研究目的： 评价自体外周血干细胞联合骨髓干细胞移植治疗2型糖尿病合并下肢动脉闭塞症的临床治疗效果。开发干细胞的分离技术、内皮祖细胞鉴定技术及临床疗效的客观评价标准。 研究对象： 患者选择：2型糖尿病下肢慢性缺血性疾病患者应具备以下条件 1．静息痛或/和麻木、冷感、间歇跛行、不能治愈的缺血性溃疡 2．患肢检测PO2<50mmHg 3．患肢检测ABI(ankle-branchial pressure inder)<0.9，两次检测间隔时间不少于1周 4．动脉管腔狭窄不适于进行血管搭桥或介入等外科手术治疗 分组: 干细胞移植治疗组：99例，均为2型糖尿病合并不同程度的下肢动脉闭塞症。在内科综合治疗的基础上进行自体外周血干细胞联合骨髓干细胞移植治疗。 对照组：95例，均为2型糖尿病合并不同程度的下肢动脉闭塞症，采用内科综合治疗。 方法： 1．根据糖尿病及糖尿病足诊断标准选择99例糖尿病足患者进行研究，同时选95例对照。 2．外周血干细胞的动员和分离: 对移植组进行外周血干细胞动员，每天给予rhG-CSF450u-600u，皮下注射，第6天用COBE6.1血细胞分离机单采单个核细胞（MNC），总量60-120ml。 3．骨髓干细胞的抽取和分离: 于外周血干细胞动员的第5天，局部麻醉下从骼骨处抽取自体骨髓血200mL，在实验室将骨髓沉淀、离心，分离等处理后制备40mL干细胞悬浊液备用。 4．内皮祖细胞鉴定 5．干细胞悬液的配制: 将2种干细胞悬液混匀，配成（1～9）×108L-1浓度的悬液。 6．将悬液按3cmx3cm距离进行缺血肢体移植术，移植后观察各项指标变化，进行综合评估。 结果显示： 1．移植后大多数患足足部疼痛、冷感、间歇性跛行有显著好转，其中以疼痛缓解最快。与对照组比，经χ2检验2组间显效率及无效率差异均有统计学意义。 2．移植1个月检测大多数患肢皮温改善。 3．术后2和4周多数患足术后经皮氧分压增加和二氧化碳分压下降。 4．移植后1个月检测患者足部血流波幅较移植前增加，ABI改善。 5．移植后2个月复查血管造影2例患者，可见新生血管形成。 6．所有患者未出现并发症和不良反应。 结果表明： 1．移植前“土壤”准备：移植前期改善一般情况、局部微循环很重要，。 2．种植的干细胞数量要足够，干细胞数量 〉1×109个。 3．围移植期及术后控制血糖、血压，改善微循环，局部创面处理等很关键。 结论： 自体外周血干细胞联合骨髓干细胞移植治疗糖尿病足是一种先进、安全、有效的治疗方法。 应用前景 本研究例数多，疗效好，安全性高。形成了完整的技术体系，积累了一定的临床经验。本研究检测技术完善，评价方法客观。经过我们初步推广已取得较好的经济效益和社会效益。 自体干细胞移植治疗糖尿病足由于具有取材方便，自体来源无免疫排斥，能在体外扩增并进行基因修饰等特点，在糖尿病患者肢体缺血的治疗，再建糖尿病患者的血管形成等方面有广阔的应用前景。

研究目的： 评价自体外周血干细胞联合骨髓干细胞移植治疗2型糖尿病合并下肢动脉闭塞症的临床治疗效果。开发干细胞的分离技术、内皮祖细胞鉴定技术及临床疗效的客观评价标准。 研究对象： 患者选择：2型糖尿病下肢慢性缺血性疾病患者应具备以下条件 1．静息痛或/和麻木、冷感、间歇跛行、不能治愈的缺血性溃疡 2．患肢检测PO2<50mmHg 3．患肢检测ABI(ankle-branchial pressure inder)<0.9，两次检测间隔时间不少于1周 4．动脉管腔狭窄不适于进行血管搭桥或介入等外科手术治疗 分组: 干细胞移植治疗组：99例，均为2型糖尿病合并不同程度的下肢动脉闭塞症。在内科综合治疗的基础上进行自体外周血干细胞联合骨髓干细胞移植治疗。 对照组：95例，均为2型糖尿病合并不同程度的下肢动脉闭塞症，采用内科综合治疗。 方法： 1．根据糖尿病及糖尿病足诊断标准选择99例糖尿病足患者进行研究，同时选95例对照。 2．外周血干细胞的动员和分离: 对移植组进行外周血干细胞动员，每天给予rhG-CSF450u-600u，皮下注射，第6天用COBE6.1血细胞分离机单采单个核细胞（MNC），总量60-120ml。 3．骨髓干细胞的抽取和分离: 于外周血干细胞动员的第5天，局部麻醉下从骼骨处抽取自体骨髓血200mL，在实验室将骨髓沉淀、离心，分离等处理后制备40mL干细胞悬浊液备用。 4．内皮祖细胞鉴定 5．干细胞悬液的配制: 将2种干细胞悬液混匀，配成（1～9）×108L-1浓度的悬液。 6．将悬液按3cmx3cm距离进行缺血肢体移植术，移植后观察各项指标变化，进行综合评估。 结果显示： 1．移植后大多数患足足部疼痛、冷感、间歇性跛行有显著好转，其中以疼痛缓解最快。与对照组比，经χ2检验2组间显效率及无效率差异均有统计学意义。 2．移植1个月检测大多数患肢皮温改善。 3．术后2和4周多数患足术后经皮氧分压增加和二氧化碳分压下降。 4．移植后1个月检测患者足部血流波幅较移植前增加，ABI改善。 5．移植后2个月复查血管造影2例患者，可见新生血管形成。 6．所有患者未出现并发症和不良反应。 结果表明： 1．移植前“土壤”准备：移植前期改善一般情况、局部微循环很重要，。 2．种植的干细胞数量要足够，干细胞数量 〉1×109个。 3．围移植期及术后控制血糖、血压，改善微循环，局部创面处理等很关键。 结论： 自体外周血干细胞联合骨髓干细胞移植治疗糖尿病足是一种先进、安全、有效的治疗方法。 应用前景 本研究例数多，疗效好，安全性高。形成了完整的技术体系，积累了一定的临床经验。本研究检测技术完善，评价方法客观。经过我们初步推广已取得较好的经济效益和社会效益。 自体干细胞移植治疗糖尿病足由于具有取材方便，自体来源无免疫排斥，能在体外扩增并进行基因修饰等特点，在糖尿病患者肢体缺血的治疗，再建糖尿病患者的血管形成等方面有广阔的应用前景。