1.应用领域和技术原理：应用领域—工业；本成果利用现代生物技术的基因工程原理，在大肠杆菌中克隆并高效表达了羧肽酶原B (procarboxypeptidase B，pCPB)的基因，结合现代蛋白层析技术获得了高比活的重组羧肽酶B (carboxypeptidase B，CPB)。 　2.与国内外同类技术比较：用Rt-PCR的方法克隆了pCPB的cDNA序列，并在大肠杆菌中以包涵体形式获得高效表达，表达产物pCPB经变性、复性后，胰蛋白酶酶切激活为活性CPB，用阴离子交换柱层析DEAE-FF浓缩纯化和疏水柱层析或分子筛层析进一步分离纯化得到活性CPB，此重组CPB可替代提取CPB应用于多肽的制备工艺中。本成果采用的新工艺与通用的猪胰脏生化提取法相比，降低了其它蛋白酶污染的风险，为科研及生产用酶提供了高纯度的CPB。 　3. 糖尿病人的逐年增加间接为CPB开发应用提供了广阔空间。另外，CPB还可用于降钙素的生产、蛋白质的羧基末端的氨基酸分析，或者用于修改蛋白质、多肽的羧基末端的碱性氨基酸残基。同时，CPB为临床胰腺炎的诊断试剂。我国使用的CPB完全依赖进口，近年来Sigma等国外生产厂家生产的CPB均从动物胰脏中提取，价格昂贵。动物来源酶的一个重要缺陷是有被动物病毒污染的危险，进行病毒检测既复杂又增加成本；同时动物来源酶不能完全去除其他杂质蛋白酶，产品纯度不高；大规模生产需要冷冻和贮藏动物胰腺，既污染环境又存在高的后勤成本。本成果产业化后，将产品应用于胰岛素的生产中，可提高国产胰岛素的竞争力，促进国产降钙素的生产，提高分析、诊断和测序的准确性。

　1.应用领域和技术原理：应用领域—工业；本成果利用现代生物技术的基因工程原理，在大肠杆菌中克隆并高效表达了羧肽酶原B (procarboxypeptidase B，pCPB)的基因，结合现代蛋白层析技术获得了高比活的重组羧肽酶B (carboxypeptidase B，CPB)。 　2.与国内外同类技术比较：用Rt-PCR的方法克隆了pCPB的cDNA序列，并在大肠杆菌中以包涵体形式获得高效表达，表达产物pCPB经变性、复性后，胰蛋白酶酶切激活为活性CPB，用阴离子交换柱层析DEAE-FF浓缩纯化和疏水柱层析或分子筛层析进一步分离纯化得到活性CPB，此重组CPB可替代提取CPB应用于多肽的制备工艺中。本成果采用的新工艺与通用的猪胰脏生化提取法相比，降低了其它蛋白酶污染的风险，为科研及生产用酶提供了高纯度的CPB。 　3. 糖尿病人的逐年增加间接为CPB开发应用提供了广阔空间。另外，CPB还可用于降钙素的生产、蛋白质的羧基末端的氨基酸分析，或者用于修改蛋白质、多肽的羧基末端的碱性氨基酸残基。同时，CPB为临床胰腺炎的诊断试剂。我国使用的CPB完全依赖进口，近年来Sigma等国外生产厂家生产的CPB均从动物胰脏中提取，价格昂贵。动物来源酶的一个重要缺陷是有被动物病毒污染的危险，进行病毒检测既复杂又增加成本；同时动物来源酶不能完全去除其他杂质蛋白酶，产品纯度不高；大规模生产需要冷冻和贮藏动物胰腺，既污染环境又存在高的后勤成本。本成果产业化后，将产品应用于胰岛素的生产中，可提高国产胰岛素的竞争力，促进国产降钙素的生产，提高分析、诊断和测序的准确性。