肿瘤细胞及其支持组织较正常组织细胞能高表达血管内皮生长因子（VEGF），选择VEGF抗体为导向部分，能与抗体连接的具有毒性的白喉毒素突变体(CRM9)作为效应部分，有望通过VEGF抗体与肿瘤细胞及其组织VEGF抗原结合来识别肿瘤组织将毒素靶向定位于肿瘤细胞及其血管，达到治疗的目的。 本研究探讨以血管内皮生长因子抗体(anti-VEGF)为导向，白喉毒素突变体（CRM9）作效应部分，通过MBS将anti-VEGF和CRM9连接起来，构建成靶向毒素anti-VEGF-CRM9复合物，采用酶联免疫法检测所构建的蛋白复合体中抗体部分活性，用鸡胚绒毛尿囊膜技术来检测VEGF-IgG-CRM9抗血管作用，并间接证明抗体的活性，采用MTT细胞毒性试验检测anti-VEGF-CRM9的抗体导向作用及毒素部分的活性。 研究结果表明MBS能稳定的连接anti-VEGF和CRM9，通过ELISA方法验证IgG-MBS与CRM9之间的比例为1:1～1:3之间时，连接的效果比较理想，尤其是1:1为最适比例，其他比例的连接都会严重影响IgG抗体的活性，使之降低。SPDS不适宜做这两种蛋白的连接剂。 鸡胚绒毛尿囊膜实验结果显示，接种了Anti-VEGF-CRM9的鸡胚新生血管数目较其他组的新生血管数目减少，并且主要的大血管颜色也加深，验证了该免疫毒素与VEGF充分结合，起到了导向的作用，并有效的抑制了血管的生长，细胞毒性作用稳定。MTT细胞毒性实验结果显示，在Anti-VEGF-CRM9的作用下，细胞生长受到抑制，随着免疫毒素浓度的增加，死细胞的数目也增加，进一步证明Anti-VEGF-CRM9保持了抗活性和细胞的毒性。

肿瘤细胞及其支持组织较正常组织细胞能高表达血管内皮生长因子（VEGF），选择VEGF抗体为导向部分，能与抗体连接的具有毒性的白喉毒素突变体(CRM9)作为效应部分，有望通过VEGF抗体与肿瘤细胞及其组织VEGF抗原结合来识别肿瘤组织将毒素靶向定位于肿瘤细胞及其血管，达到治疗的目的。 本研究探讨以血管内皮生长因子抗体(anti-VEGF)为导向，白喉毒素突变体（CRM9）作效应部分，通过MBS将anti-VEGF和CRM9连接起来，构建成靶向毒素anti-VEGF-CRM9复合物，采用酶联免疫法检测所构建的蛋白复合体中抗体部分活性，用鸡胚绒毛尿囊膜技术来检测VEGF-IgG-CRM9抗血管作用，并间接证明抗体的活性，采用MTT细胞毒性试验检测anti-VEGF-CRM9的抗体导向作用及毒素部分的活性。 研究结果表明MBS能稳定的连接anti-VEGF和CRM9，通过ELISA方法验证IgG-MBS与CRM9之间的比例为1:1～1:3之间时，连接的效果比较理想，尤其是1:1为最适比例，其他比例的连接都会严重影响IgG抗体的活性，使之降低。SPDS不适宜做这两种蛋白的连接剂。 鸡胚绒毛尿囊膜实验结果显示，接种了Anti-VEGF-CRM9的鸡胚新生血管数目较其他组的新生血管数目减少，并且主要的大血管颜色也加深，验证了该免疫毒素与VEGF充分结合，起到了导向的作用，并有效的抑制了血管的生长，细胞毒性作用稳定。MTT细胞毒性实验结果显示，在Anti-VEGF-CRM9的作用下，细胞生长受到抑制，随着免疫毒素浓度的增加，死细胞的数目也增加，进一步证明Anti-VEGF-CRM9保持了抗活性和细胞的毒性。