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日本血吸虫核酸疫苗的基因克隆及其表达的研究

成果基本信息
关键词: 日本血吸虫;核酸疫苗;基因克隆;cDNA文库
成果类别: 基础理论 技术成熟度: /
体现形式(基础理论类): 论文 体现形式(应用技术类): /
成果登记号: 08022334 资源采集日期: 10-2-10
研究情况
单位名称: 宁波大学 技术水平: 国内先进
评价证书号: 甬科验字[2008]第23-34号 评价单位: 宁波大学
评价日期: 2002.12.18 评价证书号: 甬科验字[2008]第23-34号
转化情况
转让范围: / 推广形式: /
已转让企业数(个): 0
联系方式
联系人(平台): 孵化基地 联系人(平台)电话: 0771-3394012
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成果简介

利用基因筛选的方法,探讨用编码完整膜蛋白(Sj23)核酸疫苗诱导BALB/c小鼠抗日本血吸虫病保护力的效果。大量制备DNA疫苗,将BALB/c小鼠分成三组,肌肉内注射进行免疫。免疫小鼠3次,间隔2周,末次免疫后2周,用ELISA法和Western blotting 法检测免疫鼠血清特异性抗体效价。结果,编码Sj23-PcDNA质粒免疫的小鼠产生了针对Sj23的特异性IgG,而PcDNA对照组免疫小鼠血清则无此作用。Sj23-PcDNA疫苗对日本血吸虫攻击感染有一定的保护力,免疫动物诱导小鼠产生了44%的减虫率。核酸疫苗具有造价低,易于制备和纯化,生化性质稳定的特点。但免疫所产生的保护力还有待提高。 再者,寻找紫外线致弱日本血吸虫尾蚴中起免疫保护作用的候选抗原分子,为血吸虫疫苗研究提供新的候选靶位抗原。方法,用紫外线照射致弱尾蚴免疫猪血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,测得最佳cDNA文库的滴度为1.89×109pfu/ml,经三轮筛选,致弱尾蚴组分别20、10个阳性克隆。获得的阳性克隆可能为寻找编码抗日本血吸虫感染的抗原基因提供了材料与方向。 此外,与上述相对照,课题组还探讨了环孢素A抗曼氏血吸虫的作用,实验显示,虫体表面损伤、童虫荧光素定量增加、虫体光漂洗后荧光素的复原率大幅度降低,提示,血吸虫表膜是药物作用的靶标。将血吸虫病的疫苗研究和药物研究相结合是未来治疗血吸虫病的有效途径。

成果名称: 日本血吸虫核酸疫苗的基因克隆及其表达的研究 关键词: 日本血吸虫;核酸疫苗;基因克隆;cDNA文库
成果类别: 基础理论 一级分类名称: 医学生物工程
二级分类名称: / 三级分类名称: /
研究起止时间: 2007.03 至2008.12 成果体现形式(应用技术类): /
成果属性: / 成果体现形式(基础理论类): 论文
技术成熟度: / 技术水平: 国内先进
研究形式: 独立研究 学科分类1: 310.34
单位名称: 宁波大学 学科分类2: /
中图分类号1: R392-33 所属高新技术类别: /
中图分类号2: / 课题来源: 部门基金
应用行业: 卫生、社会保障和社会福利业 课题立项名称:
国家科技计划子类别: / 课题立项编号: No.2007313;2007A610076
经费实际投入额 (万元): 5 评价单位: 宁波大学
评价形式: 验收 应用状态: /
评价日期: 2002.12.18 转让范围: /
评价证书号: 甬科验字[2008]第23-34号 推荐单位: 宁波市科技局
推广形式: / 成果登记号: 08022334
成果简介:

利用基因筛选的方法,探讨用编码完整膜蛋白(Sj23)核酸疫苗诱导BALB/c小鼠抗日本血吸虫病保护力的效果。大量制备DNA疫苗,将BALB/c小鼠分成三组,肌肉内注射进行免疫。免疫小鼠3次,间隔2周,末次免疫后2周,用ELISA法和Western blotting 法检测免疫鼠血清特异性抗体效价。结果,编码Sj23-PcDNA质粒免疫的小鼠产生了针对Sj23的特异性IgG,而PcDNA对照组免疫小鼠血清则无此作用。Sj23-PcDNA疫苗对日本血吸虫攻击感染有一定的保护力,免疫动物诱导小鼠产生了44%的减虫率。核酸疫苗具有造价低,易于制备和纯化,生化性质稳定的特点。但免疫所产生的保护力还有待提高。 再者,寻找紫外线致弱日本血吸虫尾蚴中起免疫保护作用的候选抗原分子,为血吸虫疫苗研究提供新的候选靶位抗原。方法,用紫外线照射致弱尾蚴免疫猪血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,测得最佳cDNA文库的滴度为1.89×109pfu/ml,经三轮筛选,致弱尾蚴组分别20、10个阳性克隆。获得的阳性克隆可能为寻找编码抗日本血吸虫感染的抗原基因提供了材料与方向。 此外,与上述相对照,课题组还探讨了环孢素A抗曼氏血吸虫的作用,实验显示,虫体表面损伤、童虫荧光素定量增加、虫体光漂洗后荧光素的复原率大幅度降低,提示,血吸虫表膜是药物作用的靶标。将血吸虫病的疫苗研究和药物研究相结合是未来治疗血吸虫病的有效途径。

联系人: 科技处 成果登记日期: 08-12-25
联系人email: / 单位代码: 93300007
邮政编码222: 315211 联系人电话: 0574-87609127
单位传真: 0574-87605266 单位通讯地址: 浙江省宁波市江北区风华路818号
单位所在省市: 江苏省 单位电话: 0574-87600223;87600258;87609127
转让收入(万元): 0 单位属性: 大专院校
合作完成单位: / 已转让企业数(个): 0
成果发布年份: 2009 知识产权形式:
成果完成人: 柳建发;汤治元;刘玉新;杨淑娟 资源采集日期: 10-2-10

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