本课题属基础应用性研究。主要采用基因重组技术，构建人白细胞介素-2（IL-2）和乙肝病毒前S抗原（PreS）的DNA疫苗。
在技术上创建了IL-2preS原核与真核表达系统技术路线，先后完成了IL-2-PreS融合蛋白的真核表达质粒载体在体外（COS7细胞）和体内（正常小鼠与转基因小鼠）的生物活性研究。
1.体外实验证明：本疫苗转染COS-7细胞株后，IL-2可以在体外瞬时表达，PreSAg具有抗原性。
2.正常小鼠体内活性实验：
①IL-2-preS真核表达质粒基因免疫BLAB/C小鼠三天后，用免疫组化的方法证明了肌细胞中有IL-2-PreS蛋白的表达；②IL-2-preS真核表达质粒用基因枪注射BLAB/C小鼠后，100%的小鼠均在第4、6周可检测到高水平的特异性抗PreSIgG抗体（1:2000），持续时间长达10周，而蛋白免疫需加强免疫后有80%的小鼠产生抗体（1:1000）且持续时间较短（6周）；③在第四周高峰期检测IgG亚类，结果显示：由于IL-2佐剂的作用，使基因枪肌肉注射是诱导以TH1（IgG2a）为主的反应，表明其可能促进机体的细胞免疫应答。
3.IL-2preS乙肝疫苗免疫HBV转基因小鼠的实验研究证明：
基因枪注射真核表达质粒(1μg/只)免疫转基因小鼠后，①部分小鼠产生了抗体；②HBV DNA量下降③肝组织HE染色显示：肝组织有明显的炎细胞浸润，肝组织轻度损伤。提示可部分打破免疫耐受。为新型乙肝疫苗和抗HBV持续性感染的特异性免疫治疗剂的设计、构建提供理论与实践依据。
乙型病毒性肝炎是一种全球性疾病，目前尚无特效治疗手段。据1999年WHO统计，全球乙型病毒性肝炎感染者约3.5亿，而高发区新生儿的接种率只有62%。中国属乙型病毒性肝炎高流行区，乙肝病毒携带者约占人口的10%（1.2亿）、慢性肝炎患者3000万，因而乙肝被称之为中国的“国病”。
目前，控制乙型肝炎流行的主要手段是由WHO推行的全球免疫接种计划，但由于该计划所依赖的预防性疫苗对已感染乙肝者无效，并且在未感染的新生儿人群中有5～15%不应答和未能接种。因此，在今后一个相当长的时期内，乙肝仍将是人类和国人重要的公共健康问题。
2002年全球抗肝炎药物市场已达40多亿美元，按5.4%复合年增长率测算,预计到2008年可达到62.75亿美元的市场份额。我国疫苗市场的总体规模约为25亿元,其中乙肝疫苗约占1/3，市场份额为7.7亿～8.2亿元左右,国产品占80%以上。近几年乙肝疫苗的销售额在亿元以上，占据了40%的市场份额。华北制药集团也是开发乙肝疫苗的主要企业,金坦公司重组(CHO)乙肝疫苗中试生产后，工艺日臻成熟,2003年底报道实际供应市场量为700万人份。云大科技控股的大连高新生物制药的重组酵母乙型肝炎疫苗，投入规模化生产后，对疫苗市场又是一个好消息。
目前，乙肝新疫苗保护的靶对象正逐渐扩展为慢性肝病患者和肝炎病毒携带者，国外在单一抗原HBV疫苗基础上开发了多种抗原疫苗,临床表明预防甲肝、乙肝有效率在98%以上，因此合并有S抗原的Bio-Hep-B和Hepagene有望能替代现在广为使用的重组疫苗；预测到2010年，相继问世的疫苗将占HBV疫苗市场的20%，DNA疫苗、口服植物性疫苗、联合疫苗、治疗性乙肝疫苗有望成为新的热点。中国疫苗市场目前处在起步阶段，从市场规模到消费观念均有较大的发展空间。因此，若能尽早进行临床试验，将会有很好的经济效益和社会效益，具有良好的推广应用前景。
目前，基础研究阶段的具体推广措施可以通过发表学术论文、申报专利、参加学术会议、讲座、培养研究生等形式进行。自研究开展以来，已发表国家级文章8篇，获专利1项。另外，逐渐实现从基础研究到临床应用研究的转变。 |
