技术说明： 一、白血病细胞悬液的制备：无菌取患者骨髓，常规分离，洗涤后制成含30%PHA-SCM的细胞悬液。 二、骨髓单个核细胞P170蛋白检测：采用间接免疫荧光法，荧光显微镜镜检500个细胞，计算阳性细胞百分率，每批标本均设阳性对照（K562/A02细胞株）及阴性对照。阳性细胞大于5%为P170阳性表达。 三、MTT体外药敏实验：将96孔细胞培养板中加入6种化疗药物（Ara-c、DNR、VP-16、IDA、MTZ、Hhar）工作液10ml，然后将分离的白血病细胞配制成2×10^6/ml的细胞悬液加入各孔中，培养24小时后加入MTT后培养4小时，加入SDS、HCl孵箱过夜，酶标仪测各孔OD值，计算CI，CI＜30%为耐药，＞30%为敏感。 四、临床疗效判定：临床二疗程内完全缓解（CR）者为体内敏感，二疗程未缓解（NR）者，第一疗程停化疗后MBDI≥60%为体内敏感，＜60%为体内耐药。 技术性能指标： 本研究选择初治高危MDS（RAEB+RAEB-t）30例，其中RAEB12例，RAEB-t18例，中位年龄51岁，分别给予DNR+Ara-c，IDA+Ara-c，MTZ+ Ara-c方案化疗。 结果显示： 一、高危MDS30例中，23例P170表达阳性，阳性表达率为76.6%。RAEB12例中8例表达阳性，阳性表达率为66.6%，RAEB-t18例中15例表达阳性，阳性表达率为83.3%。 二、高危MDS30例中，23例P170表达阳性者，6例有明显疗效，7例P170表达阴性者，5例有明显疗效，总有效率为36.6%。 三、药敏实验与临床疗效：MDS30例，体外敏感者21例，耐药者9例，体外药敏结果与体内敏感性的关系为S/S12例，S/R9例，R/R 2例，R/S7例，临床体内总符合率46.6%，阳性符合率57.2%，阴性符合率22.2%，预示的总敏感性为63.1%，特异性为22.2%，表明体外药敏实验MTT法对MDS化疗疗效的预示特异性差。 四、MDS患者Ara-c、DNR、VP-16、IDA、MTZ、HHar敏感组与耐药组P170蛋白表达差异显著（P＜0.05）。MDS患者P170阳性表达者对DNR，Vp-16耐药，对IDA，MTZ，Ara-c，Hhar敏感。 本课题设计合理，结果可靠明确，证实MDS患者P170蛋白表达明显升高，与临床完全缓解率低相符合。P170可以作为判断预后的重要指标，指导制定化疗方案，提高CR率。 骨髓增生异常综合征（MDS）是克隆性造血干细胞疾病，具有骨髓造血单克隆性、免疫低监视性、转归趋癌性的特征，其中有30%的MDS最终转化为急性白血病。MDS由低危组向高危组进展，转白率逐步升高。高危MDS化疗效果差，多药耐药的产生是导致恶性肿瘤化学药物治疗失败的主要原因，P糖蛋白高表达使肿瘤细胞产生耐药现象。MDS原发耐药率高，导致化疗失败，因此MDS应视作难治性白血病对待。体外细胞药敏实验可测定患者对化疗药物的敏感性。本课题将MTT检测与P170糖蛋白表达作为耐药指标观察。研究结果表明：MDS患者P170阳性表达率76.6%，这和临床化疗完全缓解率在20%左右相符合。体外药敏实验MTT法检测MDS30例，体外敏感者21例，耐药者9例，临床体内总符合率46.6%，阳性符合率57.2%，阴性符合率22.2%，预示的总敏感性为63.1%，特异性为22.2%，表明体外药敏实验MTT法对MDS化疗疗效的预示特异性差。MDS患者P170阳性表达者对DNR，Vp-16耐药，对IDA，MTZ，Ara-c，Hhar敏感。 MDS患者P170高表达作为一个耐药指标可针对性地选择有效药物，制定化疗方案，对提高化疗疗效和治愈率有重要的意义。故产生了重要的学术理论价值和较大的社会效益，各级医院可根据自身条件用流式细胞仪，RT-PCR或APAAP法检测P170表达。 本研究证实了P170高表达可作为MDS的一个耐药指标，指导选择化疗药物，具有广阔的临床推广应用价值，可通过总结材料发表于权威杂志及开办学习班的方式推广应用。

技术说明： 一、白血病细胞悬液的制备：无菌取患者骨髓，常规分离，洗涤后制成含30%PHA-SCM的细胞悬液。 二、骨髓单个核细胞P170蛋白检测：采用间接免疫荧光法，荧光显微镜镜检500个细胞，计算阳性细胞百分率，每批标本均设阳性对照（K562/A02细胞株）及阴性对照。阳性细胞大于5%为P170阳性表达。 三、MTT体外药敏实验：将96孔细胞培养板中加入6种化疗药物（Ara-c、DNR、VP-16、IDA、MTZ、Hhar）工作液10ml，然后将分离的白血病细胞配制成2×10^6/ml的细胞悬液加入各孔中，培养24小时后加入MTT后培养4小时，加入SDS、HCl孵箱过夜，酶标仪测各孔OD值，计算CI，CI＜30%为耐药，＞30%为敏感。 四、临床疗效判定：临床二疗程内完全缓解（CR）者为体内敏感，二疗程未缓解（NR）者，第一疗程停化疗后MBDI≥60%为体内敏感，＜60%为体内耐药。 技术性能指标： 本研究选择初治高危MDS（RAEB+RAEB-t）30例，其中RAEB12例，RAEB-t18例，中位年龄51岁，分别给予DNR+Ara-c，IDA+Ara-c，MTZ+ Ara-c方案化疗。 结果显示： 一、高危MDS30例中，23例P170表达阳性，阳性表达率为76.6%。RAEB12例中8例表达阳性，阳性表达率为66.6%，RAEB-t18例中15例表达阳性，阳性表达率为83.3%。 二、高危MDS30例中，23例P170表达阳性者，6例有明显疗效，7例P170表达阴性者，5例有明显疗效，总有效率为36.6%。 三、药敏实验与临床疗效：MDS30例，体外敏感者21例，耐药者9例，体外药敏结果与体内敏感性的关系为S/S12例，S/R9例，R/R 2例，R/S7例，临床体内总符合率46.6%，阳性符合率57.2%，阴性符合率22.2%，预示的总敏感性为63.1%，特异性为22.2%，表明体外药敏实验MTT法对MDS化疗疗效的预示特异性差。 四、MDS患者Ara-c、DNR、VP-16、IDA、MTZ、HHar敏感组与耐药组P170蛋白表达差异显著（P＜0.05）。MDS患者P170阳性表达者对DNR，Vp-16耐药，对IDA，MTZ，Ara-c，Hhar敏感。 本课题设计合理，结果可靠明确，证实MDS患者P170蛋白表达明显升高，与临床完全缓解率低相符合。P170可以作为判断预后的重要指标，指导制定化疗方案，提高CR率。 骨髓增生异常综合征（MDS）是克隆性造血干细胞疾病，具有骨髓造血单克隆性、免疫低监视性、转归趋癌性的特征，其中有30%的MDS最终转化为急性白血病。MDS由低危组向高危组进展，转白率逐步升高。高危MDS化疗效果差，多药耐药的产生是导致恶性肿瘤化学药物治疗失败的主要原因，P糖蛋白高表达使肿瘤细胞产生耐药现象。MDS原发耐药率高，导致化疗失败，因此MDS应视作难治性白血病对待。体外细胞药敏实验可测定患者对化疗药物的敏感性。本课题将MTT检测与P170糖蛋白表达作为耐药指标观察。研究结果表明：MDS患者P170阳性表达率76.6%，这和临床化疗完全缓解率在20%左右相符合。体外药敏实验MTT法检测MDS30例，体外敏感者21例，耐药者9例，临床体内总符合率46.6%，阳性符合率57.2%，阴性符合率22.2%，预示的总敏感性为63.1%，特异性为22.2%，表明体外药敏实验MTT法对MDS化疗疗效的预示特异性差。MDS患者P170阳性表达者对DNR，Vp-16耐药，对IDA，MTZ，Ara-c，Hhar敏感。 MDS患者P170高表达作为一个耐药指标可针对性地选择有效药物，制定化疗方案，对提高化疗疗效和治愈率有重要的意义。故产生了重要的学术理论价值和较大的社会效益，各级医院可根据自身条件用流式细胞仪，RT-PCR或APAAP法检测P170表达。 本研究证实了P170高表达可作为MDS的一个耐药指标，指导选择化疗药物，具有广阔的临床推广应用价值，可通过总结材料发表于权威杂志及开办学习班的方式推广应用。