任务来源：本课题为自选项目。
应用领域和技术原理：本课题属于医学细胞遗传学领域。用无菌干燥的空针（临用时用肝素湿润）抽取静脉血2～3ml，每瓶用7号针头接种全血18～20滴。置37℃恒温箱中放置72小时左右，即可获得大量有丝分裂的细胞团。在制作染色体标本前，每瓶加入50ul秋水仙素（浓度500ug/ml），并继续在37℃恒温箱中放置50分钟，然后将细胞液移入10ml的离心管中，以2000转／分离心10分钟，除去上清夜。加入已预温到37℃，0.075MKCL溶液5ml，立即用吸管吹打后，置37℃水浴箱中30分钟。在离心前向低渗细胞液中加入固定剂1ml，并轻轻混匀后，以2000转／分离心10分钟。除去上清液，加入3:1的甲醇冰醋酸固定剂5ml，以2000转／分离心10分钟。除去上层固定剂，留下细胞团，加入新固定剂5ml，用吸管再次将细胞团轻轻打散，使细胞团再次悬浮于固定剂中，2000转／分离心10分钟。吸尽上层固定剂，加入新固定剂8～10滴，用吸管轻轻将细胞团打散成细胞液，用吸管滴入预先用冰水冷却的载玻片上，每片滴1～2滴，立即将载玻片置75℃的烤箱中烘烤1小时，自然冷却后，染色或经多种显带技术处理后染色，进行染色体分析。
性能指标：我们在研究中不断摸索、试验，经过上千次的努力，终于解决了烤片时间、胰酶浓度、加入秋水仙素时间、准确判定染色体核型等技术难点，得到的带形清晰易辨，界线清楚，图像漂亮，结果可靠。
国内外同类技术比较：异常核型的发现与登记是中华民族一份极有价值的遗传学资料。本三例染色体核型经中国医学遗传学国家重点实验室、国际人类异常染色体型库鉴定查询为世界首报核型，已被收入“中国人类染色体异常数据库”，同时载入“国际染色体异常核型登记库中”。经河北省医学情报所查新在国内外文献中未见报道，均已达到国内领先水平。
成果的创造性和先进性：建立一种细胞遗传学方法，染色体得到的带形清晰易辨，界限清楚。自1997～2008年2月，我们对3500多名遗传病就诊人员逐一进行外周血染色体培养。经过对染色体G显带等进行区带比较，发现罕见的染色体核型：①46,XX,ins(2;6),t(3;4)；②46,XY,t(3;4)；③46,XY,t(3;10)三例。经中国医学遗传学国家重点实验室夏家辉院士鉴定，查询国内外已有资料未见报道，为世界首报核型。核型成果送河北省科学技术情报研究院查新，在国内外文献中未见报道。在《中华医学遗传学杂志》、《中国优生与遗传》国家级核心期刊发表论文七篇。该成果可为临床诊断治疗提供重要依据，有极强的推广价值。
作用意义：本项目对后基因功能（异常基因功能）研究、基因定位和基因克隆有直接的指导意义。可以为人类基因定位，基因克隆研究指明方向，还可推广、应用到农业科学、古生物科学及其它动物学的研究。本项目在临床遗传学基础研究以及诊断、预防染色体病方面有重要意义。可以指导临床医师治疗疾病，开展肿瘤遗传学的基础研究以及诊断、染色体病的预防。本项目对优生、优育，提高我国人口素质、加快现代化建设步伐有重要的作用，对国家和家庭也有着不可估量的经济效益。
推广应用的范围、条件和前景：染色体数目和结构的改变是染色体病直接诊断依据。探索染色体核型与遗传病的关系是本研究的出发点，依托本项目寻找染色体新的变异位点是本研究的目标。我院有成熟的染色体检查实验室技术，丰富的门诊病人，从大量异常染色体核型寻找新的变异位点，甚至是世界未报核型在理论上是可行的。本研究课题历时10年，在技术上有几大难题：一是烤片时间，二是胰酶浓度，三是加入秋水仙素时间，四是染色体核型判定。针对上述的技术难点，我们在研究中不断摸索、试验，经过上千次的努力，终于解决了上述技术难点。并运用我院的全自动染色体分析系统把处理好的标本放大处理，图像更加漂亮，可读性更强，因而判定结果更可靠。 |
