目前国内外关于HBV基因亚型的研究较少，HBV基因亚型的鉴定方法也不多，以往用的基因测序法价格昂贵，费时费力，需反复比较分析才能得出结论，无法进行大规模检测。我们将灵敏的巢式多聚酶链反应（nested-PCR）和特异的限制性片段长度多态性（RFLP）技术结合起来，研制出巢式PCR-RFLP基因亚型分型技术，通过将PCR产物进行酶切后产生不同大小的DNA片断，即能用肉眼清晰辨别出乙肝病毒的Bj和Ba基因亚型，使基因亚型的鉴定过程简捷、快速、直观，而且准确性和特异性都很高，有利于大批量标本的检测。 　　该技术的原理是根据前C区和C区与C型有无重组序列，可将B型HBV分为Ba和Bj两种亚型。在B型HBV的1838位点处所有Ba亚型均为A碱基，而所有Bj亚型为G碱基，利用这一点研制出一种能快速简便区分两种亚型的PCR-RFLP法，即在鉴定Bj亚型时将引物3′端的第4位碱基C改为A，PCR扩增后产物即可得到SpeI序列（ACTAGT），经SpeI酶切后如能产生89bp大小片段即可鉴定为Bj亚型HBV感染；同样将引物3′端的第3位碱基C改为T，PCR扩增后产物即可得到MseI序列（TTAA），经MseI酶切后如能产生89bp大小片段即可鉴定为Bj亚型HBV感染。 　　本课题组负责人是国内最早研究乙肝病毒基因亚型的学者之一，在国内最先采用巢式PCR-RFLP法进行乙肝病毒基因亚型的鉴定，取得了很好的效果，被国内学者广泛采用。该课题在原有基础上，首次将巢式PCR-RFLP基因亚型鉴定技术应用于江西省乙肝病人的研究，以进一步确定我省乙肝病毒Bj和Ba基因亚型的分布情况，并试图研究江西省乙肝患者病情变化与乙肝病毒基因亚型之间的关系。

　　目前国内外关于HBV基因亚型的研究较少，HBV基因亚型的鉴定方法也不多，以往用的基因测序法价格昂贵，费时费力，需反复比较分析才能得出结论，无法进行大规模检测。我们将灵敏的巢式多聚酶链反应（nested-PCR）和特异的限制性片段长度多态性（RFLP）技术结合起来，研制出巢式PCR-RFLP基因亚型分型技术，通过将PCR产物进行酶切后产生不同大小的DNA片断，即能用肉眼清晰辨别出乙肝病毒的Bj和Ba基因亚型，使基因亚型的鉴定过程简捷、快速、直观，而且准确性和特异性都很高，有利于大批量标本的检测。 　　该技术的原理是根据前C区和C区与C型有无重组序列，可将B型HBV分为Ba和Bj两种亚型。在B型HBV的1838位点处所有Ba亚型均为A碱基，而所有Bj亚型为G碱基，利用这一点研制出一种能快速简便区分两种亚型的PCR-RFLP法，即在鉴定Bj亚型时将引物3′端的第4位碱基C改为A，PCR扩增后产物即可得到SpeI序列（ACTAGT），经SpeI酶切后如能产生89bp大小片段即可鉴定为Bj亚型HBV感染；同样将引物3′端的第3位碱基C改为T，PCR扩增后产物即可得到MseI序列（TTAA），经MseI酶切后如能产生89bp大小片段即可鉴定为Bj亚型HBV感染。 　　本课题组负责人是国内最早研究乙肝病毒基因亚型的学者之一，在国内最先采用巢式PCR-RFLP法进行乙肝病毒基因亚型的鉴定，取得了很好的效果，被国内学者广泛采用。该课题在原有基础上，首次将巢式PCR-RFLP基因亚型鉴定技术应用于江西省乙肝病人的研究，以进一步确定我省乙肝病毒Bj和Ba基因亚型的分布情况，并试图研究江西省乙肝患者病情变化与乙肝病毒基因亚型之间的关系。