大弹涂鱼HIF-1α在低氧下对巨噬细胞的调控作用研究

成果基本信息
关键词：	大弹涂鱼;低氧胁迫;炎症反应;HIF-1α;巨噬细胞
成果类别：		技术成熟度：
体现形式（基础理论类）：		体现形式（应用技术类）：	无
成果登记号：	18022343	资源采集日期：	2019-03-15

研究情况
单位名称：	宁波大学	技术水平：
评价证书号：	甬科验字[2018]第23-43号	评价单位：	宁波大学
评价日期：	2018.07.02	评价证书号：	甬科验字[2018]第23-43号

转化情况
转让范围：		推广形式：	无
已转让企业数（个）：	0

联系方式
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成果简介
在低氧诱导的炎症反应中，HIF-1α发挥着不可替代的核心作用。通过实施，本研究得到以后结果：　　1、大弹涂鱼HIF-1α基因（BpHIF-1α）mRNA在健康大弹涂鱼中广泛表达，其中肠道BpHIF-1α基因mRNA表达量最高；低氧胁迫或迟钝爱德华氏菌感染均能诱导其在大弹涂鱼多数重要组织中表达量显著增加；在迟钝爱德华氏菌感染后，BpHIF-1α的下游基因葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter 1， Glut1）、血管内皮生长因子a（vascular endothelial growth factor a， Vegf-a）和醛缩酶C（Aldolase C， Aldoc），以及巨噬细胞炎症标记物基因诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase， iNOS）和鱼类巨噬细胞标记物基因集落刺激因子1受体（colony stimulating factor 1 receptor， CSF1R）在皮肤中mRNA表达量显著增加，在肠道中表达量均显著减少；揭示BpHIF-1α及其下游分子在低氧胁迫或迟钝爱德华氏菌感染诱导的免疫反应中发挥重要作用。　　2、进一步研究了低氧胁迫对细菌感染大弹涂鱼的整体免疫作用，结果发现，低氧胁迫显著降低迟钝爱德华氏菌感染大弹涂鱼的肝、脾、肾和血液中的组织载菌量，显著增加迟钝爱德华氏菌感染大弹涂鱼的存活率，揭示HIF-1α在低氧胁迫下迟钝爱德华氏菌感染大弹涂鱼具有免疫保护作用。　　3、为了确定HIF-1α在低氧胁迫及迟钝爱德华氏菌感染下对大弹涂鱼的免疫保护作用机制，在细胞水平上对其免疫调节功能进行研究。通过Giemsa′s染色和流式细胞术确定大弹涂鱼肾源MO/MΦ中87.4%为CSF1R阳性细胞；大弹涂鱼MO/MΦ在迟钝爱德华氏菌感染或低氧胁迫下，BpHIF-1α基因mRNA和蛋白表达量均显著增加，其下游基因BpGlut1、BpVegf-a和BpAldoc基因mRNA表达量也显著增加；敲低BpHIF-1α基因表达后，低氧胁迫下大弹涂鱼MO/MΦ的吞噬及杀菌活性均显著降低，且低氧胁迫和迟钝爱德华氏菌感染协同作用下，MO/MΦ中IL-1β和TNFα基因mRNA表达均显著降低，而IL-10和TGFβ基因mRNA表达均显著增加，同时BpIL-10蛋白的表达也显著增加。此外，低氧胁迫下，迟钝爱德华氏菌感染导致大弹涂鱼MO/MΦ的死亡数量显著减少。　　综上，大弹涂鱼HIF-1α具有重要的免疫功能，可能通过增强巨噬细胞的吞噬和杀菌能力，调节促炎及抑炎细胞因子的表达等，提高机体对低氧胁迫下细菌感染的免疫保护能力。研究结果丰富了鱼类免疫学知识，为适度低氧强化鱼类免疫功能提供理论依据，也为分子手段监控鱼类健康养殖提供技术支撑，对大弹涂鱼病害防治具有重要的指导意义。

成果名称：	大弹涂鱼HIF-1α在低氧下对巨噬细胞的调控作用研究	关键词：	大弹涂鱼;低氧胁迫;炎症反应;HIF-1α;巨噬细胞
成果类别：		一级分类名称：	农业生物技术
二级分类名称：	水产养殖	三级分类名称：
研究起止时间：	2016.09 至2018.07	成果体现形式（应用技术类）：	无
成果属性：		成果体现形式（基础理论类）：
技术成熟度：		技术水平：
研究形式：		学科分类1：
单位名称：	宁波大学	学科分类2：
中图分类号1：		所属高新技术类别：
中图分类号2：		课题来源：
应用行业：		课题立项名称：
国家科技计划子类别：		课题立项编号：	2017A610285
经费实际投入额（万元）：	5.00	评价单位：	宁波大学
评价形式：	无	应用状态：	无
评价日期：	2018.07.02	转让范围：
评价证书号：	甬科验字[2018]第23-43号	推荐单位：	宁波市科技局
推广形式：	无	成果登记号：	18022343
成果简介：	在低氧诱导的炎症反应中，HIF-1α发挥着不可替代的核心作用。通过实施，本研究得到以后结果：　　1、大弹涂鱼HIF-1α基因（BpHIF-1α）mRNA在健康大弹涂鱼中广泛表达，其中肠道BpHIF-1α基因mRNA表达量最高；低氧胁迫或迟钝爱德华氏菌感染均能诱导其在大弹涂鱼多数重要组织中表达量显著增加；在迟钝爱德华氏菌感染后，BpHIF-1α的下游基因葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter 1， Glut1）、血管内皮生长因子a（vascular endothelial growth factor a， Vegf-a）和醛缩酶C（Aldolase C， Aldoc），以及巨噬细胞炎症标记物基因诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase， iNOS）和鱼类巨噬细胞标记物基因集落刺激因子1受体（colony stimulating factor 1 receptor， CSF1R）在皮肤中mRNA表达量显著增加，在肠道中表达量均显著减少；揭示BpHIF-1α及其下游分子在低氧胁迫或迟钝爱德华氏菌感染诱导的免疫反应中发挥重要作用。　　2、进一步研究了低氧胁迫对细菌感染大弹涂鱼的整体免疫作用，结果发现，低氧胁迫显著降低迟钝爱德华氏菌感染大弹涂鱼的肝、脾、肾和血液中的组织载菌量，显著增加迟钝爱德华氏菌感染大弹涂鱼的存活率，揭示HIF-1α在低氧胁迫下迟钝爱德华氏菌感染大弹涂鱼具有免疫保护作用。　　3、为了确定HIF-1α在低氧胁迫及迟钝爱德华氏菌感染下对大弹涂鱼的免疫保护作用机制，在细胞水平上对其免疫调节功能进行研究。通过Giemsa′s染色和流式细胞术确定大弹涂鱼肾源MO/MΦ中87.4%为CSF1R阳性细胞；大弹涂鱼MO/MΦ在迟钝爱德华氏菌感染或低氧胁迫下，BpHIF-1α基因mRNA和蛋白表达量均显著增加，其下游基因BpGlut1、BpVegf-a和BpAldoc基因mRNA表达量也显著增加；敲低BpHIF-1α基因表达后，低氧胁迫下大弹涂鱼MO/MΦ的吞噬及杀菌活性均显著降低，且低氧胁迫和迟钝爱德华氏菌感染协同作用下，MO/MΦ中IL-1β和TNFα基因mRNA表达均显著降低，而IL-10和TGFβ基因mRNA表达均显著增加，同时BpIL-10蛋白的表达也显著增加。此外，低氧胁迫下，迟钝爱德华氏菌感染导致大弹涂鱼MO/MΦ的死亡数量显著减少。　　综上，大弹涂鱼HIF-1α具有重要的免疫功能，可能通过增强巨噬细胞的吞噬和杀菌能力，调节促炎及抑炎细胞因子的表达等，提高机体对低氧胁迫下细菌感染的免疫保护能力。研究结果丰富了鱼类免疫学知识，为适度低氧强化鱼类免疫功能提供理论依据，也为分子手段监控鱼类健康养殖提供技术支撑，对大弹涂鱼病害防治具有重要的指导意义。
联系人：	科技处	成果登记日期：	2018-10-23
联系人email：		单位代码：	93300007
邮政编码222：	315211	联系人电话：	0574-87609127
单位传真：	0574-87605266	单位通讯地址：	浙江省宁波市江北区风华路818号
单位所在省市：		单位电话：	0574-87609127;87600223
转让收入（万元）：	0	单位属性：
合作完成单位：		已转让企业数（个）：	0
成果发布年份：	2018	知识产权形式：
成果完成人：	李长红;韩艳辉;张学恒;管峰;马文静;朱凯	资源采集日期：	2019-03-15

大弹涂鱼HIF-1α在低氧下对巨噬细胞的调控作用研究

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