肿瘤的本质是细胞周期调节失控，细胞呈自主的、无限制的增殖。p16和p15是重要的抑癌基因，定位于染色体9p21，其产物通过调节细胞周期素依赖性激酶4、6 (Cyclin depended kinase4、6， CDK4、6)或细胞周期素D -细胞周期素依赖性激酶4、6复合体(CyclinD- CDK4、6) 而调节着细胞周期。p15、p16基因及其表达产物的活性与多种肿瘤的发生发展有关。目前关于p15、p16基因与白血病关系的研究大多集中在白血病细胞系和小儿急性白血病患者，对成人急性白血病（adult acute leukemia，AAL）和急性髓性白血病（acute myeloid leukemia ，AML）患者的研究较少。尚未见到报道对成人急性白血病患者进行p15、p16基因结构和表达水平的系列检测，探讨这部分患者中p15、p16基因失活是否存在基因转录和翻译调控机制的异常。这正是本实验立题的依据和拟探讨的问题。本实验对成人急性白血病患者p15、p16基因进行纯合缺失、异常甲基化、mRNA水平和P16蛋白表达的系列检测，研究p15、p16基因失活与成人急性白血病的相关性、成人急性白血病p15、p16基因失活与其转录和翻译调控的关系，探讨成人急性白血病p16基因失活的机制，为成人急性白血病发病机制的阐明、诊断和治疗提供理论参考。 该研究采用多重-PCR方法检测p15、p16基因第1和第2外显子（exon，E1和E2）纯合缺失；用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR技术检测p15、p16基因E1和E2异常甲基化。同时制备单个核细胞滴片，应用mRNA原位杂交方法和免疫组织化学方法，检测p16mRNA和P16蛋白表达的水平。分析了成人急性白血病患者p15、p16基因水平的变化，探讨成人急性白血病患者p15、p16基因失活的机制，对p16基因结构与基因表达、翻译之间的关系进行了分析。 研究结果表明p15、p16基因第1和第2外显子纯合缺失在成人急性白血病中是少发事件，而甲基化可能是成人急性白血病中重要的分子事件。对p15、p16基因E2 CpG岛中几个CpG位点甲基化分析，发现p16的NruI和SacII位点及p15的HapII位点甲基化率在成人AML患者组中明显高于正常对照组，提示成人急性白血病p16和p15的E2高甲基化可能在白血病发生发展过程中起一定作用。 对成人急性白血病中p16基因结构与基因表达、翻译之间的关系研究发现p16基因结构与p16mRNA及P16蛋白表达不一致，推测P16异常表达可能由转录和/或翻译水平调控失常所致。该研究对帮助判断预后，制定化疗方案有一定的指导意义。

肿瘤的本质是细胞周期调节失控，细胞呈自主的、无限制的增殖。p16和p15是重要的抑癌基因，定位于染色体9p21，其产物通过调节细胞周期素依赖性激酶4、6 (Cyclin depended kinase4、6， CDK4、6)或细胞周期素D -细胞周期素依赖性激酶4、6复合体(CyclinD- CDK4、6) 而调节着细胞周期。p15、p16基因及其表达产物的活性与多种肿瘤的发生发展有关。目前关于p15、p16基因与白血病关系的研究大多集中在白血病细胞系和小儿急性白血病患者，对成人急性白血病（adult acute leukemia，AAL）和急性髓性白血病（acute myeloid leukemia ，AML）患者的研究较少。尚未见到报道对成人急性白血病患者进行p15、p16基因结构和表达水平的系列检测，探讨这部分患者中p15、p16基因失活是否存在基因转录和翻译调控机制的异常。这正是本实验立题的依据和拟探讨的问题。本实验对成人急性白血病患者p15、p16基因进行纯合缺失、异常甲基化、mRNA水平和P16蛋白表达的系列检测，研究p15、p16基因失活与成人急性白血病的相关性、成人急性白血病p15、p16基因失活与其转录和翻译调控的关系，探讨成人急性白血病p16基因失活的机制，为成人急性白血病发病机制的阐明、诊断和治疗提供理论参考。 该研究采用多重-PCR方法检测p15、p16基因第1和第2外显子（exon，E1和E2）纯合缺失；用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR技术检测p15、p16基因E1和E2异常甲基化。同时制备单个核细胞滴片，应用mRNA原位杂交方法和免疫组织化学方法，检测p16mRNA和P16蛋白表达的水平。分析了成人急性白血病患者p15、p16基因水平的变化，探讨成人急性白血病患者p15、p16基因失活的机制，对p16基因结构与基因表达、翻译之间的关系进行了分析。 研究结果表明p15、p16基因第1和第2外显子纯合缺失在成人急性白血病中是少发事件，而甲基化可能是成人急性白血病中重要的分子事件。对p15、p16基因E2 CpG岛中几个CpG位点甲基化分析，发现p16的NruI和SacII位点及p15的HapII位点甲基化率在成人AML患者组中明显高于正常对照组，提示成人急性白血病p16和p15的E2高甲基化可能在白血病发生发展过程中起一定作用。 对成人急性白血病中p16基因结构与基因表达、翻译之间的关系研究发现p16基因结构与p16mRNA及P16蛋白表达不一致，推测P16异常表达可能由转录和/或翻译水平调控失常所致。该研究对帮助判断预后，制定化疗方案有一定的指导意义。