成果基本信息 | ||||||
关键词: | 生物酶法;猪肺;肝素钠 | |||||
成果类别: | 技术成熟度: | |||||
体现形式(基础理论类): | 体现形式(应用技术类): | 无 | ||||
成果登记号: | 2018N993Y001775 | 资源采集日期: | 2019-04-15 |
研究情况 | |||||
单位名称: | 安徽科宝生物工程有限公司 | 技术水平: | |||
评价证书号: | 证书号第1993737号 | 评价单位: | 国家知识产权局 | ||
评价日期: | 2016.03.23 | 评价证书号: | 证书号第1993737号 |
转化情况 | |||||
转让范围: | 推广形式: | 无 | |||
已转让企业数(个): | 0 |
联系方式 | |||||
联系人(平台): | 玉女士 | 联系人(平台)电话: | 0771-5885053 | ||
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成果简介 | |||||
①课题来源与背景 本发明涉及粘多糖生物制药领域,肝素钠是粘多糖硫酸酯类抗凝血药。是由猪或牛的粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐,属粘多糖类物质。近年来研究证明肝素钠还有降血脂作用。目前市面上肝素钠提取工艺种类繁多,不过多数采用猪肠来制备,但猪肺中肝素含量大大超过猪肠,现需要提供一种以猪肺为原料生产成本低廉,工艺简单的制备肝素钠的方法。 ②技术原理及性能 步骤:S1、将猪肺清洗,绞碎成糜状,充分搅拌加入水得到猪肺混合液,S2、向混合液中加氢氧化钠溶液,提取胰蛋白酶,在室温下搅拌得到一次酶解混合液,然后升温搅拌得到二次酶解混合液S3、将二次酶解混合液升温搅拌得到三次酶解混合液, S4、向三次酶解混合液加入盐酸,搅拌,得到酶失活混合液;S5、将酶失活混合液进行一次过滤得到一次滤液,待一次滤液冷却用氢氧化钠溶液调节pH值为9-10进行二次过滤后,再滴加盐酸使pH值为8.2-8.7得到二次滤液;S6、将二次滤液冷却至室温,搅拌后静置进行分层,吸取分层后的下层溶液,将下层溶液升温加入D217树脂,搅拌后静置1-2h得到含吸附肝素钠成分D217树脂混合液;S7、将含吸附肝素钠成分D217树脂混合液过滤后得到吸附肝素钠成分的D217树脂,将吸附肝素钠成分的D217树脂充分清洗后,用以吸附肝素钠成分的D217树脂为基进行一次洗脱得到一次洗脱液,再以吸附肝素钠成分的D217树脂进行二次洗脱得到二次洗脱液,将洗脱液混合,分层后吸取上层溶液得到物料A;S8、向物料A中滴加盐酸,加入乙醇搅拌,静置进行分层,再次吸取上层溶液,真空烘干得到物料B;S9、将物料B用浓度为硫酸钠溶液完全溶解,过滤后加入氢氧化钠溶液调节pH,搅拌0.5-0.6h后加入双氧水,将温度维持23-24℃,保温14-15h,过滤后滴盐酸得到二次氧化液, S10、向二次氧化液加入乙醇,在3-4℃沉淀36-40h,过滤后收集一次过滤物,加入硫酸钠溶液溶解,再加入以乙醇进行沉淀,过滤后收集二次过滤物,过滤物脱水、研细后,真空烘干,得肝素钠精品。 ③技术的创造性与先进性 本发明公开了一种生物酶法制备肝素钠的方法,通过将猪肺粉碎、酶解后,进行去蛋白处理,利用树脂交换后,再通过氧化脱色后得肝素钠溶液,将肝素钠溶液实施沉淀、脱水、干燥得肝素钠精品。本发明采用的酶解方法能更彻底全面的溶解猪肺浆液,用D217树脂吸附更彻底,粗品杂质少、效益高。且原料来源广泛,通用性强,活性收率高,工艺品质稳定,生产成本低廉,实现肝素钠的低投入、低成本、高回收率。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性 通过具体实施例对本发明进行试验、验证,说明本发明的技术方案是成熟、安全可靠地。此方法原料来源广泛、活性收率高,工艺品质稳定生产成本低、工艺简单适合规模化生产。 ⑤应用情况及存在的问题 本发明技术已在安徽科宝生物工程有限公司应用,应用情况良好. |