本课题为基础性研究，脐血造血干细胞因其免疫原性弱，移植物抗宿主反应（GVHD）低，近年来已经作为骨髓移植的替代品被广泛应用于临床。但脐血造血干细胞在冻存、复溶和扩增的过程中会有一些促进造血干细胞植入（或归巢）的黏附因子减少，同时脐血中有核细胞数量有限，脐血造血干细胞更加原始，其向各系统分化需要更多次的细胞分裂。壳聚糖作为一种免疫增强剂，有促进细胞增殖作用。研究表明，壳聚糖无细胞毒性、不溶血、不致敏、生物相容性良好，可以改善细胞间黏附性，促进细胞黏附分子与黏附分子受体相结合。 本文通过建立动物脐血移植的模型，在体内探讨壳聚糖促进造血干细胞植入的有效性和促进移植成功的意义，表明壳聚糖能有效提高脐血造血干细胞移植成功率，其作用机理可能为壳聚糖有类生长因子作用和免疫增强作用。目前国内外学者对脐血进行大量的实验和临床研究，但仍侧重于体外研究，体内研究较少，本实验动物模型的成功建立也为干细胞在体内移植实验研究奠定基础，近年来对脐血干细胞的移植的研究国内外有许多报道，脐血干细胞有望替代骨髓，成为血液系统疾病的克星。 研究内容： 1.脐血造血干细胞体外扩增：采用MTT法和流式细胞仪检测法，以细胞因子，即干细胞刺激因子（SCF）、Flt-3配体（FL）、白介素-3（ IL-3）作对比，观察不同浓度的水溶性低聚壳聚糖以及不同浓度的水溶性低聚壳聚糖+细胞因子组合对脐血干细胞的扩增作用。 2.脐血造血干细胞体内移植：经亚致死剂量60Coγ射线照射后的小鼠，随机分为5组，每组12只。A组：空白对照小鼠；B组：照射后尾静脉注射生理盐水0.2毫升；C组：每只照射后尾静脉注射5×105个经细胞因子扩增培养1周的脐血CD34+细胞；D组：每只照射后尾静脉注射5×105个经细胞因子扩增培养1周的脐血CD34+细胞，同时用浓度为500mg/d/kg体重的水溶性壳聚糖灌胃；F组：每只照射后仅用浓度为500mg/d/kg体重的水溶性壳聚糖灌胃。 3.观察小鼠的存活情况，以及对造血重建和免疫重建的影响。 结果： 1、水溶性低聚壳聚糖在体外有促脐血造血干细胞增殖的作用，与细胞因子相比，其中间浓度10.0ug/ml对脐血干细胞有明显的扩增作用，与细胞因子相比体外扩增倍数分别是（3.97±0.3649）倍和（11.325±1.2527）倍，上述两组与对照组之间有显著性差异，不同浓度的水溶性低聚壳聚糖+细胞因子组合对脐血干细胞的扩增作用更加明显，增加水溶性低聚壳聚糖浓度并不能明显增加脐血干细胞增殖率； 2、免疫缺失小鼠移植脐血造血干细胞和低聚壳聚糖后，生存情况有了明显改善，造血重建和免疫恢复均明显优于对照组（P＜0.05），水溶性低聚壳聚糖+脐血造血干细胞组效果更显著（P＜0.05）。

本课题为基础性研究，脐血造血干细胞因其免疫原性弱，移植物抗宿主反应（GVHD）低，近年来已经作为骨髓移植的替代品被广泛应用于临床。但脐血造血干细胞在冻存、复溶和扩增的过程中会有一些促进造血干细胞植入（或归巢）的黏附因子减少，同时脐血中有核细胞数量有限，脐血造血干细胞更加原始，其向各系统分化需要更多次的细胞分裂。壳聚糖作为一种免疫增强剂，有促进细胞增殖作用。研究表明，壳聚糖无细胞毒性、不溶血、不致敏、生物相容性良好，可以改善细胞间黏附性，促进细胞黏附分子与黏附分子受体相结合。 本文通过建立动物脐血移植的模型，在体内探讨壳聚糖促进造血干细胞植入的有效性和促进移植成功的意义，表明壳聚糖能有效提高脐血造血干细胞移植成功率，其作用机理可能为壳聚糖有类生长因子作用和免疫增强作用。目前国内外学者对脐血进行大量的实验和临床研究，但仍侧重于体外研究，体内研究较少，本实验动物模型的成功建立也为干细胞在体内移植实验研究奠定基础，近年来对脐血干细胞的移植的研究国内外有许多报道，脐血干细胞有望替代骨髓，成为血液系统疾病的克星。 研究内容： 1.脐血造血干细胞体外扩增：采用MTT法和流式细胞仪检测法，以细胞因子，即干细胞刺激因子（SCF）、Flt-3配体（FL）、白介素-3（ IL-3）作对比，观察不同浓度的水溶性低聚壳聚糖以及不同浓度的水溶性低聚壳聚糖+细胞因子组合对脐血干细胞的扩增作用。 2.脐血造血干细胞体内移植：经亚致死剂量60Coγ射线照射后的小鼠，随机分为5组，每组12只。A组：空白对照小鼠；B组：照射后尾静脉注射生理盐水0.2毫升；C组：每只照射后尾静脉注射5×105个经细胞因子扩增培养1周的脐血CD34+细胞；D组：每只照射后尾静脉注射5×105个经细胞因子扩增培养1周的脐血CD34+细胞，同时用浓度为500mg/d/kg体重的水溶性壳聚糖灌胃；F组：每只照射后仅用浓度为500mg/d/kg体重的水溶性壳聚糖灌胃。 3.观察小鼠的存活情况，以及对造血重建和免疫重建的影响。 结果： 1、水溶性低聚壳聚糖在体外有促脐血造血干细胞增殖的作用，与细胞因子相比，其中间浓度10.0ug/ml对脐血干细胞有明显的扩增作用，与细胞因子相比体外扩增倍数分别是（3.97±0.3649）倍和（11.325±1.2527）倍，上述两组与对照组之间有显著性差异，不同浓度的水溶性低聚壳聚糖+细胞因子组合对脐血干细胞的扩增作用更加明显，增加水溶性低聚壳聚糖浓度并不能明显增加脐血干细胞增殖率； 2、免疫缺失小鼠移植脐血造血干细胞和低聚壳聚糖后，生存情况有了明显改善，造血重建和免疫恢复均明显优于对照组（P＜0.05），水溶性低聚壳聚糖+脐血造血干细胞组效果更显著（P＜0.05）。