研究对象： 　　东乡族原发性高血压组115例，其中男性73例，女性42例，平均年龄(52.16±14.70)岁，病例来自于我省特有的东乡县少数民族。汉族原发性高血压组198例，其中男性125例，女性73例，平均年龄(50.08±13.93)岁，病例来自于我院体检中心，根据WHO诊断标准，两组确诊为原发性高血压，均排除了其他原因引起的继发性高血压，无其他如冠心病、糖尿病等疾病。对照组分别为与高血压组相匹配的东乡族和汉族健康人。 　　AT1R拮抗剂治疗分组：随机（计算机随机抽样法）抽取东乡族原发性高血压患者60例，其中男性45例，女性15例，平均年龄(51.16±11.37)岁，血压水平为Ⅰ～Ⅱ级，其基因型分别为AA和AC型，按AA和AC基因型分成两组，分别给予AT1R拮抗剂缬沙坦80mg，每日1次口服，共8周。 外周血提取DNA：经休息一夜后，于清晨空腹抽取肘静脉血约3ml，用2%EDTA抗凝管抗凝，分离白细胞，用酚／氯仿常规方法提取基因组DNA。具体步骤如下：1)取400μl全血反复用蒸馏水洗涤破坏红细胞，直到上清变白，只留白细胞。2)吸掉上清，加入400μlTE液、60μl 1%SDS液、50μl蛋白酶K混匀，孵育60℃消化，至少2小时。3)加入等量的酚振荡后，10000转离心10分钟，取上清到另一管中，加入等量的酚：氯仿：异戊醇(25:24:1)振荡离心，取上清到另一管中。4)加入10%醋酸钠及等体积异丙醇室温静置20分钟，分层后轻轻倒转，使DNA析出、离心。5)弃上清、70%乙醇及无水乙醇各洗涤一次，离心弃上清。6)开盖自然干燥。 　　基因多态性分析 　　AT1R基因：正向引物F：5′-ATAATGTAAGCTCATCCACC-3′，负向引物R：5′-GAGATTGCATTTCTGTCGGT-3′TaqDNA聚合酶扩增，5U DdeI酶切。 　　PCR扩增：在25μlPCR在混合反应液中，分别含有1.0mM MgCl_2，4种dNTP各120μM，各种引物分别为0.12μM，TaqDNA polymerase 1.6u，模板DNA 20ng；PCR条件：94℃预变性60s，94℃变性40s，58℃退火40s，72℃延伸50s，循环30次，再于72℃延伸10分钟。经1.5%琼脂糖电泳确定有一条274bp带后，将PCR产物用限制酶DdeI(Fermentas Life Science)，1.5U 37℃水浴酶切8小时，A等位基因含DdeI限制位点，酶切后产生165bp和109bp两条带；C等位基因不能被DdeI消化，只有274bp一条带。2.5%琼脂糖凝胶（EB染色）电泳分析。AA=274bp,CC=165bp+109bp,AC=274bp+165bp+109bp。 　　我国最新调查显示我国现有高血压患者约1.6亿人，高血压患病率达18.8%，而高血压的知晓率不足45%，服用药物治疗不超过30%，血压控制率不足10%，而我们仍不知道原发性高血压的发病原因，所以急需高血压的病因诊断，提高知晓率和控制率，评估高血压预后。 研究表明高血压的发病可能与民族、区域及基因有关，原发性高血压只有20%～40%是由遗传因素所致。原发性高血压患者个体差异很大，对药物的反应也不一样，因此对原发性高血压的治疗一定要个体化用药，不可千篇一律。 　　甘肃东乡族作为甘肃独有的少数民族，其山区的地理环境，独特的生活方式，文化程度相对低，经济条件相对困难，营养相对缺乏，卫生保健意识淡薄，这些特殊性有利于原发性高血压的病因学调查，为我们开展高血压的个体化治疗提供理论和实践基础，同时使我们进一步了解原发性高血压诊断、治疗的实际情况，可以切实协助政府解决老百姓看病难，看病贵的问题。 　　本研究深入揭示该基因多态性在不同种族之间的差异，将有助于从基因水平讨论高血压的发病机制，揭示高血压患者个体遗传的多态性，从而为高血压的临床合理选用药及基因治疗提供帮助，筛选出更方便、更高效、更个体化药物，节约大量的医疗经费。

研究对象： 　　东乡族原发性高血压组115例，其中男性73例，女性42例，平均年龄(52.16±14.70)岁，病例来自于我省特有的东乡县少数民族。汉族原发性高血压组198例，其中男性125例，女性73例，平均年龄(50.08±13.93)岁，病例来自于我院体检中心，根据WHO诊断标准，两组确诊为原发性高血压，均排除了其他原因引起的继发性高血压，无其他如冠心病、糖尿病等疾病。对照组分别为与高血压组相匹配的东乡族和汉族健康人。 　　AT1R拮抗剂治疗分组：随机（计算机随机抽样法）抽取东乡族原发性高血压患者60例，其中男性45例，女性15例，平均年龄(51.16±11.37)岁，血压水平为Ⅰ～Ⅱ级，其基因型分别为AA和AC型，按AA和AC基因型分成两组，分别给予AT1R拮抗剂缬沙坦80mg，每日1次口服，共8周。 外周血提取DNA：经休息一夜后，于清晨空腹抽取肘静脉血约3ml，用2%EDTA抗凝管抗凝，分离白细胞，用酚／氯仿常规方法提取基因组DNA。具体步骤如下：1)取400μl全血反复用蒸馏水洗涤破坏红细胞，直到上清变白，只留白细胞。2)吸掉上清，加入400μlTE液、60μl 1%SDS液、50μl蛋白酶K混匀，孵育60℃消化，至少2小时。3)加入等量的酚振荡后，10000转离心10分钟，取上清到另一管中，加入等量的酚：氯仿：异戊醇(25:24:1)振荡离心，取上清到另一管中。4)加入10%醋酸钠及等体积异丙醇室温静置20分钟，分层后轻轻倒转，使DNA析出、离心。5)弃上清、70%乙醇及无水乙醇各洗涤一次，离心弃上清。6)开盖自然干燥。 　　基因多态性分析 　　AT1R基因：正向引物F：5′-ATAATGTAAGCTCATCCACC-3′，负向引物R：5′-GAGATTGCATTTCTGTCGGT-3′TaqDNA聚合酶扩增，5U DdeI酶切。 　　PCR扩增：在25μlPCR在混合反应液中，分别含有1.0mM MgCl_2，4种dNTP各120μM，各种引物分别为0.12μM，TaqDNA polymerase 1.6u，模板DNA 20ng；PCR条件：94℃预变性60s，94℃变性40s，58℃退火40s，72℃延伸50s，循环30次，再于72℃延伸10分钟。经1.5%琼脂糖电泳确定有一条274bp带后，将PCR产物用限制酶DdeI(Fermentas Life Science)，1.5U 37℃水浴酶切8小时，A等位基因含DdeI限制位点，酶切后产生165bp和109bp两条带；C等位基因不能被DdeI消化，只有274bp一条带。2.5%琼脂糖凝胶（EB染色）电泳分析。AA=274bp,CC=165bp+109bp,AC=274bp+165bp+109bp。 　　我国最新调查显示我国现有高血压患者约1.6亿人，高血压患病率达18.8%，而高血压的知晓率不足45%，服用药物治疗不超过30%，血压控制率不足10%，而我们仍不知道原发性高血压的发病原因，所以急需高血压的病因诊断，提高知晓率和控制率，评估高血压预后。 研究表明高血压的发病可能与民族、区域及基因有关，原发性高血压只有20%～40%是由遗传因素所致。原发性高血压患者个体差异很大，对药物的反应也不一样，因此对原发性高血压的治疗一定要个体化用药，不可千篇一律。 　　甘肃东乡族作为甘肃独有的少数民族，其山区的地理环境，独特的生活方式，文化程度相对低，经济条件相对困难，营养相对缺乏，卫生保健意识淡薄，这些特殊性有利于原发性高血压的病因学调查，为我们开展高血压的个体化治疗提供理论和实践基础，同时使我们进一步了解原发性高血压诊断、治疗的实际情况，可以切实协助政府解决老百姓看病难，看病贵的问题。 　　本研究深入揭示该基因多态性在不同种族之间的差异，将有助于从基因水平讨论高血压的发病机制，揭示高血压患者个体遗传的多态性，从而为高血压的临床合理选用药及基因治疗提供帮助，筛选出更方便、更高效、更个体化药物，节约大量的医疗经费。