简要技术说明： 　　本项目以感染、肿瘤和自身免疫病等疾病为模型，在分子水平（抗原、抗体、补体、细胞因子和胞内、外的调节分子等）探讨这些分子对免疫应答的正、负调节作用，从微观水平阐明这些分子在各种疾病模型中的免疫调节作用及其机制。这些研究成果不但丰富了现代免疫的基础理论，也为相关疾病的发生机制及其免疫学干预提供了合理的靶标。该项目在国家“863”、“973”和国家自然科学基金重大项目等支持下，采用免疫学、生物信息学、计算机科学、药学等多学科理论和技术，围绕“抗原免疫应答的调控研究”这一当代免疫学的核心问题进行了系统且深入的研究，在国际范围内提出了具有影响力的新理论和新见解。 　　1.发现系列新抗原靶标并鉴定其表位。发现IMPDH1和HSP60为结肠癌的肿瘤相关抗原；鉴定了骨肉瘤癌基因SSX家族成员共同的HLA-A×0201限制性表位；鉴定了人RV病毒Wa株VP7糖蛋白中HLA-A2.1限制性CTL表位P18-26；发现并鉴定了附睾蛋白酶抑制因子（Eppin）和卵泡刺激素受体（FSHR）新的优势性B细胞表位，它们可以诱导长期有效的抗原特异性免疫应答，并有良好的抑制雄性小鼠生育能力的效应。确定了H5N1 HA抗原位点的精确抗原性变异，证明了H5亚型HA分子存在免疫优势性位点，对这些位点的改变可能增强疫苗株的免疫原性。 　 [Proteomics.2007，1，336-342；Mol Immunol.2008 May；45(9)：2455-64；Gynecol Endocrinol.2009 Jun 23：1-11；Vaccine. 2009 Jan 29；27(5)：733-40；Ⅵral Immunol.2009 Jun；22(3)：189-94；Int J Colorectal Dis. 2009 Nov；24(11)：1271-9] 　　2.创立了提高抗原免疫应答的新策略，为相关疾病免疫学治疗提供了一种合理的选择。利用树突状细胞特异的黏附分子DC-SIGN是Lewis X寡糖受体的特性，设计了DC细胞靶向性疫苗；证明了轮状病毒VP7转基因马铃薯经过50代传代后，仍然有良好的抗病毒效应；证实编码布氏杆菌中核糖体蛋白L7/L12和外膜脂蛋白Omp16基因的双价DNA疫苗，其比相应单价疫苗提供了更好的保护性免疫应答。 　　[Immunology. 2007 Jun；121(2)：174-82；Ⅵrology. 2006 Dec 5-20；356(1-2)：171-8；Infect Immun. 2006；74(5)：2734-41.] 　　3.深入探讨了抗原交叉递呈分子机制，完善了相关免疫学理论，也为相关免疫学防治提供了干预环节。发现Rab3b/3c阳性囊泡参与树突状细胞中外源性抗原交叉递呈到内源性抗原递呈途径中；同时，我们还利用慢病毒快速制备树突状细胞特异性转基因小鼠，为研究DC的在体功能提供了一个方便有效的系统。 　　[Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Sep 15；106(37)：15801-6；Eur J Immunol. 2005 Jul；35(7)：2041-50；Transgenic Res.2009 May 26(Epub ahead of print）] 　　4.证实了异源性抗体同样具有有效封闭病原体的作用，并对相应抗体表位进行了精确制图。我们在国内外首次制备了SARS病毒特异性F(ab’)2片段，证实了该抗体不但可以完全预防SARS病毒对体外培养细胞和BALB/c小鼠的感染，而且还对多种动物模型均有良好的治疗性效果，且非常安全。证实了靶向SARS病毒S和N蛋白的RNAi策略可有效地预防和治疗SARS病毒对宿主细胞的感染；我们进一步利用酵母呈现技术对SARS病毒核衣壳蛋白（NP）进行了抗体表位作图，确定了NP上的3个构象性和3个线性免疫优势表位，为基于表位的中和抗体制备策略提供了精确数据。 　　[AntIⅥr Ther. 2005；10(5)：681-90；Clin Chem. 2005 Aug；51(8)：1382-96；Int Immunopharmacol. 2007 Dec 15；7(13)：1834-40； Ⅵral Immunol. 2007 Spring；20(1)：197-205；Ⅵral Immunol. 2007 Sep；20(3)：495-502；Int Immunopharmacol. 2007 Mar；7(3)：392-400；J Immunother. 2009 Jan；32(1)：36-41] 　　5.发现了MIC-NKG2D共刺激分子对在疾病发病中的重要作用及其相互作用机制。我们发现并证实了SLE和肿瘤模型中MIC-NKG2D共刺激分子对对NK细胞、CD4+T细胞和NKT样细胞活性调节作用的新功能；单核细胞通过NKG2D-MIC相互作用而活化NKG2D+CD4+T细胞模式是SLE发病的重要机制；肿瘤病人体内存在大量可溶性MIC（sMICs），其与NKT样细胞上的受体NKG2D结合后导致了该受体表达下调，从而导致NKT样细胞的肿瘤杀伤能力下降，造成肿瘤免疫逃逸。 　　[Mol Immunol. 2008 Mar；45(6)：1548-56；Mol Immunol. 2009 Apr；46(7)：1432-42；Immunol Lett. 2008 Oct 30；120(1-2)：65-71] 　　6.发现了B7分子家族新成员促进肾病发生的新机制。我们证实了共刺激分子B7-H1、B7-DC及B7-H4特异性高表达于肾间质纤维化程度严重的活检组织的小管上皮细胞；C5b-9在肾小管上皮细胞的沉积可促进B7-H1的表达，而增强B7-H1信号可促进细胞凋亡；青藤碱及雷公藤可通过下调小管上皮细胞B7-H1或B7-DC的表达而调节T细胞功能。 　　[J Nephrol. 2006 Jul-Aug；19(4)：429-38；Eur J Immunol. 2007 Jan；37(1)：167-76；Mol Immunol. 2006 Mar；43(8)：1088-98；Mol Immunol. 2009 Jan；46(3)：375-83；Int Immunopharmacol. 2005 Aug；5(9)：1446-57；Int Immunopharmacol. 2007 Aug；7(8)： 1102 -10；Kidney Int. 2006 Dec；70(12)：2092-9；Nephron Exp Nephrol. 2006；102(3-4)：e81-92] 　　7.证明了共刺激分子LIGHT、清道夫受体SR-A对原虫和细菌感染具有重要调节作用。我们发现了LTαβ2(mLT)则通过增强细胞免疫应答而在抗利什曼免疫在硕大利什曼原虫感染抗性中有着关键的作用；证明了TLR4激动剂和TLR2激动剂通过促进p38的磷酸化协同诱导RAW264.7 表达SR-A，促进RAW264.7结合和吞噬LPS，从而负调炎症反应，并首次报道了TLR4和TLR2信号之间的一种新的交互关系。 　　[J Immunol. 2007 Nov 15；179(10)：6901-9；J Immunol. 2007 Oct 15；179(8)：5358-66；Mol Immunol.2007 Mar；44(9)：2315-23] 　　8.发现HBV感染中共抑制和共刺激分子途径影响疾病发生和转归。HBV无应答患者的Treg细胞频率升高；Treg细胞的PD-1表达上调，从而活化共抑制信号通路PD-1/PD-L1，抑制机体免疫应答，使部分人群对乙肝疫苗无应答；慢性HBV感染患者的肝组织中PD-1及PD-L1的表达显著上调，且PD-1/PD-L1表达的上调与肝组织炎症及ALT升高密切相关；适当上调PD-L1表达将有利于病毒的控制；HBV X蛋白通过上调的CD40在肝炎源性肝癌细胞中的表达参与了HCC的进程。 　　[Clin Immunol. 2008 Oct；129(1)：176-7；Clin Immunol. 2008 May；127(2)：265-6；Immunol Invest. 2009；38(7)：624-38；Biochem Biophys Res Commun. 2009 Jun 19；384(1)：12-7] 　　9.阐明了影响效应T细胞在机体内生成的数量和存活时间的关键免疫调节分子。我们发现共刺激分子信号的所致SurⅥⅥn的持续表达维持了T细胞长期分裂并调节克隆增殖的程度；aurora B，surⅥⅥn和mTOR是T细胞中G1-S节点的调节分子。 　　[Immunity.2005May；22(5)：621-31； Nat Immunol. 2007 Jan；8(1)：64-73] 　　应用前景： 　　以上研究成果共发表论著156篇，其中在Nat Immunol (IF：26.218)、Immunity (IF：19.226)、Proc Natl Acad Sci USA (IF： 9.866)、Clin Chem (IF：6.522)、J Immunol (IF：6.068)、AntIⅥr Ther (IF：5.633)、Proteomics (IF：5.479) 和Eur J Immunol (IF：4.662)等国际著名学术期刊上发表论著45篇，累计影响因子216.352分，其中影响因子10分以上2篇，5分以上12篇。论文被Nat Immunol、PNAS、Immunity等国际权威学术期刊正面它引和评述218次，被包括美国、英国在内的16个国家的63位研究者函索。本成果在国际学术会议上交流会议论文26次，其中大会特邀报告15次。先后培养了博士后、博士12人、硕士21人、进修生和客座研究63人次，其中2人次获得重庆市优秀博士论文，1人次全军优秀博士论文。 　　通过本研究的开展，在抗原、抗体、共刺激分子和胞内关键调节分子等分子水平部分阐明了抗原免疫应答分子调控机制，完善了相关免疫学理论，促进了免疫学及相关学科发展；所得成果是各种疾病的人工免疫干预的潜在靶标，具有巨大的潜在应用价值，产生了良好社会效益和学术影响。

　　简要技术说明： 　　本项目以感染、肿瘤和自身免疫病等疾病为模型，在分子水平（抗原、抗体、补体、细胞因子和胞内、外的调节分子等）探讨这些分子对免疫应答的正、负调节作用，从微观水平阐明这些分子在各种疾病模型中的免疫调节作用及其机制。这些研究成果不但丰富了现代免疫的基础理论，也为相关疾病的发生机制及其免疫学干预提供了合理的靶标。该项目在国家“863”、“973”和国家自然科学基金重大项目等支持下，采用免疫学、生物信息学、计算机科学、药学等多学科理论和技术，围绕“抗原免疫应答的调控研究”这一当代免疫学的核心问题进行了系统且深入的研究，在国际范围内提出了具有影响力的新理论和新见解。 　　1.发现系列新抗原靶标并鉴定其表位。发现IMPDH1和HSP60为结肠癌的肿瘤相关抗原；鉴定了骨肉瘤癌基因SSX家族成员共同的HLA-A×0201限制性表位；鉴定了人RV病毒Wa株VP7糖蛋白中HLA-A2.1限制性CTL表位P18-26；发现并鉴定了附睾蛋白酶抑制因子（Eppin）和卵泡刺激素受体（FSHR）新的优势性B细胞表位，它们可以诱导长期有效的抗原特异性免疫应答，并有良好的抑制雄性小鼠生育能力的效应。确定了H5N1 HA抗原位点的精确抗原性变异，证明了H5亚型HA分子存在免疫优势性位点，对这些位点的改变可能增强疫苗株的免疫原性。 　 [Proteomics.2007，1，336-342；Mol Immunol.2008 May；45(9)：2455-64；Gynecol Endocrinol.2009 Jun 23：1-11；Vaccine. 2009 Jan 29；27(5)：733-40；Ⅵral Immunol.2009 Jun；22(3)：189-94；Int J Colorectal Dis. 2009 Nov；24(11)：1271-9] 　　2.创立了提高抗原免疫应答的新策略，为相关疾病免疫学治疗提供了一种合理的选择。利用树突状细胞特异的黏附分子DC-SIGN是Lewis X寡糖受体的特性，设计了DC细胞靶向性疫苗；证明了轮状病毒VP7转基因马铃薯经过50代传代后，仍然有良好的抗病毒效应；证实编码布氏杆菌中核糖体蛋白L7/L12和外膜脂蛋白Omp16基因的双价DNA疫苗，其比相应单价疫苗提供了更好的保护性免疫应答。 　　[Immunology. 2007 Jun；121(2)：174-82；Ⅵrology. 2006 Dec 5-20；356(1-2)：171-8；Infect Immun. 2006；74(5)：2734-41.] 　　3.深入探讨了抗原交叉递呈分子机制，完善了相关免疫学理论，也为相关免疫学防治提供了干预环节。发现Rab3b/3c阳性囊泡参与树突状细胞中外源性抗原交叉递呈到内源性抗原递呈途径中；同时，我们还利用慢病毒快速制备树突状细胞特异性转基因小鼠，为研究DC的在体功能提供了一个方便有效的系统。 　　[Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Sep 15；106(37)：15801-6；Eur J Immunol. 2005 Jul；35(7)：2041-50；Transgenic Res.2009 May 26(Epub ahead of print）] 　　4.证实了异源性抗体同样具有有效封闭病原体的作用，并对相应抗体表位进行了精确制图。我们在国内外首次制备了SARS病毒特异性F(ab’)2片段，证实了该抗体不但可以完全预防SARS病毒对体外培养细胞和BALB/c小鼠的感染，而且还对多种动物模型均有良好的治疗性效果，且非常安全。证实了靶向SARS病毒S和N蛋白的RNAi策略可有效地预防和治疗SARS病毒对宿主细胞的感染；我们进一步利用酵母呈现技术对SARS病毒核衣壳蛋白（NP）进行了抗体表位作图，确定了NP上的3个构象性和3个线性免疫优势表位，为基于表位的中和抗体制备策略提供了精确数据。 　　[AntIⅥr Ther. 2005；10(5)：681-90；Clin Chem. 2005 Aug；51(8)：1382-96；Int Immunopharmacol. 2007 Dec 15；7(13)：1834-40； Ⅵral Immunol. 2007 Spring；20(1)：197-205；Ⅵral Immunol. 2007 Sep；20(3)：495-502；Int Immunopharmacol. 2007 Mar；7(3)：392-400；J Immunother. 2009 Jan；32(1)：36-41] 　　5.发现了MIC-NKG2D共刺激分子对在疾病发病中的重要作用及其相互作用机制。我们发现并证实了SLE和肿瘤模型中MIC-NKG2D共刺激分子对对NK细胞、CD4+T细胞和NKT样细胞活性调节作用的新功能；单核细胞通过NKG2D-MIC相互作用而活化NKG2D+CD4+T细胞模式是SLE发病的重要机制；肿瘤病人体内存在大量可溶性MIC（sMICs），其与NKT样细胞上的受体NKG2D结合后导致了该受体表达下调，从而导致NKT样细胞的肿瘤杀伤能力下降，造成肿瘤免疫逃逸。 　　[Mol Immunol. 2008 Mar；45(6)：1548-56；Mol Immunol. 2009 Apr；46(7)：1432-42；Immunol Lett. 2008 Oct 30；120(1-2)：65-71] 　　6.发现了B7分子家族新成员促进肾病发生的新机制。我们证实了共刺激分子B7-H1、B7-DC及B7-H4特异性高表达于肾间质纤维化程度严重的活检组织的小管上皮细胞；C5b-9在肾小管上皮细胞的沉积可促进B7-H1的表达，而增强B7-H1信号可促进细胞凋亡；青藤碱及雷公藤可通过下调小管上皮细胞B7-H1或B7-DC的表达而调节T细胞功能。 　　[J Nephrol. 2006 Jul-Aug；19(4)：429-38；Eur J Immunol. 2007 Jan；37(1)：167-76；Mol Immunol. 2006 Mar；43(8)：1088-98；Mol Immunol. 2009 Jan；46(3)：375-83；Int Immunopharmacol. 2005 Aug；5(9)：1446-57；Int Immunopharmacol. 2007 Aug；7(8)： 1102 -10；Kidney Int. 2006 Dec；70(12)：2092-9；Nephron Exp Nephrol. 2006；102(3-4)：e81-92] 　　7.证明了共刺激分子LIGHT、清道夫受体SR-A对原虫和细菌感染具有重要调节作用。我们发现了LTαβ2(mLT)则通过增强细胞免疫应答而在抗利什曼免疫在硕大利什曼原虫感染抗性中有着关键的作用；证明了TLR4激动剂和TLR2激动剂通过促进p38的磷酸化协同诱导RAW264.7 表达SR-A，促进RAW264.7结合和吞噬LPS，从而负调炎症反应，并首次报道了TLR4和TLR2信号之间的一种新的交互关系。 　　[J Immunol. 2007 Nov 15；179(10)：6901-9；J Immunol. 2007 Oct 15；179(8)：5358-66；Mol Immunol.2007 Mar；44(9)：2315-23] 　　8.发现HBV感染中共抑制和共刺激分子途径影响疾病发生和转归。HBV无应答患者的Treg细胞频率升高；Treg细胞的PD-1表达上调，从而活化共抑制信号通路PD-1/PD-L1，抑制机体免疫应答，使部分人群对乙肝疫苗无应答；慢性HBV感染患者的肝组织中PD-1及PD-L1的表达显著上调，且PD-1/PD-L1表达的上调与肝组织炎症及ALT升高密切相关；适当上调PD-L1表达将有利于病毒的控制；HBV X蛋白通过上调的CD40在肝炎源性肝癌细胞中的表达参与了HCC的进程。 　　[Clin Immunol. 2008 Oct；129(1)：176-7；Clin Immunol. 2008 May；127(2)：265-6；Immunol Invest. 2009；38(7)：624-38；Biochem Biophys Res Commun. 2009 Jun 19；384(1)：12-7] 　　9.阐明了影响效应T细胞在机体内生成的数量和存活时间的关键免疫调节分子。我们发现共刺激分子信号的所致SurⅥⅥn的持续表达维持了T细胞长期分裂并调节克隆增殖的程度；aurora B，surⅥⅥn和mTOR是T细胞中G1-S节点的调节分子。 　　[Immunity.2005May；22(5)：621-31； Nat Immunol. 2007 Jan；8(1)：64-73] 　　应用前景： 　　以上研究成果共发表论著156篇，其中在Nat Immunol (IF：26.218)、Immunity (IF：19.226)、Proc Natl Acad Sci USA (IF： 9.866)、Clin Chem (IF：6.522)、J Immunol (IF：6.068)、AntIⅥr Ther (IF：5.633)、Proteomics (IF：5.479) 和Eur J Immunol (IF：4.662)等国际著名学术期刊上发表论著45篇，累计影响因子216.352分，其中影响因子10分以上2篇，5分以上12篇。论文被Nat Immunol、PNAS、Immunity等国际权威学术期刊正面它引和评述218次，被包括美国、英国在内的16个国家的63位研究者函索。本成果在国际学术会议上交流会议论文26次，其中大会特邀报告15次。先后培养了博士后、博士12人、硕士21人、进修生和客座研究63人次，其中2人次获得重庆市优秀博士论文，1人次全军优秀博士论文。 　　通过本研究的开展，在抗原、抗体、共刺激分子和胞内关键调节分子等分子水平部分阐明了抗原免疫应答分子调控机制，完善了相关免疫学理论，促进了免疫学及相关学科发展；所得成果是各种疾病的人工免疫干预的潜在靶标，具有巨大的潜在应用价值，产生了良好社会效益和学术影响。