引物原位标记技术（primed in situ labeling，PRINS）是继原位PCR之后发展起来的一种非放射性原位标记技术，由荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH）衍生而来，用于细胞或染色体原位检测DNA或RNA，结合了细胞遗传学原位显示技术所需的诸多优点：包括操作简便，检测周期短，成本低，探针小，具有PCR的特异性和易控性等等。其基于未标记的DNA引物与互补的靶标之间快速的退火及随后依靠Taq酶的原位引物延伸过程。在退火温度下，未标记的特异性寡核苷酸引物与靶标染色体特定序列特异结合，在适当DNA聚合酶催化下，以已标记的脱氧核苷酸为底物，在合适的温度下进行延伸反应，合成含有标记的DNA链，标记的DNA通过相应的荧光检测系统进行识别。 　　本项研究建立多个重复序列靶点的原位标记方案，适用于多种人体体细胞类型，尤其是精子染色体非整倍性，应用前景十分广泛，包括染色体数目异常的诊断，重复序列为标志物的染色体/DNA片段缺失、重复、易位的诊断，端粒的研究，肿瘤遗传学研究等等。 　　通过本项研究以及其后续工作，达到准确和稳定的标记人体细胞靶标染色体，并以不同的颜色进行不同靶标的区分。如今，原位杂交/标记技术已经大量应用于科研和临床应用，但由于成熟的FISH技术的成本较高，国内大量应用受到限制。成熟的标记技术，更高通量的标记，更节省的应用成本，将在很大程度上有助于该类技术广泛的临床应用，有利于普及遗传筛查。建立多序列寡核苷酸启动的原位DNA合成（Multi-PRINS）方法，克服单序列PRINS的不足，对人类精子核多个染色体非整倍性进行同时分析，对减少染色体病患儿的出生，提高人口素质，进一步搞好优生和进行出生缺陷的干预具有重要意义。 　　1.本研究组力图将该技术推广至更多样的样本，使该技术适用于更广泛的临床标本，方便病理检查。 　　2.将进行更多临床特殊病例（染色体异常）的检测，以遗传病作为检测基础，优化标记方案。 　　3.由于该技术的步骤简便，成本低廉，所以应用于单基因/单拷贝序列的标记也仍有很大的可取之处，国际上近年来的研究也趋向于单基因标记，本研究组的后续研究工作也着力于此。 　　4.本项技术的原位标记结果稳定可靠，技术成熟，步骤简便，成本低，具有很大的推广前景。 　　5.由于试剂和仪器要求简单，成本低于FISH技术，该项技术便于推广，具有多色滤光镜的荧光显微镜的各大医院细胞遗传室均可考虑开展该项检测。 　　6.该项研究成果已2005年、2006年申请并批准为国家级继续医学教育项目，在全国范围内举办了二期培训班，培训学员100多人次，同时还接收了来自新疆、广东、南京、重庆等省市的进修生10余人。

　　引物原位标记技术（primed in situ labeling，PRINS）是继原位PCR之后发展起来的一种非放射性原位标记技术，由荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH）衍生而来，用于细胞或染色体原位检测DNA或RNA，结合了细胞遗传学原位显示技术所需的诸多优点：包括操作简便，检测周期短，成本低，探针小，具有PCR的特异性和易控性等等。其基于未标记的DNA引物与互补的靶标之间快速的退火及随后依靠Taq酶的原位引物延伸过程。在退火温度下，未标记的特异性寡核苷酸引物与靶标染色体特定序列特异结合，在适当DNA聚合酶催化下，以已标记的脱氧核苷酸为底物，在合适的温度下进行延伸反应，合成含有标记的DNA链，标记的DNA通过相应的荧光检测系统进行识别。 　　本项研究建立多个重复序列靶点的原位标记方案，适用于多种人体体细胞类型，尤其是精子染色体非整倍性，应用前景十分广泛，包括染色体数目异常的诊断，重复序列为标志物的染色体/DNA片段缺失、重复、易位的诊断，端粒的研究，肿瘤遗传学研究等等。 　　通过本项研究以及其后续工作，达到准确和稳定的标记人体细胞靶标染色体，并以不同的颜色进行不同靶标的区分。如今，原位杂交/标记技术已经大量应用于科研和临床应用，但由于成熟的FISH技术的成本较高，国内大量应用受到限制。成熟的标记技术，更高通量的标记，更节省的应用成本，将在很大程度上有助于该类技术广泛的临床应用，有利于普及遗传筛查。建立多序列寡核苷酸启动的原位DNA合成（Multi-PRINS）方法，克服单序列PRINS的不足，对人类精子核多个染色体非整倍性进行同时分析，对减少染色体病患儿的出生，提高人口素质，进一步搞好优生和进行出生缺陷的干预具有重要意义。 　　1.本研究组力图将该技术推广至更多样的样本，使该技术适用于更广泛的临床标本，方便病理检查。 　　2.将进行更多临床特殊病例（染色体异常）的检测，以遗传病作为检测基础，优化标记方案。 　　3.由于该技术的步骤简便，成本低廉，所以应用于单基因/单拷贝序列的标记也仍有很大的可取之处，国际上近年来的研究也趋向于单基因标记，本研究组的后续研究工作也着力于此。 　　4.本项技术的原位标记结果稳定可靠，技术成熟，步骤简便，成本低，具有很大的推广前景。 　　5.由于试剂和仪器要求简单，成本低于FISH技术，该项技术便于推广，具有多色滤光镜的荧光显微镜的各大医院细胞遗传室均可考虑开展该项检测。 　　6.该项研究成果已2005年、2006年申请并批准为国家级继续医学教育项目，在全国范围内举办了二期培训班，培训学员100多人次，同时还接收了来自新疆、广东、南京、重庆等省市的进修生10余人。