本项目通过基因工程手段将AFP基因的多个MHC－I类表位嵌入HBV核心抗原HBcAg基因中，构建了一种新型多价基因工程肝癌疫苗，并进行了详细的体内外功能评价。项目的主要研究成果包括： 1．HBcAg-AFP表位嵌合基因疫苗的构建：HBV核心抗原HBcAg具有自组装成病毒样颗粒（VPL）的能力，将抗原表位基因与其融合，可在VPL递呈多拷贝（高密度）的抗原表位，提高抗原表位的免疫原性，已成为基因工程合成疫苗研制的一个新方向。外来抗原表位在HBcAg不同位点融合，以及插入序列的长度和上下游的序列对外源表位能否有效暴露至关重要。本项目选择最常用的C端和刺突尖部，分别插入两个已知的AFP基因HLA-A2限制性CTL表位多肽hAFP(137-145)PLFQVPEPV和hAFP(542-550)GVALQTMKQ，并且对插入方式和上下游序列方面进行了改进，经过免疫学评价，证明这种改进是有效的。 2．携HBcAg-AFP表位嵌合基因腺病毒疫苗的构建：将HBcAg-AFP表位嵌合基因连入腺病毒载体，构建成腺病毒基因疫苗。 3．疫苗的免疫学评价：通过系统的免疫学评价，证明本项目所构建的疫苗较单纯多肽疫苗和传统构建方法具有更强的免疫原性，疫苗所诱导的特异性CTL在体内外均表现出对AFP阳性肝癌细胞的强烈杀伤效应。 本疫苗可从多个方向进行开发，如通过基因工程表达出的VPL疫苗，将嵌合基因连入病毒载体等，其中，VPL疫苗由于不存在病毒载体涉及的基因治疗问题，所以开发前景广阔。

本项目通过基因工程手段将AFP基因的多个MHC－I类表位嵌入HBV核心抗原HBcAg基因中，构建了一种新型多价基因工程肝癌疫苗，并进行了详细的体内外功能评价。项目的主要研究成果包括： 1．HBcAg-AFP表位嵌合基因疫苗的构建：HBV核心抗原HBcAg具有自组装成病毒样颗粒（VPL）的能力，将抗原表位基因与其融合，可在VPL递呈多拷贝（高密度）的抗原表位，提高抗原表位的免疫原性，已成为基因工程合成疫苗研制的一个新方向。外来抗原表位在HBcAg不同位点融合，以及插入序列的长度和上下游的序列对外源表位能否有效暴露至关重要。本项目选择最常用的C端和刺突尖部，分别插入两个已知的AFP基因HLA-A2限制性CTL表位多肽hAFP(137-145)PLFQVPEPV和hAFP(542-550)GVALQTMKQ，并且对插入方式和上下游序列方面进行了改进，经过免疫学评价，证明这种改进是有效的。 2．携HBcAg-AFP表位嵌合基因腺病毒疫苗的构建：将HBcAg-AFP表位嵌合基因连入腺病毒载体，构建成腺病毒基因疫苗。 3．疫苗的免疫学评价：通过系统的免疫学评价，证明本项目所构建的疫苗较单纯多肽疫苗和传统构建方法具有更强的免疫原性，疫苗所诱导的特异性CTL在体内外均表现出对AFP阳性肝癌细胞的强烈杀伤效应。 本疫苗可从多个方向进行开发，如通过基因工程表达出的VPL疫苗，将嵌合基因连入病毒载体等，其中，VPL疫苗由于不存在病毒载体涉及的基因治疗问题，所以开发前景广阔。