| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 酶免试剂盒;血清铁蛋白 | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 成熟应用阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新材料 | |||
| 成果登记号: | 津20090779 | 资源采集日期: | 10-2-10 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 技术水平: | 国内领先 | ||
| 评价证书号: | 津科成鉴字S[2009]086号 | 评价单位: | 天津市高新技术成果转化中心 | ||
| 评价日期: | 2009.04.09 | 评价证书号: | 津科成鉴字S[2009]086号 | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 限国内转让 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
血清铁蛋白是一种含铁蛋白质。常作为血清标志物,用于肿瘤常规筛查和肿瘤辅助诊断,同时作为缺铁性贫血的重要实验室检测指标。 将生物素化牛血清白蛋白包被在酶标反应板上,再加入链霉亲和素,亲和素与生物素结合后制备亲和素包被的酶标反应板。抗体连接生物素,制备生物素化抗体。检测同时向微孔板中加入生物素化抗体和待检抗原。血清中铁蛋白(抗原)与抗铁蛋白(抗体)均处于液相中,二者快速结合形成抗原抗体复合物。与此同时,与抗体偶联的生物素分子与酶标反应板中的亲和素结合,将免疫复合物固定在酶标反应板表面。再加入酶标记抗铁蛋白抗体,并与免疫复合物中抗原分子结合,同样形成双抗体夹心复合物。最后,加入酶底物显色,测光密度值。 传统血清铁蛋白检测试剂盒采用双抗体夹心法,存在酶联免疫吸附试验固有缺陷,如:包被抗体利用率低,非均相反应达到平衡时间长等。本文对现有双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清铁蛋白方法进行改进,建立基于生物素亲和素间接包被模式和将抗原抗体反应置于全部液相中的全新酶标技术并用于血清铁蛋白检测方法。此方法不仅能够降低包被抗体用量,降低制备成本。而且,还可提高反应速率,拓宽铁蛋白检测范围,减少钩状效应。经方法学考核显示,本方法具有较好试剂盒稳定性、特异性、重复性和较好检测范围,适合临床应用。 此项技术不仅适用于铁蛋白检测项目,同样可推广到其他酶标检测项目,具有普遍意义。此项技术是经典固相技术的重大改良,其创新点不仅能够降低包被抗体的用量,降低制备成本。而且,还可提高反应速率,拓宽铁蛋白检测范围,减少钩状效应。 本技术不仅可以应用于酶免疫技术,同样适用于其他非均相免疫分析,如发光免疫、放射免疫分析;不仅适用于包被微孔板条,也可适用于包被微球、试管等。此外,这种间接包被技术成本低、技术要求不高,会有很好的应用前景。虽然已经解决药盒主要技术难题并且逐步完善,但在产品的商品化及标准化等方面还有很多工作要做。 |