基因治疗是近几年发展的一种新的医疗模式。其治疗的疾病种类包括遗传性疾病、肿瘤、感染性疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病等。特别是恶性肿瘤，由于发病率高，死亡率高，而目前尚缺乏十分有效的治疗方法，因此成为基因治疗的首选病种。本项目研究的主要目的是为了解决基因枪和质粒DNA注射转移细胞因子基因对恶性肿瘤进行DNA疫苗的分子生物学和细胞生物学的基础问题，为核酸疫苗进入临床实验提供科学依据。克隆构建了人GM－CSF、人IL－15、GM－15融合基因，构建了转基因工程瘤苗－LA795GM和LA795IL，再通过试验分别获得用“质粒DNA直接注射法”和“基因枪”转移GM－CSF、IL－15、GM－15的3种细胞因子治疗肿瘤的临床前的有关结果的基础上，探讨核酸疫苗的免疫途径、免疫方法，对几种核酸疫苗的技术成果进行产业化技术研究和开发。 本研究创新点、主要贡献： ①为了能够产生一个既具有提高机体免疫功能又具有直接抗肿瘤双重作用机制的目的基因。课题组已成功构建IL－15和GM－CSF真核表达载体和融合基因表达载体； ②利用PCR突变技术构建pCDNA3.1-GM-CSF-IL-15融合基因，利用原核表达载体pPROEX Htb进行探讨融合蛋白的蛋白结构以及功能； ③首先报道pCDNA3.1-GM-CSF和pCDNA3.1-IL-15可直接进行裸质粒DNA注射，并具有显著的抗肿瘤抑制小鼠肺腺癌的作用； ④对DNA疫苗的给药方式：DNA肌肉注射和基因枪注射这两种最为先进、最具前景的DNA疫苗技术进行了应用方式、有效性、稳定性等等的初步的探讨。 本研究解决了基因枪和质粒DNA注射细胞因子基因对恶性肿瘤进行DNA疫苗的分子生物学和细胞生物学的基础问题，通过对该项目的研究，成功构建了基因工程瘤苗和裸质粒DNA疫苗，为转基因瘤苗的构建和临床应用奠定了实验基础，为核酸疫苗进入临床实验提供科学依据。

基因治疗是近几年发展的一种新的医疗模式。其治疗的疾病种类包括遗传性疾病、肿瘤、感染性疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病等。特别是恶性肿瘤，由于发病率高，死亡率高，而目前尚缺乏十分有效的治疗方法，因此成为基因治疗的首选病种。本项目研究的主要目的是为了解决基因枪和质粒DNA注射转移细胞因子基因对恶性肿瘤进行DNA疫苗的分子生物学和细胞生物学的基础问题，为核酸疫苗进入临床实验提供科学依据。克隆构建了人GM－CSF、人IL－15、GM－15融合基因，构建了转基因工程瘤苗－LA795GM和LA795IL，再通过试验分别获得用“质粒DNA直接注射法”和“基因枪”转移GM－CSF、IL－15、GM－15的3种细胞因子治疗肿瘤的临床前的有关结果的基础上，探讨核酸疫苗的免疫途径、免疫方法，对几种核酸疫苗的技术成果进行产业化技术研究和开发。 本研究创新点、主要贡献： ①为了能够产生一个既具有提高机体免疫功能又具有直接抗肿瘤双重作用机制的目的基因。课题组已成功构建IL－15和GM－CSF真核表达载体和融合基因表达载体； ②利用PCR突变技术构建pCDNA3.1-GM-CSF-IL-15融合基因，利用原核表达载体pPROEX Htb进行探讨融合蛋白的蛋白结构以及功能； ③首先报道pCDNA3.1-GM-CSF和pCDNA3.1-IL-15可直接进行裸质粒DNA注射，并具有显著的抗肿瘤抑制小鼠肺腺癌的作用； ④对DNA疫苗的给药方式：DNA肌肉注射和基因枪注射这两种最为先进、最具前景的DNA疫苗技术进行了应用方式、有效性、稳定性等等的初步的探讨。 本研究解决了基因枪和质粒DNA注射细胞因子基因对恶性肿瘤进行DNA疫苗的分子生物学和细胞生物学的基础问题，通过对该项目的研究，成功构建了基因工程瘤苗和裸质粒DNA疫苗，为转基因瘤苗的构建和临床应用奠定了实验基础，为核酸疫苗进入临床实验提供科学依据。