本研究利用培养的胎鼠大脑神经干细胞(NSCs)作为实验对象，利用三气培养箱制造细胞缺氧损伤模型，观察脑源性神经营养因子(BDNF)对体外培养的NSCs缺氧损伤是否有保护作用，观察BDNF对NSCs分化功能的影响，从细胞水平和分子生物学水平探讨BDNF对NSCs的作用。 主要技术指标： 1.通过MTT实验、细胞胞浆LDH测定和免疫荧光染色，发现BDNF可提高NSCs抗缺氧损伤能力，缺氧影响细胞MAP2、GFAP、TrkB蛋白表达，加入BDNF可保护NSCs免受缺氧带来的损伤； 2.利用Western blot实验从蛋白水平证明NSCs在缺氧培养条件下，可导致Bcl-2表达降低、Bax表达升高，BDNF作用下结果与正常培养的对照组相似； 3.利用RT-PCR技术检测NSCs凋亡基因（bcl-2、bax）和细胞分化产物特征性基因(nne、nse、gfap)表达的影响，结果证明，缺氧可下调bcl-2表达，上bax表达，BDNF的加入可逆转这种现象。缺氧分化后的细胞nse、nne基因表达明显低于正常培养的对照组，而BDNF对神经祖细胞缺氧损伤具有保护作用，并可促进NSCs向神经元定向分化。 经天津市医学科学技术信息研究所检索，中外文均未查到1.BDNF对缺氧状态下神经干细胞增殖、分化和凋亡的影响；比较预先加入BDNF再缺氧培养与缺氧时加入BDNF两种培养条件对NSCs分化神经元影响的文献报道。 研究发现，在正常大脑皮质中移植NSCs未发现分化的神经元，而在梗死灶侧半球的移植的NSCs只有5%分化为神经元，考虑到移植NSCs数量巨大，神经元数量的补充仍有临床治疗意义。如果通过药物提高内源性BDNF的合成、释放和利用基因工程修饰体外培养的NSCs，可使其向神经元分化的比例大大提高，将会给细胞移植技术带来一个新的飞跃。

本研究利用培养的胎鼠大脑神经干细胞(NSCs)作为实验对象，利用三气培养箱制造细胞缺氧损伤模型，观察脑源性神经营养因子(BDNF)对体外培养的NSCs缺氧损伤是否有保护作用，观察BDNF对NSCs分化功能的影响，从细胞水平和分子生物学水平探讨BDNF对NSCs的作用。 主要技术指标： 1.通过MTT实验、细胞胞浆LDH测定和免疫荧光染色，发现BDNF可提高NSCs抗缺氧损伤能力，缺氧影响细胞MAP2、GFAP、TrkB蛋白表达，加入BDNF可保护NSCs免受缺氧带来的损伤； 2.利用Western blot实验从蛋白水平证明NSCs在缺氧培养条件下，可导致Bcl-2表达降低、Bax表达升高，BDNF作用下结果与正常培养的对照组相似； 3.利用RT-PCR技术检测NSCs凋亡基因（bcl-2、bax）和细胞分化产物特征性基因(nne、nse、gfap)表达的影响，结果证明，缺氧可下调bcl-2表达，上bax表达，BDNF的加入可逆转这种现象。缺氧分化后的细胞nse、nne基因表达明显低于正常培养的对照组，而BDNF对神经祖细胞缺氧损伤具有保护作用，并可促进NSCs向神经元定向分化。 经天津市医学科学技术信息研究所检索，中外文均未查到1.BDNF对缺氧状态下神经干细胞增殖、分化和凋亡的影响；比较预先加入BDNF再缺氧培养与缺氧时加入BDNF两种培养条件对NSCs分化神经元影响的文献报道。 研究发现，在正常大脑皮质中移植NSCs未发现分化的神经元，而在梗死灶侧半球的移植的NSCs只有5%分化为神经元，考虑到移植NSCs数量巨大，神经元数量的补充仍有临床治疗意义。如果通过药物提高内源性BDNF的合成、释放和利用基因工程修饰体外培养的NSCs，可使其向神经元分化的比例大大提高，将会给细胞移植技术带来一个新的飞跃。