本项目自2004年9月开始至2006年12月完成。 　　机体感染风疹病毒可获得持久免疫力，对整个人群接种疫苗是预防和消除风疹的重要手段。 　　美国于1969年首次研制并使用风疹病毒减毒活疫苗，由于长期实施MMR（风疹、麻疹、腮腺炎）三联疫苗接种计划，风疹病例在美国呈下降趋势。我国虽然有风疹减毒活疫苗BRDⅡ，但我国现今尚未将其列为计划免疫，风疹似有流行。 　　目前国内外使用的风疹疫苗均为减毒活疫苗，尽管它的免疫效果好，但仍存在副作用。使用基因工程亚单位或病毒样颗粒（virus-like partieal VLP）代替传统的风疹病毒减毒活疫苗日益受到重视。亚单位疫苗及VLP中包含了风疹病毒结构蛋白且不复制，这不仅保证了疫苗良好的免疫效果，而且避免了接种副作用的发生，提高了接种的安全性。 　　本研究已从可疑风疹病人血标本中分离到在哈地区流行的风疹病毒株（HRB）。利用临床分离株制备风疹疫苗，会使被接种人群获得更有效的免疫效果。特别是风疹病毒基因型有很大地域性，故研制的本基因工程疫苗株更接近流行株，用表达的蛋白进行免疫时，效果会更好。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对159例发热病人血清中的风疹病毒IgM进行测定；采用BHK21细胞培养法对风疹病毒IgM抗体阳性病人血标本进行风疹病毒分离，并用RT-PCR、细胞生长曲线、电镜观察、免疫组化等方法对可疑风疹病毒株进行鉴定以明确哈尔滨地区风疹病毒的流行情况。利用临床分离的风疹病毒株（哈尔滨株，HRB RV）获取风疹病毒基因编码的结构蛋白的基因E1、E2片段，采用基因工程手段进行基因克隆、重组及目的蛋白的表达，构建风疹病毒基因工程菌株，为研制基因工程疫苗提供实验和工作基础，并利用表达E1蛋白研制检测风疹病毒抗体的试剂。 　　结果：从可疑风疹病人血标本中分离到在哈地区流行的风疹病毒株HRB，获取了风疹病毒基因编码的结构蛋白的基因E1、E2片段，采用基因工程手段进行基因克隆、重组及目的蛋白的表达，构建了风疹病毒基因工程菌株，表达出了E1蛋白。 　　利用临床分离株制备风疹疫苗，会使被接种人群获得更有效的免疫效果。特别是风疹病毒基因型有很大地域性，故用本实验分离的流行株研制基因工程疫苗，用其表达的蛋白进行免疫时，效果会更好。

　　本项目自2004年9月开始至2006年12月完成。 　　机体感染风疹病毒可获得持久免疫力，对整个人群接种疫苗是预防和消除风疹的重要手段。 　　美国于1969年首次研制并使用风疹病毒减毒活疫苗，由于长期实施MMR（风疹、麻疹、腮腺炎）三联疫苗接种计划，风疹病例在美国呈下降趋势。我国虽然有风疹减毒活疫苗BRDⅡ，但我国现今尚未将其列为计划免疫，风疹似有流行。 　　目前国内外使用的风疹疫苗均为减毒活疫苗，尽管它的免疫效果好，但仍存在副作用。使用基因工程亚单位或病毒样颗粒（virus-like partieal VLP）代替传统的风疹病毒减毒活疫苗日益受到重视。亚单位疫苗及VLP中包含了风疹病毒结构蛋白且不复制，这不仅保证了疫苗良好的免疫效果，而且避免了接种副作用的发生，提高了接种的安全性。 　　本研究已从可疑风疹病人血标本中分离到在哈地区流行的风疹病毒株（HRB）。利用临床分离株制备风疹疫苗，会使被接种人群获得更有效的免疫效果。特别是风疹病毒基因型有很大地域性，故研制的本基因工程疫苗株更接近流行株，用表达的蛋白进行免疫时，效果会更好。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对159例发热病人血清中的风疹病毒IgM进行测定；采用BHK21细胞培养法对风疹病毒IgM抗体阳性病人血标本进行风疹病毒分离，并用RT-PCR、细胞生长曲线、电镜观察、免疫组化等方法对可疑风疹病毒株进行鉴定以明确哈尔滨地区风疹病毒的流行情况。利用临床分离的风疹病毒株（哈尔滨株，HRB RV）获取风疹病毒基因编码的结构蛋白的基因E1、E2片段，采用基因工程手段进行基因克隆、重组及目的蛋白的表达，构建风疹病毒基因工程菌株，为研制基因工程疫苗提供实验和工作基础，并利用表达E1蛋白研制检测风疹病毒抗体的试剂。 　　结果：从可疑风疹病人血标本中分离到在哈地区流行的风疹病毒株HRB，获取了风疹病毒基因编码的结构蛋白的基因E1、E2片段，采用基因工程手段进行基因克隆、重组及目的蛋白的表达，构建了风疹病毒基因工程菌株，表达出了E1蛋白。 　　利用临床分离株制备风疹疫苗，会使被接种人群获得更有效的免疫效果。特别是风疹病毒基因型有很大地域性，故用本实验分离的流行株研制基因工程疫苗，用其表达的蛋白进行免疫时，效果会更好。