| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 临床检验;黄曲霉毒素M1;单克隆抗体;快速检测 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 成熟应用阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新工艺 | |||
| 成果登记号: | 黑科成登字2010-0654 | 资源采集日期: | 10-10-15 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 黑龙江八一农垦大学 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | 黑科验字2010第49号 | 评价单位: | 黑龙江省自然科学基金委员会办公室 | ||
| 评价日期: | 2010.04.27 | 评价证书号: | 黑科验字2010第49号 | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 允许出口 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 1 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
利用AFM1-oxime-BSA偶联物免疫Balb/c小鼠,利用具有良好抗体效价的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞株进行融合,开发出稳定分泌抗黄曲霉毒素M1抗体的杂交瘤细胞株系。然后制备单克隆抗体,并确立了利用该抗体的ELISA的检测条件,研制出实验用试剂盒,建立了定量检测AFM1的ELISA方法,最后对国内外乳制品中的AFM1进行检测。得到如下研究结果: ① 利用小鼠脾脏与骨髓瘤细胞融后,经三次亚克隆,获得了一株稳定分泌抗AFM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。 ② 制备了单克隆抗体并对其进行鉴定。结果表明,获得的杂交瘤细胞染色体数目为90±10条,为脾细胞和Sp2/0细胞融合而成。抗体效价测定结果表明,抗体纯化前效价可达5000×29(P/N>3.07)以上,纯化后抗体效价可达5000×28(P/N>2.35)以上。所得抗体分子量约为150kDa。 ③ 建立了定量ELISA检测方法,确定线性回归方程为y=-8.0064X+83.403(R2=0.9976),线性范围为0.08~5ng/mL,最低检出浓度是0.08ng/mL。 |