项 　　（2）合同编号：201001010A 　　2、背景： 　　阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD），也称老年痴呆症，是一种进行性的、复杂的神经变性性疾病，临床上主要表现为记忆功能的减退和其他认知功能的缺失。伴随着全球范围人口老龄化，AD的发病率亦将随之攀升，预期至2050年患者人数将超过1亿,全球用于痴呆相关的费用接近1600亿美元，将给卫生保健和社会经济体系带来难以承受的巨大的财政负担。 　　

二、技术原理及性能指标 　　1、技术原理： 　　本研究建立了标准化的制备稳定的可溶性Aβ42寡聚体的程序，同时在手术前后通过Western-Blot鉴定注射前后进入脑内的均为稳定的可溶性Aβ42寡聚体。最具创新点的是本研究首次应用对流增强给药技术（CED）立体定向手术脑内注射可溶性Aβ42寡聚体用于构建AD模型。优点是注射的总容积可达150-250ul,MRI扫描显示在靶点周围呈球形弥散，未造成局部损伤效应。 　　2、性能指标： 　　（1）可溶性Aβ42寡聚体的准备、合成、鉴定和稳定性的观察； 　　（2）造模手术方法的研究； 　　（3）工作记忆评估（认知行为学评价）及造模后的动态评价； 　　（4）脑脊液生物标记物的检测和随龄变化研究。 三、技术的创造性与先进性 　　1、本研究应用老龄食蟹猴、伴有自发性糖尿病的老龄食蟹猴建立AD模型，老龄及糖尿病均为AD的重要危险因素，具有AD危险因素的动物结合脑内导入可溶性的Aβ42寡聚物以期能成功诱导近似AD临床特征的模型，此为AD模型建立的重要创新，大大增加成功建立AD拟临床模型的理论和技术可行性；同时本课题组前期研究积累了足够数量的老年食蟹猴和糖尿病老龄食蟹猴，这对未来AD模型的技术转化和的产业化应用具有重要的创新价值和意义。 　　2、本研究首此将对流增强给药技术（CED，Convection-EnhancedDelivery）应用到脑内导入可溶性的Aβ42寡聚物建立AD模型，应用此技术使得单次导入药物容量可达150-250ul,其在脑内的均匀缓慢弥散能使得影响的靶区范围更大，并能间断重复导入，较之既往研究更长的时间窗观察模型的演化； 　　3、灵长类食蟹猴老龄化过程脑脊液和血液特异生物标记物Aβ40、Aβ42和p-tau181含量的随龄变化，首次通过37只食蟹猴脑脊液检测分析了老年痴呆（AD）相关的特异性生物标记物的随龄变化，并发表相关论文四篇。 　　4、活体状态动态模型评价技术的创新应用。本课题将应用自主开发的认知行为评价装置，延迟物品比对测试（DMTS）装置测试评价工作记忆功能。 四、技术的成熟程度，适用范围和安全性 　　食蟹猴AD拟临床模型的研究将会应用于为科学家、科研院所、医院和制药企业提供疾病研究、诊断技术开发、AD新药研发的实用载体，并将产生较大的社会和经济效益。 　　解决老年痴呆的早期诊断、早期治疗和早期干预问题对改善病人生活质量和减轻国家卫生经济负担有着重要意义，另一方面，开发具有自主知识产权的治疗老年痴呆和其它疾病的药物的研发、诊断技术、治疗技术的研发和应用等都离不开理想的模拟临床的老年痴呆等疾病的灵长类动物模型。 　　生物制药近年在国内发展迅猛，欧美诸多大药厂均在中国设立研发机构，但作为新药创制的诸多环节中，疾病动物模型，尤其是接近临床的规范化的模型研发已成为最关键环节之一，灵长类实验动物与人类有着密切的亲缘关系，因此它是建立人类重大疾病模型最理想的实验动物，尽管AD已是老年人最常见的 疾病，而实验动物模型研究的滞后是制约AD机制研究、早期诊断和药物开发的瓶颈之一，有着不可替代的重要作用。 　　

五、应用情况及存在的问题 　　1、应用情况 　　应用食蟹猴研究的成果对于在国内促进食蟹猴资源的利用也有着重要的经济和战略意义。食蟹猴AD拟临床模型的研究将应用于为科学家、科研院所、医院和制药企业提供疾病研究、诊断技术开发、AD新药研发的实用载体，并将产生较大的社会和经济效益。 　　2、存在问题 　　猴子的行为学研究是一项需要付出很大努力的工作，需要对猴子进行长时间训练，使之能依从和配合研究，另需对测试方法进行不断的观察和改进，以使得能更加客观敏感地反映猴子的认知功能状况。由于时间周期短，通过当前DMTS方法仍未观察到被研究动物出现明显的认知功能减退，这需要在后续研究中进一步延长期限进行观察和评价，另需结合优化选择手术靶点及活检脑组织的免疫组化来判断脑内Aβ斑块的形成状况。 　　建议：由于在老年猴子已发现类似老年痴呆表现的病理特征表现，且高血糖及代谢异常与AD的发病有直接联系，后续研究计划用老年猴及伴有自发性糖尿病的猴子建立老年痴呆模型，一方面对诱导脑内出现类似老年痴呆病例特征并成功建立AD模型，另一方面对老年痴呆的发病及其与代谢异常的关系的机制提供了研究的载体。 　　

六、历年获奖情况 　　无 　　

七、成果简介要向社会公开，请不要填写商业秘密内容。 　　该课题选取老龄食蟹猴，采用立体定位和对流增强给药技术（CED，Convection-EnhancedDelivery），脑内间歇注射可溶性的Aβ42寡聚物，初步诱导6只近似阿尔茨海默病（AD）临床特征的食蟹猴动物模型；观察与检测了37只食蟹猴老龄化过程脑脊液和血液特异生物标记物Aβ40、Aβ42和p-tau181含量，并分析其随龄变化的趋势，发表相关论文4篇；应用了活体状态动态模型评价技术，包含应用自主开发的认知行为评价装置和延迟物品比对测试（DMTS）装置测试评价方法。该成果达到国内领先水平。

一、课题来源与背景 　　1、课题来源： 　　（1）计划名称：2010年南宁市科学研究与技术开发计划重大专项 　　（2）合同编号：201001010A 　　2、背景： 　　阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD），也称老年痴呆症，是一种进行性的、复杂的神经变性性疾病，临床上主要表现为记忆功能的减退和其他认知功能的缺失。伴随着全球范围人口老龄化，AD的发病率亦将随之攀升，预期至2050年患者人数将超过1亿,全球用于痴呆相关的费用接近1600亿美元，将给卫生保健和社会经济体系带来难以承受的巨大的财政负担。 　　

二、技术原理及性能指标 　　1、技术原理： 　　本研究建立了标准化的制备稳定的可溶性Aβ42寡聚体的程序，同时在手术前后通过Western-Blot鉴定注射前后进入脑内的均为稳定的可溶性Aβ42寡聚体。最具创新点的是本研究首次应用对流增强给药技术（CED）立体定向手术脑内注射可溶性Aβ42寡聚体用于构建AD模型。优点是注射的总容积可达150-250ul,MRI扫描显示在靶点周围呈球形弥散，未造成局部损伤效应。 　　2、性能指标： 　　（1）可溶性Aβ42寡聚体的准备、合成、鉴定和稳定性的观察； 　　（2）造模手术方法的研究； 　　（3）工作记忆评估（认知行为学评价）及造模后的动态评价； 　　（4）脑脊液生物标记物的检测和随龄变化研究。 三、技术的创造性与先进性 　　1、本研究应用老龄食蟹猴、伴有自发性糖尿病的老龄食蟹猴建立AD模型，老龄及糖尿病均为AD的重要危险因素，具有AD危险因素的动物结合脑内导入可溶性的Aβ42寡聚物以期能成功诱导近似AD临床特征的模型，此为AD模型建立的重要创新，大大增加成功建立AD拟临床模型的理论和技术可行性；同时本课题组前期研究积累了足够数量的老年食蟹猴和糖尿病老龄食蟹猴，这对未来AD模型的技术转化和的产业化应用具有重要的创新价值和意义。 　　2、本研究首此将对流增强给药技术（CED，Convection-EnhancedDelivery）应用到脑内导入可溶性的Aβ42寡聚物建立AD模型，应用此技术使得单次导入药物容量可达150-250ul,其在脑内的均匀缓慢弥散能使得影响的靶区范围更大，并能间断重复导入，较之既往研究更长的时间窗观察模型的演化； 　　3、灵长类食蟹猴老龄化过程脑脊液和血液特异生物标记物Aβ40、Aβ42和p-tau181含量的随龄变化，首次通过37只食蟹猴脑脊液检测分析了老年痴呆（AD）相关的特异性生物标记物的随龄变化，并发表相关论文四篇。 　　4、活体状态动态模型评价技术的创新应用。本课题将应用自主开发的认知行为评价装置，延迟物品比对测试（DMTS）装置测试评价工作记忆功能。 四、技术的成熟程度，适用范围和安全性 　　食蟹猴AD拟临床模型的研究将会应用于为科学家、科研院所、医院和制药企业提供疾病研究、诊断技术开发、AD新药研发的实用载体，并将产生较大的社会和经济效益。 　　解决老年痴呆的早期诊断、早期治疗和早期干预问题对改善病人生活质量和减轻国家卫生经济负担有着重要意义，另一方面，开发具有自主知识产权的治疗老年痴呆和其它疾病的药物的研发、诊断技术、治疗技术的研发和应用等都离不开理想的模拟临床的老年痴呆等疾病的灵长类动物模型。 　　生物制药近年在国内发展迅猛，欧美诸多大药厂均在中国设立研发机构，但作为新药创制的诸多环节中，疾病动物模型，尤其是接近临床的规范化的模型研发已成为最关键环节之一，灵长类实验动物与人类有着密切的亲缘关系，因此它是建立人类重大疾病模型最理想的实验动物，尽管AD已是老年人最常见的 疾病，而实验动物模型研究的滞后是制约AD机制研究、早期诊断和药物开发的瓶颈之一，有着不可替代的重要作用。 　　

五、应用情况及存在的问题 　　1、应用情况 　　应用食蟹猴研究的成果对于在国内促进食蟹猴资源的利用也有着重要的经济和战略意义。食蟹猴AD拟临床模型的研究将应用于为科学家、科研院所、医院和制药企业提供疾病研究、诊断技术开发、AD新药研发的实用载体，并将产生较大的社会和经济效益。 　　2、存在问题 　　猴子的行为学研究是一项需要付出很大努力的工作，需要对猴子进行长时间训练，使之能依从和配合研究，另需对测试方法进行不断的观察和改进，以使得能更加客观敏感地反映猴子的认知功能状况。由于时间周期短，通过当前DMTS方法仍未观察到被研究动物出现明显的认知功能减退，这需要在后续研究中进一步延长期限进行观察和评价，另需结合优化选择手术靶点及活检脑组织的免疫组化来判断脑内Aβ斑块的形成状况。 　　建议：由于在老年猴子已发现类似老年痴呆表现的病理特征表现，且高血糖及代谢异常与AD的发病有直接联系，后续研究计划用老年猴及伴有自发性糖尿病的猴子建立老年痴呆模型，一方面对诱导脑内出现类似老年痴呆病例特征并成功建立AD模型，另一方面对老年痴呆的发病及其与代谢异常的关系的机制提供了研究的载体。 　　

六、历年获奖情况 　　无 　　

七、成果简介要向社会公开，请不要填写商业秘密内容。 　　该课题选取老龄食蟹猴，采用立体定位和对流增强给药技术（CED，Convection-EnhancedDelivery），脑内间歇注射可溶性的Aβ42寡聚物，初步诱导6只近似阿尔茨海默病（AD）临床特征的食蟹猴动物模型；观察与检测了37只食蟹猴老龄化过程脑脊液和血液特异生物标记物Aβ40、Aβ42和p-tau181含量，并分析其随龄变化的趋势，发表相关论文4篇；应用了活体状态动态模型评价技术，包含应用自主开发的认知行为评价装置和延迟物品比对测试（DMTS）装置测试评价方法。该成果达到国内领先水平。