人类基因组计划的完成标志着后基因时代的来临。后基因时代的重点已由基因组测序转移到对基因组中个体差异的比较。与为数有限的蛋白质和DNA测序方法相比，突变分析方法多达数十种。种类繁多的突变分析方法，既反映突变分析的重要性，也反映单一方法难以满足生物医学对突变分析的要求。如其中一大类获得广泛应用的检测方法，即碱基特异性引物延伸反应，包括单向或双向引物延伸反应、引物延伸反应与连接酶结合和引物延伸反应与杂交分析结合等技术，由于无校正功能低保真聚合酶的应用，使其在技术层面上具有内在缺陷，检测结果常出现高假阳性。 从四十年前发现聚合酶具有不同保真性开始，在聚合酶分子水平研究遗传与变异便成为生命科学研究的热点。高保真DNA聚合酶通过著名的校正或错配碱基修复机制，参与遗传物质稳定性的维持。高保真酶除具有聚合酶活性外，该分子还含有3|→5|外切酶活性，通过此外切功能对复制过程中新生DNA链三末端或近三末端不配对碱基的校正，使DNA合成终产物的保真度得以维持，但高保真酶并非核酸合成的常规酶。低保真酶缺乏校正功能使其具有快速合成的优势，主要负责基因组DNA合成。当核酸合成发生错配或遇到不可阅读的模板时，低保真酶与高保真酶进行职能切换，启动高保真酶3|→5|外切酶的校正机制。 以聚合酶为对象的有关突变研究主要采用两种方法：一是在整体动物通过转基因或基因打靶改变细胞内不同聚合酶的结构比例，观察其对表型的影响；另一为对离体实验中不同聚合酶的延伸产物进行测序，确定突变频率与突变谱。我们利用人工合成特定修饰的三末端不配对引物，观察低、高保真酶在引物延伸反应中的行为特征。这一研究突变发生与突变修复的新方法，在离体条件下模仿核酸合成中不同保真度DNA聚合酶的职能切换现象。应用该方法，我们观察到DNA新生链的非成熟性终止，并开发了利用高保真酶外切活性的突变敏感性分子开关，提出了突变与肿瘤相关性分析的数量规律。

人类基因组计划的完成标志着后基因时代的来临。后基因时代的重点已由基因组测序转移到对基因组中个体差异的比较。与为数有限的蛋白质和DNA测序方法相比，突变分析方法多达数十种。种类繁多的突变分析方法，既反映突变分析的重要性，也反映单一方法难以满足生物医学对突变分析的要求。如其中一大类获得广泛应用的检测方法，即碱基特异性引物延伸反应，包括单向或双向引物延伸反应、引物延伸反应与连接酶结合和引物延伸反应与杂交分析结合等技术，由于无校正功能低保真聚合酶的应用，使其在技术层面上具有内在缺陷，检测结果常出现高假阳性。 从四十年前发现聚合酶具有不同保真性开始，在聚合酶分子水平研究遗传与变异便成为生命科学研究的热点。高保真DNA聚合酶通过著名的校正或错配碱基修复机制，参与遗传物质稳定性的维持。高保真酶除具有聚合酶活性外，该分子还含有3|→5|外切酶活性，通过此外切功能对复制过程中新生DNA链三末端或近三末端不配对碱基的校正，使DNA合成终产物的保真度得以维持，但高保真酶并非核酸合成的常规酶。低保真酶缺乏校正功能使其具有快速合成的优势，主要负责基因组DNA合成。当核酸合成发生错配或遇到不可阅读的模板时，低保真酶与高保真酶进行职能切换，启动高保真酶3|→5|外切酶的校正机制。 以聚合酶为对象的有关突变研究主要采用两种方法：一是在整体动物通过转基因或基因打靶改变细胞内不同聚合酶的结构比例，观察其对表型的影响；另一为对离体实验中不同聚合酶的延伸产物进行测序，确定突变频率与突变谱。我们利用人工合成特定修饰的三末端不配对引物，观察低、高保真酶在引物延伸反应中的行为特征。这一研究突变发生与突变修复的新方法，在离体条件下模仿核酸合成中不同保真度DNA聚合酶的职能切换现象。应用该方法，我们观察到DNA新生链的非成熟性终止，并开发了利用高保真酶外切活性的突变敏感性分子开关，提出了突变与肿瘤相关性分析的数量规律。