本课题通过铜绿假单胞菌PAO1 在eppendorf 管内建立生物膜，通过结晶紫快速染色法证实生物膜的形成，使用光学显微镜观察生物膜的结构。分别用不同浓度的亚胺培南和头孢他啶诱导生物膜铜绿假单胞菌和浮游菌4小时；反复冻融法提取酶粗提取液；使用产色头孢菌素（头孢硝噻吩）检测酶粗提取液中β-内酰胺酶的表达，用分光光度仪测定β-内酰胺酶的活性。用福林酚法（Folin-Phenol）测定蛋白含量，对β-内酰胺酶进行定量分析。采用改良的头孢西丁三维实验鉴定β-内酰胺酶的类型。 　　进一步研究了铜绿假单胞菌耐药机制，证实在抗菌素的作用下，铜绿假单胞菌生物膜比浮游菌更容易被诱导产生β-内酰胺酶。经诱导产生的β-内酰胺酶主要为AmpC酶。对临床合理选择抗菌素，防止铜绿假单胞菌耐药有重要指导意义。

　　本课题通过铜绿假单胞菌PAO1 在eppendorf 管内建立生物膜，通过结晶紫快速染色法证实生物膜的形成，使用光学显微镜观察生物膜的结构。分别用不同浓度的亚胺培南和头孢他啶诱导生物膜铜绿假单胞菌和浮游菌4小时；反复冻融法提取酶粗提取液；使用产色头孢菌素（头孢硝噻吩）检测酶粗提取液中β-内酰胺酶的表达，用分光光度仪测定β-内酰胺酶的活性。用福林酚法（Folin-Phenol）测定蛋白含量，对β-内酰胺酶进行定量分析。采用改良的头孢西丁三维实验鉴定β-内酰胺酶的类型。 　　进一步研究了铜绿假单胞菌耐药机制，证实在抗菌素的作用下，铜绿假单胞菌生物膜比浮游菌更容易被诱导产生β-内酰胺酶。经诱导产生的β-内酰胺酶主要为AmpC酶。对临床合理选择抗菌素，防止铜绿假单胞菌耐药有重要指导意义。