本课题的研究包括： 1）反义CD40 RNA真核表达载体、CD40发夹siRNA真核表达载体的构建及鉴定 2）健康人、SLE患者B淋巴细胞系的建立 3）反义CD40RNA在健康人、SLE患者B细胞免疫异常中的调控及功能影响 4）CD40发夹siRNA对B淋巴细胞来源的CA46细胞CD40表达及细胞增殖、凋亡的影响。 首先，我们建立了本课题实验研究所必需的稳定的工作系统：反义CD40RNA真核表达载体的构建及鉴定和EB病毒转化的健康人及系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞系的建立及鉴定；CD40发夹siRNA真核表达载体的构建及鉴定。将已构建好的CD40/pcDNA3表达载体转染健康人和SLE患者的B细胞中。 进而，应用流式细胞仪技术﹑MTT法以及ELISA法测定转染细胞上CD40分子的表达、细胞增殖能力测定、免疫球蛋白分泌等，评价反义CD40 RNA在SLE患者免疫异常中的调控作用。将CD40发夹siRNA真核表达载体转染CA46细胞，进而应用流式细胞仪技术﹑MTT法测定转染细胞上CD40分子的表达、细胞凋亡及增殖能力测定等。 结果表明，反义CD40 RNA、CD40发夹siRNA皆可有效抑制细胞膜CD40的表达。同时，反义CD40 RNA抑制健康人及SLE患者B细胞膜CD40的表达后，B细胞的增殖能力、免疫球蛋白分泌能力明显下降。 因此，通过本课题的研究，表明反义CD40 RNA、CD40发夹siRNA可作为一种有效的免疫调控手段，调节免疫细胞的异常激活，为今后的免疫基因治疗自身免疫性疾病的可行性提供了理论和实验依据。从目前的实验研究结果来看，该课题已经显示出喜人的预期目的。为此，我们认为届时必将带来巨大的社会效益和经济效益。

本课题的研究包括： 1）反义CD40 RNA真核表达载体、CD40发夹siRNA真核表达载体的构建及鉴定 2）健康人、SLE患者B淋巴细胞系的建立 3）反义CD40RNA在健康人、SLE患者B细胞免疫异常中的调控及功能影响 4）CD40发夹siRNA对B淋巴细胞来源的CA46细胞CD40表达及细胞增殖、凋亡的影响。 首先，我们建立了本课题实验研究所必需的稳定的工作系统：反义CD40RNA真核表达载体的构建及鉴定和EB病毒转化的健康人及系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞系的建立及鉴定；CD40发夹siRNA真核表达载体的构建及鉴定。将已构建好的CD40/pcDNA3表达载体转染健康人和SLE患者的B细胞中。 进而，应用流式细胞仪技术﹑MTT法以及ELISA法测定转染细胞上CD40分子的表达、细胞增殖能力测定、免疫球蛋白分泌等，评价反义CD40 RNA在SLE患者免疫异常中的调控作用。将CD40发夹siRNA真核表达载体转染CA46细胞，进而应用流式细胞仪技术﹑MTT法测定转染细胞上CD40分子的表达、细胞凋亡及增殖能力测定等。 结果表明，反义CD40 RNA、CD40发夹siRNA皆可有效抑制细胞膜CD40的表达。同时，反义CD40 RNA抑制健康人及SLE患者B细胞膜CD40的表达后，B细胞的增殖能力、免疫球蛋白分泌能力明显下降。 因此，通过本课题的研究，表明反义CD40 RNA、CD40发夹siRNA可作为一种有效的免疫调控手段，调节免疫细胞的异常激活，为今后的免疫基因治疗自身免疫性疾病的可行性提供了理论和实验依据。从目前的实验研究结果来看，该课题已经显示出喜人的预期目的。为此，我们认为届时必将带来巨大的社会效益和经济效益。