1、课题来源及背景 　　长段尿道缺损的修复是临床急需解决的难题。采用患者自身的泌尿器官组织进行修复是最佳的取材来源，但受到患者泌尿器官数量的限制，而泌尿器官以外来源的组织及其他各种同种移植物、异种移植物及生物合成材料等均会有不同程度的不良反应。组织工程的进展有效的解决了这个难题。 　　2、技术原理及性能指标 　　组织工程学基本的思路是在体外分离、培养细胞，将一定数量的细胞接种到具有一定空间结构的支架材料上，通过细胞间的相互粘附、生长繁殖、分泌细胞外基质，从而形成具有一定结构和功能的组织或器官。组织工程研究要求具备三个条件：足够数量且功能正常的种子细胞；适宜的细胞外基质材料；调节细胞增殖、保持细胞表型特征的细胞因子。 　　3.技术创新性及先进性 　　①、成功的将兔颈总动脉进行脱细胞处理，细胞外基质支架生物相容性良好。由于保存了完整的弹力纤维和胶原等维持血管弹性的物质，弹性良好，可防止尿道憩室的发生。 　　②、GFP作为组织工程研究的理想活细胞示踪剂，可以追踪和观察植入裸鼠体内活细胞的生长状况。 　　③、血管与尿道均为管形结构，可按需制作出所需直径和长度的支架材料，实现商品化。 　　④、VEGF转染入上皮细胞后在基因和蛋白水平可以进行表达，并可以分泌到细胞外作用于细胞周围促进新生血管生成，为构建高质量的血供丰富的组织工程尿道、预防尿瘘、尿道狭窄及尿道憩室等并发症的发生提供了一种有效的治疗方法。　 　　4、技术的成熟程度 　　构建组织工程尿道的技术环节均已成熟。完善了兔膀胱移行上皮细胞的培养方法及培养基体系；应用分子生物学技术构建含有VEGF165和GFP序列的载体质粒，成功应用磷酸钙转染方法制备逆转录病毒；pMSCV-VEGF-GFP病毒在体外成功的转染了兔膀胱上皮细胞，转染效率达到70%以上；成功的将兔颈总动脉进行脱细胞处理，制备细胞外基质；组织工程尿道在裸鼠体内培育一月后，经检测证实构建成功，技术成熟，具有可重复性。 　　5、应用情况和存在的问题 　　我们正在进行下游的工作研究，即将组织工程尿道进行原位移植，以为将来临床应用奠定基础。

　　1、课题来源及背景 　　长段尿道缺损的修复是临床急需解决的难题。采用患者自身的泌尿器官组织进行修复是最佳的取材来源，但受到患者泌尿器官数量的限制，而泌尿器官以外来源的组织及其他各种同种移植物、异种移植物及生物合成材料等均会有不同程度的不良反应。组织工程的进展有效的解决了这个难题。 　　2、技术原理及性能指标 　　组织工程学基本的思路是在体外分离、培养细胞，将一定数量的细胞接种到具有一定空间结构的支架材料上，通过细胞间的相互粘附、生长繁殖、分泌细胞外基质，从而形成具有一定结构和功能的组织或器官。组织工程研究要求具备三个条件：足够数量且功能正常的种子细胞；适宜的细胞外基质材料；调节细胞增殖、保持细胞表型特征的细胞因子。 　　3.技术创新性及先进性 　　①、成功的将兔颈总动脉进行脱细胞处理，细胞外基质支架生物相容性良好。由于保存了完整的弹力纤维和胶原等维持血管弹性的物质，弹性良好，可防止尿道憩室的发生。 　　②、GFP作为组织工程研究的理想活细胞示踪剂，可以追踪和观察植入裸鼠体内活细胞的生长状况。 　　③、血管与尿道均为管形结构，可按需制作出所需直径和长度的支架材料，实现商品化。 　　④、VEGF转染入上皮细胞后在基因和蛋白水平可以进行表达，并可以分泌到细胞外作用于细胞周围促进新生血管生成，为构建高质量的血供丰富的组织工程尿道、预防尿瘘、尿道狭窄及尿道憩室等并发症的发生提供了一种有效的治疗方法。　 　　4、技术的成熟程度 　　构建组织工程尿道的技术环节均已成熟。完善了兔膀胱移行上皮细胞的培养方法及培养基体系；应用分子生物学技术构建含有VEGF165和GFP序列的载体质粒，成功应用磷酸钙转染方法制备逆转录病毒；pMSCV-VEGF-GFP病毒在体外成功的转染了兔膀胱上皮细胞，转染效率达到70%以上；成功的将兔颈总动脉进行脱细胞处理，制备细胞外基质；组织工程尿道在裸鼠体内培育一月后，经检测证实构建成功，技术成熟，具有可重复性。 　　5、应用情况和存在的问题 　　我们正在进行下游的工作研究，即将组织工程尿道进行原位移植，以为将来临床应用奠定基础。