1.任务来源：吉林省科学技术厅横向课题 合同编号20040401-3 2.应用领域：生物医药；技术原理：基因重组表达。 3.性能指标： （1）rLZ -8目的基因的获得； （2）分泌表达rLZ -8的重组毕赤酵母菌的构建与筛选； （3）重组rLZ -8毕赤酵母工程菌实验室表达； （4） 中试发酵表达rLZ -8； （5）纯化工艺； （6）部分免疫学活性指标的检测； （7）杀伤肿瘤细胞的药效学实验。 4.与国内外同类技术比较： 我们课题组在国内外首次利用毕赤酵母真核表达系统表达了灵芝免疫调节蛋白；在国际同类研究中，我们第一次实现了大规模的rLZ-8生产，并且建立了完整的生产工艺方案；第一次完成了rLZ-8空间结构的测定工作，为深入研究rLZ-8抗肿瘤机制打下了坚实的基础；我们创新性发现rLZ-8可以提升大鼠淋巴细胞低下模型的白细胞数量，与集落刺激因子的作用相似；rLZ-8可以诱导白血病细胞NB4、K562和HL60发生细胞凋亡，这也是我们第一次阐明了真菌免疫调节蛋白杀伤肿瘤细胞的另一可能途径，而以往报道的资料均认为真菌免疫调节蛋白是通过免疫调节的间接机制对肿瘤细胞起杀伤作用；苛瘤小鼠治疗实验表明，rLZ-8可以有效的抑制移植性肿瘤在体内的生长；安全性实验表明，rLZ-8对大鼠血细胞无明显毒性；对主动脉、主静脉血管壁未见病理性破坏作用；骨髓涂片结果表明对造血机能也无病变作用。 5.成果的创造性、先进性： 一，rLZ-8具有对肿瘤细胞专一性杀伤作用的实验结果，打破了传统上认为LZ-8免疫抗肿瘤唯一机制的观念，揭示了rLZ-8杀伤肿瘤细胞的又一新途径，这在国内外同类水平的研究中是一项突破性的进展。 二，研究发现rLZ-8不仅具有直接杀伤肿瘤细胞的作用，同时又具有维持肿瘤治疗小鼠正常白细胞水平的作用。白细胞低下大鼠模型实验结果充分证实了这一结论。这项研究成果有望解决长期肿瘤化学治疗产生毒副作用这一临床难题。 三，课题组在该领域的研究中完成了rLZ-8晶体空间结构的测定工作，这项工作的意义在于为rLZ-8直接抗肿瘤作用机制提供了理论上的依据。 四，该课题组建立了rLZ-8 100L发酵工艺（包括发酵技术及后期制备技术）的完整方案，这在国内外LZ-8发酵工艺研究领域处于领先地位。 6.作用意义：我们的研究在国际同类研究领域中揭示了真菌免疫调节蛋白的一些新功能机制，拓宽了Fip研究范围和应用领域。特别是rLZ-8晶体结构的确定，对真菌免疫调节蛋白作用的可能机制探讨均具有重要的生物学意义。 rLZ-8的开发具有广阔的应用前景，也必将创造可观的社会效益和经济效益。 7.推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见： 长白山野生灵芝免疫调节蛋白作为植物源性基因工程药物的研究与开发在国内、国外均未见相同研究报道。作为真菌免疫调节蛋白的一种新型物质，大量药效学实验已充分展示了它的临床应用前景。本项研究成果不仅可以弥补灵芝资源不足的难题，与动物源性重组蛋白药物比较，它还完全避免了人畜共患传染性疾病病原菌在人群中突发性传播的途径，是未来临床应用基因药物研究的方向。为现代生物技术在传统中药资源研究中的应用提供理论与实践依据，该项研究成果对传统中药有效药用成分资源保护和利用将是一种创新性的探索。 本项研究课题已经按合同内容完成了全部研究工作，在工作中我们发现rLZ-8抗肿瘤作用的新途径，同时完成的rLZ-8晶体空间结构，进一步支持了我们这一创新性的发现，根据以上工作基础，我们拟定了以下研究方案，目的在于为rLZ-8最终在临床上的应用提供可靠的理论及实验依据。 1．rLZ-8小鼠急性毒性、大鼠长期毒性实验工作。 2．rLZ-8体内（裸鼠）抗肿瘤实验及相关机制的研究工作。 3．改造rLZ-8结构，建立rLZ-8的单体突变结构，主要应用目标是：使rLZ-8可成为肿瘤早期诊断的标记靶载体；建立可携带多种化药的导向靶载体。

1.任务来源：吉林省科学技术厅横向课题 合同编号20040401-3 2.应用领域：生物医药；技术原理：基因重组表达。 3.性能指标： （1）rLZ -8目的基因的获得； （2）分泌表达rLZ -8的重组毕赤酵母菌的构建与筛选； （3）重组rLZ -8毕赤酵母工程菌实验室表达； （4） 中试发酵表达rLZ -8； （5）纯化工艺； （6）部分免疫学活性指标的检测； （7）杀伤肿瘤细胞的药效学实验。 4.与国内外同类技术比较： 我们课题组在国内外首次利用毕赤酵母真核表达系统表达了灵芝免疫调节蛋白；在国际同类研究中，我们第一次实现了大规模的rLZ-8生产，并且建立了完整的生产工艺方案；第一次完成了rLZ-8空间结构的测定工作，为深入研究rLZ-8抗肿瘤机制打下了坚实的基础；我们创新性发现rLZ-8可以提升大鼠淋巴细胞低下模型的白细胞数量，与集落刺激因子的作用相似；rLZ-8可以诱导白血病细胞NB4、K562和HL60发生细胞凋亡，这也是我们第一次阐明了真菌免疫调节蛋白杀伤肿瘤细胞的另一可能途径，而以往报道的资料均认为真菌免疫调节蛋白是通过免疫调节的间接机制对肿瘤细胞起杀伤作用；苛瘤小鼠治疗实验表明，rLZ-8可以有效的抑制移植性肿瘤在体内的生长；安全性实验表明，rLZ-8对大鼠血细胞无明显毒性；对主动脉、主静脉血管壁未见病理性破坏作用；骨髓涂片结果表明对造血机能也无病变作用。 5.成果的创造性、先进性： 一，rLZ-8具有对肿瘤细胞专一性杀伤作用的实验结果，打破了传统上认为LZ-8免疫抗肿瘤唯一机制的观念，揭示了rLZ-8杀伤肿瘤细胞的又一新途径，这在国内外同类水平的研究中是一项突破性的进展。 二，研究发现rLZ-8不仅具有直接杀伤肿瘤细胞的作用，同时又具有维持肿瘤治疗小鼠正常白细胞水平的作用。白细胞低下大鼠模型实验结果充分证实了这一结论。这项研究成果有望解决长期肿瘤化学治疗产生毒副作用这一临床难题。 三，课题组在该领域的研究中完成了rLZ-8晶体空间结构的测定工作，这项工作的意义在于为rLZ-8直接抗肿瘤作用机制提供了理论上的依据。 四，该课题组建立了rLZ-8 100L发酵工艺（包括发酵技术及后期制备技术）的完整方案，这在国内外LZ-8发酵工艺研究领域处于领先地位。 6.作用意义：我们的研究在国际同类研究领域中揭示了真菌免疫调节蛋白的一些新功能机制，拓宽了Fip研究范围和应用领域。特别是rLZ-8晶体结构的确定，对真菌免疫调节蛋白作用的可能机制探讨均具有重要的生物学意义。 rLZ-8的开发具有广阔的应用前景，也必将创造可观的社会效益和经济效益。 7.推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见： 长白山野生灵芝免疫调节蛋白作为植物源性基因工程药物的研究与开发在国内、国外均未见相同研究报道。作为真菌免疫调节蛋白的一种新型物质，大量药效学实验已充分展示了它的临床应用前景。本项研究成果不仅可以弥补灵芝资源不足的难题，与动物源性重组蛋白药物比较，它还完全避免了人畜共患传染性疾病病原菌在人群中突发性传播的途径，是未来临床应用基因药物研究的方向。为现代生物技术在传统中药资源研究中的应用提供理论与实践依据，该项研究成果对传统中药有效药用成分资源保护和利用将是一种创新性的探索。 本项研究课题已经按合同内容完成了全部研究工作，在工作中我们发现rLZ-8抗肿瘤作用的新途径，同时完成的rLZ-8晶体空间结构，进一步支持了我们这一创新性的发现，根据以上工作基础，我们拟定了以下研究方案，目的在于为rLZ-8最终在临床上的应用提供可靠的理论及实验依据。 1．rLZ-8小鼠急性毒性、大鼠长期毒性实验工作。 2．rLZ-8体内（裸鼠）抗肿瘤实验及相关机制的研究工作。 3．改造rLZ-8结构，建立rLZ-8的单体突变结构，主要应用目标是：使rLZ-8可成为肿瘤早期诊断的标记靶载体；建立可携带多种化药的导向靶载体。