成果基本信息 | ||||||
关键词: | 抗逆基因;克隆;功能分析 | |||||
成果类别: | 基础理论 | 技术成熟度: | ||||
体现形式(基础理论类): | 论文 | 体现形式(应用技术类): | 无 | |||
成果登记号: | 2013005 | 资源采集日期: | 2013-11-10 |
研究情况 | |||||
单位名称: | 宁夏农业生物技术重点实验室 | 技术水平: | 国内领先 | ||
评价证书号: | 评价单位: | 宁夏回族自治区科学技术厅 | |||
评价日期: | 2012.12.18 | 评价证书号: |
转化情况 | |||||
转让范围: | 推广形式: | 无 | |||
已转让企业数(个): | 0 |
联系方式 | |||||
联系人(平台): | 玉女士 | 联系人(平台)电话: | 0771-5885053 | ||
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成果简介 | |||||
“植物抗逆基因克隆、功能分析及应用研究”课题为宁夏自治区科技攻关计划宁陕合作项目(KGZ-09-10-11),历时三年(2010-2012年)。主要以盐生植物梭梭为材料,利用差异显示、抑制消减杂交、同源克隆等技术从梭梭幼苗中分离克隆抗逆、耐盐基因,分析验证基因功能;选择功能清楚的抗逆基因构建植物表达载体;研究建立了成熟的宁夏粳稻、玉米等植株再生体系和遗传转化体系,应用植物转基因技术,采用农杆菌介导法将功能清楚的抗逆基因导入宁夏粳稻、玉米等优良品种,以培育抗逆性强的农作物新种质,为培育和创新宁夏农作物种质资源,开发和利用盐碱地奠定基础。 通过项目的研究,掌握了盐胁迫下梭梭、盐爪爪种子萌发动态及幼苗生理生化特性;以抗旱、耐盐植物梭梭为材料,分离获得BADH、CMO、NHX等具有自主知识产权的耐盐基因,并登录GenBank获得6条基因序列号(HaBADH GQ227730、HaCMO GQ379204、HaNHX JN657417、HaCaBP JQ023165、HaARF1 JN998082、HaPrxQ JN657416);采用RT-PCR方法获得了梭梭耐盐基因在梭梭同化枝及根系中的表达情况及盐胁迫条件下的差异表达结果;利用DNA重组技术将梭梭耐盐基因插入植物表达载体中,获得了三个单基因表达载体和一个双元表达载体获得组成型表达;系统、全面地建立和完善了宁夏粳稻、玉米再生体系与高效转化体系,构建了转基因育种的技术平台,采用农杆菌转化法将梭梭耐盐基因转入宁夏粳稻、玉米,筛选出2个耐盐特性明显的转基因水稻株系和1个转基因玉米株系;在国内公开发行的核心刊物上发表研究论文9篇,递交NCBI数据库基因序列6条,培养硕士研究生2名。 以该项目为纽带,为我们与西北农林科技大学生命科学学院开展了多次学术交流活动创造了机会,在交流过程中我们学习了基因克隆方面的相关技术,探讨了植物抗逆机理方面的理论问题,解决了我们在项目执行过程中存在的相关技术问题,提高了课题组人员相关技术、业务水平,为充分利用陕西的优势科技资源培养宁夏研究人才和队伍搭建了重要平台。 |