皮肤作为天然免疫的第一道防线，在抵抗外来微生物感染中发挥着重要的作用，但作为特异识别细菌CpG motif的受体TLR9在正常皮肤不表达。Toll样受体9在皮肤天然免疫及基因枪接种DNA疫苗诱生免疫应答中如何发挥作用则也尚不清楚。 　　本项目立足于皮肤天然免疫的机理研究，探讨TLR9在皮肤中的表达情况，了解其在皮肤天然免疫中的作用，再在此基础上以改善基因枪皮肤接种DNA疫苗诱生免疫应答位为切入点，对基因枪皮肤接种DNA疫苗诱生TH2型免疫应答的机理包括TLR9的作用进行探讨，并结合相关理论，试图寻找能增强基因枪接种DNA疫苗诱生TH1型免疫应答的佐剂策略。结果发现， 　　（1）皮肤在正常状态下不表达TLR9，皮内注射引起的物理损伤等可诱导皮肤表达TLR9，并介导对CpG motif的识别，释放急性炎性因子IL-1、IL-6、IL-12和TNF-，促进皮肤Th1型微环境的形成。 　　（2）物理损伤诱生的TLR9阳性细胞源自于外周血表达TLR9的单个核细胞，它们含有归巢受体，可促进其归巢至淋巴结，CpG motif可促进皮肤中CXCR4 mRNA的表达，利于细胞的归巢，并进一步促进淋巴结IL-12 mRNA的表达，提供了Th1型免疫反应的微环境； 　　（3）基因枪将金颗粒单独轰击皮肤造成TH2偏性的“危险刺激”，增加CpG-ODN后基因枪接种能促使引流淋巴结的细胞因子微环境转化为TH1型； 　　（4）在基因枪接种DNA疫苗的同时共导入一定量的TLR9配体CpG-ODN，或采用其他TLR配体如可识别TLR3的tRNA及可结合RNA的HBcAg，可克服其TH2型的偏性，在动物体内可更有效地诱生机体产生体液及细胞免疫，包括提高了IgG2a水平、IgG2a／IgG1比值，增强了特异性CTL活性以及抗原特异的IFN-γ释放能力。 　　上述研究结果在理论上有助于阐明TLR在皮肤天然免疫的作用及DNA免疫的机制，在实践中则有助于克服基因枪接种方式的缺陷，为推动DNA疫苗走向实际应用打下基础，并为开发基于TLR配体的新型免疫佐剂或治疗制剂提供了实施路线。

　　皮肤作为天然免疫的第一道防线，在抵抗外来微生物感染中发挥着重要的作用，但作为特异识别细菌CpG motif的受体TLR9在正常皮肤不表达。Toll样受体9在皮肤天然免疫及基因枪接种DNA疫苗诱生免疫应答中如何发挥作用则也尚不清楚。 　　本项目立足于皮肤天然免疫的机理研究，探讨TLR9在皮肤中的表达情况，了解其在皮肤天然免疫中的作用，再在此基础上以改善基因枪皮肤接种DNA疫苗诱生免疫应答位为切入点，对基因枪皮肤接种DNA疫苗诱生TH2型免疫应答的机理包括TLR9的作用进行探讨，并结合相关理论，试图寻找能增强基因枪接种DNA疫苗诱生TH1型免疫应答的佐剂策略。结果发现， 　　（1）皮肤在正常状态下不表达TLR9，皮内注射引起的物理损伤等可诱导皮肤表达TLR9，并介导对CpG motif的识别，释放急性炎性因子IL-1、IL-6、IL-12和TNF-，促进皮肤Th1型微环境的形成。 　　（2）物理损伤诱生的TLR9阳性细胞源自于外周血表达TLR9的单个核细胞，它们含有归巢受体，可促进其归巢至淋巴结，CpG motif可促进皮肤中CXCR4 mRNA的表达，利于细胞的归巢，并进一步促进淋巴结IL-12 mRNA的表达，提供了Th1型免疫反应的微环境； 　　（3）基因枪将金颗粒单独轰击皮肤造成TH2偏性的“危险刺激”，增加CpG-ODN后基因枪接种能促使引流淋巴结的细胞因子微环境转化为TH1型； 　　（4）在基因枪接种DNA疫苗的同时共导入一定量的TLR9配体CpG-ODN，或采用其他TLR配体如可识别TLR3的tRNA及可结合RNA的HBcAg，可克服其TH2型的偏性，在动物体内可更有效地诱生机体产生体液及细胞免疫，包括提高了IgG2a水平、IgG2a／IgG1比值，增强了特异性CTL活性以及抗原特异的IFN-γ释放能力。 　　上述研究结果在理论上有助于阐明TLR在皮肤天然免疫的作用及DNA免疫的机制，在实践中则有助于克服基因枪接种方式的缺陷，为推动DNA疫苗走向实际应用打下基础，并为开发基于TLR配体的新型免疫佐剂或治疗制剂提供了实施路线。