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HIV1 ThaiB亚型毒株的感染性克隆及其与APOBEC3G蛋白的相互作用研究

成果基本信息
关键词: HIV1 ThaiB亚型毒株;感染性克隆;抗病毒;vif蛋白;APOBEC3G蛋白
成果类别: 基础理论 技术成熟度: /
体现形式(基础理论类): 论文 体现形式(应用技术类): /
成果登记号: 9112009J4005 资源采集日期: 10-2-10
研究情况
单位名称: 解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 技术水平: 国内领先
评价证书号: 30471496 评价单位: 国家自然科学基金委员会
评价日期: 2007.12.25 评价证书号: 30471496
转化情况
转让范围: / 推广形式: /
已转让企业数(个): 0
联系方式
联系人(平台): 孵化基地 联系人(平台)电话: 0771-3394012
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成果简介

  本项目属于预防医学与卫生学研究领域。针对在我国广泛流行的HIV-1ThaiB亚型毒株,以毒株的感染性克隆及其与APOBEC3G蛋白的相互作用为核心,沿着两条技术路线开展了系列研究,一是构建毒株的感染性克隆并验证其在疫苗研究中的应用效果;二是在毒株流行的地区以HIV一方阳性的夫妻和HIV感染不同进展阶段的病例为研究对象,探索毒株与APOBEC3G蛋白的相互作用及稳定APOBEC3G蛋白的抗病毒策略,研究结果丰富了对HIV-1ThaiB毒株与宿主细胞相互作用的认识、提供了实用的致病机理等相关研究的工具。   主要研究内容包括:1)构建成功HIV-1ThaiB亚型毒株的感染性克隆,鉴定了生物学特性。通过构建DNA质粒、免疫动物及中和抗体检测,验证了其用于疫苗制备和效果评价的效果。3)制备了APOBEC3G和vif蛋白及单克隆抗体,用Ni-NTA pull down技术验证了APOBEC3G蛋白与vif的相互作用。4)以HIV-1ThaiB亚型毒株流行地区只有一方HIV阳性的夫妻和HIV感染不同进展阶段的病人为研究对象,分析APOBEC3G蛋白和HIV-1vif的基因多态性及mRNA表达水平与HIV异性性传播和疾病进展的关系,发现HIV暴露者与感染进程不同的人,APOBEC3G的mRNA水平不同,发现了APOBEC3G基因一个新的SNPs位点,确定了ThaiB毒株vif基因的多态性特征。5)以裂殖酵母为模型,确定APOBEC3G蛋白主要定位于细胞浆、UBA2结构域能够稳定APOBEC3G蛋白、减少Vif介导的APOBEC3G降解并降低包装病毒的感染性。6)利用蛋白质组学方法,分析了MT4细胞感染HIV前后的蛋白表达差异,鉴定了部分上调和下调的蛋白。   本项目的特点:一是直接针对我国的HIV流行毒株制备感染性克隆;二是在人群水平验证APOBEC3G与HIV传播和致病的关系;三是采用多种先进的研究方法,提出了藉APOBEC3G靶点的新型抗病毒策略。本项目已经公开发表12篇论文,其中SCI收录2篇、其余均为中文核心期刊。本项目制备APOBEC3G克隆已经赠送中国科学院两个课题组使用,效果良好。感染性克隆被美国LANL HIV Database收录。

成果名称: HIV1 ThaiB亚型毒株的感染性克隆及其与APOBEC3G蛋白的相互作用研究 关键词: HIV1 ThaiB亚型毒株;感染性克隆;抗病毒;vif蛋白;APOBEC3G蛋白
成果类别: 基础理论 一级分类名称: 医学生物工程
二级分类名称: / 三级分类名称: /
研究起止时间: 2002.10 至2007.12 成果体现形式(应用技术类): /
成果属性: / 成果体现形式(基础理论类): 论文
技术成熟度: / 技术水平: 国内领先
研究形式: 其他 学科分类1: 180.64
单位名称: 解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 学科分类2: /
中图分类号1: R373.9 所属高新技术类别: /
中图分类号2: / 课题来源: 部门基金
应用行业: 卫生、社会保障和社会福利业 课题立项名称:
国家科技计划子类别: / 课题立项编号: 30471496
经费实际投入额 (万元): 0 评价单位: 国家自然科学基金委员会
评价形式: 验收 应用状态: /
评价日期: 2007.12.25 转让范围: /
评价证书号: 30471496 推荐单位: /
推广形式: / 成果登记号: 9112009J4005
成果简介:

  本项目属于预防医学与卫生学研究领域。针对在我国广泛流行的HIV-1ThaiB亚型毒株,以毒株的感染性克隆及其与APOBEC3G蛋白的相互作用为核心,沿着两条技术路线开展了系列研究,一是构建毒株的感染性克隆并验证其在疫苗研究中的应用效果;二是在毒株流行的地区以HIV一方阳性的夫妻和HIV感染不同进展阶段的病例为研究对象,探索毒株与APOBEC3G蛋白的相互作用及稳定APOBEC3G蛋白的抗病毒策略,研究结果丰富了对HIV-1ThaiB毒株与宿主细胞相互作用的认识、提供了实用的致病机理等相关研究的工具。   主要研究内容包括:1)构建成功HIV-1ThaiB亚型毒株的感染性克隆,鉴定了生物学特性。通过构建DNA质粒、免疫动物及中和抗体检测,验证了其用于疫苗制备和效果评价的效果。3)制备了APOBEC3G和vif蛋白及单克隆抗体,用Ni-NTA pull down技术验证了APOBEC3G蛋白与vif的相互作用。4)以HIV-1ThaiB亚型毒株流行地区只有一方HIV阳性的夫妻和HIV感染不同进展阶段的病人为研究对象,分析APOBEC3G蛋白和HIV-1vif的基因多态性及mRNA表达水平与HIV异性性传播和疾病进展的关系,发现HIV暴露者与感染进程不同的人,APOBEC3G的mRNA水平不同,发现了APOBEC3G基因一个新的SNPs位点,确定了ThaiB毒株vif基因的多态性特征。5)以裂殖酵母为模型,确定APOBEC3G蛋白主要定位于细胞浆、UBA2结构域能够稳定APOBEC3G蛋白、减少Vif介导的APOBEC3G降解并降低包装病毒的感染性。6)利用蛋白质组学方法,分析了MT4细胞感染HIV前后的蛋白表达差异,鉴定了部分上调和下调的蛋白。   本项目的特点:一是直接针对我国的HIV流行毒株制备感染性克隆;二是在人群水平验证APOBEC3G与HIV传播和致病的关系;三是采用多种先进的研究方法,提出了藉APOBEC3G靶点的新型抗病毒策略。本项目已经公开发表12篇论文,其中SCI收录2篇、其余均为中文核心期刊。本项目制备APOBEC3G克隆已经赠送中国科学院两个课题组使用,效果良好。感染性克隆被美国LANL HIV Database收录。

联系人: 科技处 成果登记日期: 09-4-14
联系人email: zhaoyuee@yahoo.com.cn 单位代码: 91100140
邮政编码222: 100071 联系人电话: 010-66948509
单位传真: 010-63813974;63842689 单位通讯地址: 北京市丰台区东大街20号
单位所在省市: 北京市 单位电话: 010-66948506;66948566
转让收入(万元): 0 单位属性: 独立科研机构
合作完成单位: 河南省疾病预防控制中心;河南省确山县疾病预防控制中心 已转让企业数(个): 0
成果发布年份: 2009 知识产权形式:
成果完成人: 李敬云;李林;王铮;刘永健;鲍作义;王哲;庄道民;李韩平;刘思扬;李宏;冯立刚 资源采集日期: 10-2-10

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