本课题为国家自然科学基金资助项目，项目编号：30470053。 L-半胱氨酸广泛应用于医药、食品、化妆品等行业，传统的制取方法是将毛发酸水解，但耗能高、收率低且环境污染严重。本研究采用自行分离的假单胞菌TS-1138菌株，以化学合成的DL-2-氨基-?2-噻唑啉-4羧酸（DL-ATC）为底物，经微生物酶法转化合成L-半胱氨酸。本研究对该转化过程所涉及的关键酶（L-ATC水解酶、S-氨甲酰-L-半胱氨酸氨甲酰水解酶和L-半胱氨酸脱巯基酶）的基因进行克隆和鉴定，阐明了假单胞菌TS-1138菌是经由S-代途径转化DL-ATC合成L-半胱氨酸；建立了一种从蛋白水平一步去除L-半胱氨酸脱巯基酶，提高L-半胱氨酸转化率的技术；通过遗传诱变的方法，筛选获得低脱巯基酶活性的高转化率突变菌株；利用蛋白质组学和实时荧光定量PCR技术研究了底物DL-ATC对相关基因表达的影响，并构建了Mu转座随机突变文库，筛选获得合成L-半胱氨酸能力发生变化的菌株，以期对假单胞菌TS-1138合成L-半胱氨酸的代谢途径进行更为深入的研究；此外，本研究还探讨了最佳转化和分离提取工艺，在10L发酵罐水平上建立了一套从发酵到纯化获得终产物L-半胱氨酸的完整工艺，为我国拥有自主知识产权的应用微生物酶法制取L-胱氨酸和L-半胱氨酸奠定了坚实的理论基础。 目前，本课题正在与国内有关厂家商谈合作开发事宜，进展顺利。

本课题为国家自然科学基金资助项目，项目编号：30470053。 L-半胱氨酸广泛应用于医药、食品、化妆品等行业，传统的制取方法是将毛发酸水解，但耗能高、收率低且环境污染严重。本研究采用自行分离的假单胞菌TS-1138菌株，以化学合成的DL-2-氨基-?2-噻唑啉-4羧酸（DL-ATC）为底物，经微生物酶法转化合成L-半胱氨酸。本研究对该转化过程所涉及的关键酶（L-ATC水解酶、S-氨甲酰-L-半胱氨酸氨甲酰水解酶和L-半胱氨酸脱巯基酶）的基因进行克隆和鉴定，阐明了假单胞菌TS-1138菌是经由S-代途径转化DL-ATC合成L-半胱氨酸；建立了一种从蛋白水平一步去除L-半胱氨酸脱巯基酶，提高L-半胱氨酸转化率的技术；通过遗传诱变的方法，筛选获得低脱巯基酶活性的高转化率突变菌株；利用蛋白质组学和实时荧光定量PCR技术研究了底物DL-ATC对相关基因表达的影响，并构建了Mu转座随机突变文库，筛选获得合成L-半胱氨酸能力发生变化的菌株，以期对假单胞菌TS-1138合成L-半胱氨酸的代谢途径进行更为深入的研究；此外，本研究还探讨了最佳转化和分离提取工艺，在10L发酵罐水平上建立了一套从发酵到纯化获得终产物L-半胱氨酸的完整工艺，为我国拥有自主知识产权的应用微生物酶法制取L-胱氨酸和L-半胱氨酸奠定了坚实的理论基础。 目前，本课题正在与国内有关厂家商谈合作开发事宜，进展顺利。