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Aflatoxin M1快速测定单克隆抗体的制造及其应用研究

成果基本信息
关键词: 临床检验;黄曲霉毒素M1;单克隆抗体;快速检测
成果类别: 应用技术 技术成熟度: 成熟应用阶段
体现形式(基础理论类): / 体现形式(应用技术类): 新工艺
成果登记号: 黑科成登字2010-0654 资源采集日期: 10-10-15
研究情况
单位名称: 黑龙江八一农垦大学 技术水平: 国内领先
评价证书号: 黑科验字2010第49号 评价单位: 黑龙江省自然科学基金委员会办公室
评价日期: 2010.04.27 评价证书号: 黑科验字2010第49号
转化情况
转让范围: 允许出口 推广形式: 合作开发
已转让企业数(个): 1
联系方式
联系人(平台): 孵化基地 联系人(平台)电话: 0771-3394012
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成果简介

  利用AFM1-oxime-BSA偶联物免疫Balb/c小鼠,利用具有良好抗体效价的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞株进行融合,开发出稳定分泌抗黄曲霉毒素M1抗体的杂交瘤细胞株系。然后制备单克隆抗体,并确立了利用该抗体的ELISA的检测条件,研制出实验用试剂盒,建立了定量检测AFM1的ELISA方法,最后对国内外乳制品中的AFM1进行检测。得到如下研究结果:   ① 利用小鼠脾脏与骨髓瘤细胞融后,经三次亚克隆,获得了一株稳定分泌抗AFM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。   ② 制备了单克隆抗体并对其进行鉴定。结果表明,获得的杂交瘤细胞染色体数目为90±10条,为脾细胞和Sp2/0细胞融合而成。抗体效价测定结果表明,抗体纯化前效价可达5000×29(P/N>3.07)以上,纯化后抗体效价可达5000×28(P/N>2.35)以上。所得抗体分子量约为150kDa。   ③ 建立了定量ELISA检测方法,确定线性回归方程为y=-8.0064X+83.403(R2=0.9976),线性范围为0.08~5ng/mL,最低检出浓度是0.08ng/mL。

成果名称: Aflatoxin M1快速测定单克隆抗体的制造及其应用研究 关键词: 临床检验;黄曲霉毒素M1;单克隆抗体;快速检测
成果类别: 应用技术 一级分类名称: 医学生物工程
二级分类名称: / 三级分类名称: /
研究起止时间: 2005.08 至2008.10 成果体现形式(应用技术类): 新工艺
成果属性: 国外引进消化吸收创新 成果体现形式(基础理论类): /
技术成熟度: 成熟应用阶段 技术水平: 国内领先
研究形式: 与国外合作 学科分类1: 320.11
单位名称: 黑龙江八一农垦大学 学科分类2: /
中图分类号1: R446.62 所属高新技术类别: 生物、医药和医疗器械
中图分类号2: / 课题来源: 部门基金
应用行业: 卫生、社会保障和社会福利业 课题立项名称:
国家科技计划子类别: / 课题立项编号: Lc05c11
经费实际投入额 (万元): 7 评价单位: 黑龙江省自然科学基金委员会办公室
评价形式: 验收 应用状态: 稳定应用
评价日期: 2010.04.27 转让范围: 允许出口
评价证书号: 黑科验字2010第49号 推荐单位: 黑龙江省农垦总局
推广形式: 合作开发 成果登记号: 黑科成登字2010-0654
成果简介:

  利用AFM1-oxime-BSA偶联物免疫Balb/c小鼠,利用具有良好抗体效价的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞株进行融合,开发出稳定分泌抗黄曲霉毒素M1抗体的杂交瘤细胞株系。然后制备单克隆抗体,并确立了利用该抗体的ELISA的检测条件,研制出实验用试剂盒,建立了定量检测AFM1的ELISA方法,最后对国内外乳制品中的AFM1进行检测。得到如下研究结果:   ① 利用小鼠脾脏与骨髓瘤细胞融后,经三次亚克隆,获得了一株稳定分泌抗AFM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。   ② 制备了单克隆抗体并对其进行鉴定。结果表明,获得的杂交瘤细胞染色体数目为90±10条,为脾细胞和Sp2/0细胞融合而成。抗体效价测定结果表明,抗体纯化前效价可达5000×29(P/N>3.07)以上,纯化后抗体效价可达5000×28(P/N>2.35)以上。所得抗体分子量约为150kDa。   ③ 建立了定量ELISA检测方法,确定线性回归方程为y=-8.0064X+83.403(R2=0.9976),线性范围为0.08~5ng/mL,最低检出浓度是0.08ng/mL。

联系人: 张东杰 成果登记日期: 10-6-2
联系人email: byndkjc@126.com 单位代码: 92300070
邮政编码222: 163319 联系人电话: 0459-6819123
单位传真: 04596819235 单位通讯地址: 大庆市高新区新阳路2号
单位所在省市: 黑龙江省 单位电话: 0459-6819126;6819390;6819235
转让收入(万元): 100 单位属性: 大专院校
合作完成单位: 韩国国立庆大学;大庆麦伯康生物技术有限公司 已转让企业数(个): 1
成果发布年份: 2010 知识产权形式:
成果完成人: 裴世春;郑丽娜;唐彦君;张丽萍;曹龙奎 资源采集日期: 10-10-15

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