简要技术说明： 1、采用高脂喂养GK大鼠，构建一个环境因素作用的大鼠模型，用于非药物干预胰岛素抵抗的生理机制研究，并采用RT-PCR方法、免疫组织化学染色的技术评价GK大鼠胰岛B细胞中甘油三脂含量及激素敏感性脂肪酶（HSL）的表达和活性的变化。 2、充分灌注胰腺：在剔除胰周脂肪、血管、淋巴结等组织时，先保留胰腺被膜，减少胰酶溶液的渗漏，确保充分灌注胰腺，灌注充分后再迅速剔除胰腺被膜。 3、采用以Ricordi自动分离装置为核心的胰岛消化技术。 4、检测鼠胰岛素药盒：避免采用人免疫反应性胰岛素药盒所造成的测定结果偏差大的问题。 5、以肾上腺素刺激下的FFA的含量代表HSL的活性。 　　应用前景：据国际糖尿病联盟统计，2006年全球糖尿病患病人数为2.46亿，预计2025年将达3.8亿。无论是发达国家还是发展中国家，糖尿病都是导致成年人伤残和死亡的重要原因，严重威胁着人类的健康。在近期举行的2009年糖尿病国际论坛上公布的数据显示，2007年调查我国城市人口中成年人糖尿病发病率已达9.7﹪，近20年来增长了10倍，我国已经成为全球糖尿病增长速度最快的国家之一。预计到2025年我国糖尿病患者人数可能会达到6000万。中国城市糖尿病直接的医疗费用80﹪以上用在了有并发症的糖尿病患者。大量的研究结果证实血糖控制欠佳可以产生并发症，包括糖尿病大血管病变和微血管病变，而糖尿病心血管病变是导致糖尿病患者死亡的最重要的原因。2型糖尿病是一种进展性疾病，患者病情随时间推移进行性恶化，即使使用常规药物治疗也很难长期良好控制血糖。正如英国前瞻性糖尿病研究所示，无论口服药物还是胰岛素单药治疗，糖化血红蛋白均难以持续达标，探其原因与B细胞功能的进行性减退相关。由于糖尿病具有一定的遗传基础，系多基因多因素疾病，使得糖尿病发病机制异常复杂，至今其分子生物学病因仍然不明，这也是目前不能有效防治的原因。为此，我们从细胞、分子生物学角度研究，提出了新的见解，为基础研究领域增添了新的血液。本研究的发现强调了糖代谢异常时高FFA在胰岛B细胞中脂质代谢中的作用，并初步探讨了其分子机制，进一步扩展和丰富了对高FFA导致胰岛素抵抗的机制的认识。通过分子机制的研究可发现新的药物治疗靶点以阻止、逆转或者延缓胰岛素抵抗的病理进程。

　　简要技术说明： 1、采用高脂喂养GK大鼠，构建一个环境因素作用的大鼠模型，用于非药物干预胰岛素抵抗的生理机制研究，并采用RT-PCR方法、免疫组织化学染色的技术评价GK大鼠胰岛B细胞中甘油三脂含量及激素敏感性脂肪酶（HSL）的表达和活性的变化。 2、充分灌注胰腺：在剔除胰周脂肪、血管、淋巴结等组织时，先保留胰腺被膜，减少胰酶溶液的渗漏，确保充分灌注胰腺，灌注充分后再迅速剔除胰腺被膜。 3、采用以Ricordi自动分离装置为核心的胰岛消化技术。 4、检测鼠胰岛素药盒：避免采用人免疫反应性胰岛素药盒所造成的测定结果偏差大的问题。 5、以肾上腺素刺激下的FFA的含量代表HSL的活性。 　　应用前景：据国际糖尿病联盟统计，2006年全球糖尿病患病人数为2.46亿，预计2025年将达3.8亿。无论是发达国家还是发展中国家，糖尿病都是导致成年人伤残和死亡的重要原因，严重威胁着人类的健康。在近期举行的2009年糖尿病国际论坛上公布的数据显示，2007年调查我国城市人口中成年人糖尿病发病率已达9.7﹪，近20年来增长了10倍，我国已经成为全球糖尿病增长速度最快的国家之一。预计到2025年我国糖尿病患者人数可能会达到6000万。中国城市糖尿病直接的医疗费用80﹪以上用在了有并发症的糖尿病患者。大量的研究结果证实血糖控制欠佳可以产生并发症，包括糖尿病大血管病变和微血管病变，而糖尿病心血管病变是导致糖尿病患者死亡的最重要的原因。2型糖尿病是一种进展性疾病，患者病情随时间推移进行性恶化，即使使用常规药物治疗也很难长期良好控制血糖。正如英国前瞻性糖尿病研究所示，无论口服药物还是胰岛素单药治疗，糖化血红蛋白均难以持续达标，探其原因与B细胞功能的进行性减退相关。由于糖尿病具有一定的遗传基础，系多基因多因素疾病，使得糖尿病发病机制异常复杂，至今其分子生物学病因仍然不明，这也是目前不能有效防治的原因。为此，我们从细胞、分子生物学角度研究，提出了新的见解，为基础研究领域增添了新的血液。本研究的发现强调了糖代谢异常时高FFA在胰岛B细胞中脂质代谢中的作用，并初步探讨了其分子机制，进一步扩展和丰富了对高FFA导致胰岛素抵抗的机制的认识。通过分子机制的研究可发现新的药物治疗靶点以阻止、逆转或者延缓胰岛素抵抗的病理进程。