子宫颈癌的发病率位居妇科肿瘤第二位，研究发现子宫颈癌的发生与人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染有关。99.7﹪的子宫颈癌均检测出HPV，HPV持续感染在宫颈癌发生过程中发挥着重要作用，如检测宫颈分泌物HPV DNA为阴性，则宫颈癌的危险性几乎可以忽略。 本研究的主要内容：应用聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）和变性高效液相色谱（Denaturing High Performance Liquid Chromatography，dHPLC）技术，研究开发临床实用、价格低廉、一次性实验能把目前已知的高危型、可能致癌型及常见的低危型HPV进行分型的新型临床检测试剂。技术说明和技术性能指标如下： 1.通用引物设计：扩增各HPV亚型的通用引物定位于L1区： 2.标准HPV重组质粒dHPLC参照分离图形的确定：将9种标准HPV亚型基因组的重组质粒作模板、引物为MY09和MY11进行PCR扩增，PCR产物用核苷酸片断分析系统进行分离，记录各HPV亚型分离峰的出现时间，建立各HPV亚型的参照分离图形。 3.临床标本HPV亚型分析：随机抽取经美国Digene公司Hybird Capture II检测法RLU/Cutoff比值≥1.0的标本。按标准方法提取DNA、PCR扩增（所用引物为MY09和MY11），PCR产物用核苷酸片断分析系统进行分离，经核苷酸片断分析系统处理后，因HPV亚型扩增片断DNA的Tm值不同，分离峰图形的出项时间有差异，记录各标本分离峰的出现时间，并与标准HPV重组质粒dHPLC参照分离图形进行比较，做出临床标本HPV亚型诊断。与标准分离图型有差异的标本，将进行DNA序列测定直接确定亚型。 4.PCR产物DNA序列分析或寡核苷酸探针斑点杂交技术再次确认：相应的临床标本PCR产物作DNA序列测定或寡核苷酸探针斑点杂交技术，再次确认HPV亚型。 5.新型诊断试剂定型批量生产，临床应用。

子宫颈癌的发病率位居妇科肿瘤第二位，研究发现子宫颈癌的发生与人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染有关。99.7﹪的子宫颈癌均检测出HPV，HPV持续感染在宫颈癌发生过程中发挥着重要作用，如检测宫颈分泌物HPV DNA为阴性，则宫颈癌的危险性几乎可以忽略。 本研究的主要内容：应用聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）和变性高效液相色谱（Denaturing High Performance Liquid Chromatography，dHPLC）技术，研究开发临床实用、价格低廉、一次性实验能把目前已知的高危型、可能致癌型及常见的低危型HPV进行分型的新型临床检测试剂。技术说明和技术性能指标如下： 1.通用引物设计：扩增各HPV亚型的通用引物定位于L1区： 2.标准HPV重组质粒dHPLC参照分离图形的确定：将9种标准HPV亚型基因组的重组质粒作模板、引物为MY09和MY11进行PCR扩增，PCR产物用核苷酸片断分析系统进行分离，记录各HPV亚型分离峰的出现时间，建立各HPV亚型的参照分离图形。 3.临床标本HPV亚型分析：随机抽取经美国Digene公司Hybird Capture II检测法RLU/Cutoff比值≥1.0的标本。按标准方法提取DNA、PCR扩增（所用引物为MY09和MY11），PCR产物用核苷酸片断分析系统进行分离，经核苷酸片断分析系统处理后，因HPV亚型扩增片断DNA的Tm值不同，分离峰图形的出项时间有差异，记录各标本分离峰的出现时间，并与标准HPV重组质粒dHPLC参照分离图形进行比较，做出临床标本HPV亚型诊断。与标准分离图型有差异的标本，将进行DNA序列测定直接确定亚型。 4.PCR产物DNA序列分析或寡核苷酸探针斑点杂交技术再次确认：相应的临床标本PCR产物作DNA序列测定或寡核苷酸探针斑点杂交技术，再次确认HPV亚型。 5.新型诊断试剂定型批量生产，临床应用。