应用基因工程重组技术，从正常人外周血中提取总RNA，以葡聚糖凝胶电泳鉴定RNA的质量，采用随机引物进行RT-PCR扩增cDNA第1链合成，获得人sCR1全长cDNA。以cDNA为模板，用Pyrobest高保真DNA聚合酶PCR扩增所需克隆的目的片段，用NdeⅠ、xhoⅠ双酶切PCR回收产物PET28a原核载体，回收酶切过的PET28a原核载体和目的片段。经连接、转化后，进行琼脂糖凝胶电泳分析；单、双酶切及PCR扩增目的片断进行测序分析。测序结果与GenBank登录的人sCR1基因片段完全一致。并成功的构建了sCR1真核及原核表达载体。 我们在国内外首次采用分泌型表达载体pPIC9K构建了sCR1在毕赤酵母细胞SMD1168中的pPIC9K-sCR1酵母表达载体和原核表达系统，建立了一种较为接近人体天然蛋白的表达方式，为其在临床诊断和治疗提供了基础。酵母pPIC9K载体属于穿梭质粒，既可在酵母中表达，也可在原核中表达。酵母细胞SMD1168属真核表达系统，具有一定的蛋白翻译后加工，有利于真核蛋白的表达。经表达的sCR1融合蛋白纯化后，具有较高的生物活性。 重组人sCR1是CR1的胞外片段，保留了CR1抑制补体活性的结构和功能。本研究成功构建的重组pPIC9K-sCR1，将为建立敏感、特异的免疫学检测方法和作为一种内源性的补体调节蛋白治疗剂，用于阻断人类疾病时补体的不适当激活而造成的组织损伤，如心肌缺损，炎症损伤、病毒感染、器官移植术后等方面的临床治疗奠定了基础。

应用基因工程重组技术，从正常人外周血中提取总RNA，以葡聚糖凝胶电泳鉴定RNA的质量，采用随机引物进行RT-PCR扩增cDNA第1链合成，获得人sCR1全长cDNA。以cDNA为模板，用Pyrobest高保真DNA聚合酶PCR扩增所需克隆的目的片段，用NdeⅠ、xhoⅠ双酶切PCR回收产物PET28a原核载体，回收酶切过的PET28a原核载体和目的片段。经连接、转化后，进行琼脂糖凝胶电泳分析；单、双酶切及PCR扩增目的片断进行测序分析。测序结果与GenBank登录的人sCR1基因片段完全一致。并成功的构建了sCR1真核及原核表达载体。 我们在国内外首次采用分泌型表达载体pPIC9K构建了sCR1在毕赤酵母细胞SMD1168中的pPIC9K-sCR1酵母表达载体和原核表达系统，建立了一种较为接近人体天然蛋白的表达方式，为其在临床诊断和治疗提供了基础。酵母pPIC9K载体属于穿梭质粒，既可在酵母中表达，也可在原核中表达。酵母细胞SMD1168属真核表达系统，具有一定的蛋白翻译后加工，有利于真核蛋白的表达。经表达的sCR1融合蛋白纯化后，具有较高的生物活性。 重组人sCR1是CR1的胞外片段，保留了CR1抑制补体活性的结构和功能。本研究成功构建的重组pPIC9K-sCR1，将为建立敏感、特异的免疫学检测方法和作为一种内源性的补体调节蛋白治疗剂，用于阻断人类疾病时补体的不适当激活而造成的组织损伤，如心肌缺损，炎症损伤、病毒感染、器官移植术后等方面的临床治疗奠定了基础。