核酸疫苗是90年代兴起的一种新的疫苗，它已在多种感染性疾病和肿瘤的防治中显示出巨大的潜能。然而围绕着增强核酸疫苗的免疫效果等国际热点问题，在理论上还没有真正得到解决。 核酸疫苗的免疫效果在不同动物个体中差异较大。针对该问题，本研究以结核病和囊虫病为研究对象，采用几种策略对核酸疫苗的免疫效果进行调节。 (1)筛选侯选抗原 候选抗原的筛选实质上是比较分析不同保护性抗原编码基因在被免疫动物体内的表达与诱导免疫保护作用的过程。获得理想的候选抗原基因是核酸疫苗研制的关键前提。在囊虫病候选抗原的筛选中，选择了两种抗原。cC1抗原是本课题组从囊尾蚴表达文库中筛选出来的抗原；AgB是寄生虫扁形门蠕虫中的疫苗候选抗原。在结核病的候选抗原基因的筛选中，根据报道的亚单位疫苗的免疫效果进行选择抗原。本实验中选择了结核杆菌的ESAT6、MPT64、Ag85A、HSP65蛋白作为候选抗原。它们都是结核杆菌滤液蛋白。 (2)在核酸疫苗的研究中，免疫接种方式往往影响到免疫效果。近几年来国内外研究者开始尝试用核酸疫苗来防治结核病的实验室研究，但保护效果均未超过卡介苗，所以有必要选用有效的佐剂来增强疫苗的效果。本成果根据结核病保护性免疫的特点，选用泛素分子作为佐剂。 (3)采用DNA prime-protein boost的方案进行接种 目前该方案如何影响免疫应答目前尚存在争议。本研究以ESAT6抗原和cC1抗原为目标抗原，以该方案进行接种来调节核酸疫苗的免疫效果。 (4)表位核酸疫苗是近几年来基于核酸疫苗而发展起来的新型疫苗。表位序列连接在一起后，又产生了一些新的问题，如表位的呈递问题。本成果构建了结核CTL表位疫苗，并研究侧翼序列对表位呈递的影响。 创新点： (1)成功构建了囊尾蚴cC1核酸疫苗，该疫苗可以对仔猪起到很好的免疫保护作用。该核酸疫苗是通过使囊尾蚴囊壁细胞发生凋亡而起到免疫保护作用的。 (2)构建了泛素分子与结核四种抗原融合的核酸疫苗，并在小鼠中系统地观察了融合疫苗诱导的免疫应答。 (3)选用DNA prime-protein boost联合接种形式显著增强了结核病和囊虫病核酸疫苗的免疫效果。 (4)AAY侧翼序列、泛素分子可以提高表位疫苗的呈递，大大增强表位核酸疫苗的免疫效果。 本研究采用不同的策略来增强核酸疫苗在动物体内诱导的免疫应答，为核酸疫苗的推广应用奠定了基础。同时本研究为结核病和囊虫病防治提供了新的思路。

核酸疫苗是90年代兴起的一种新的疫苗，它已在多种感染性疾病和肿瘤的防治中显示出巨大的潜能。然而围绕着增强核酸疫苗的免疫效果等国际热点问题，在理论上还没有真正得到解决。 核酸疫苗的免疫效果在不同动物个体中差异较大。针对该问题，本研究以结核病和囊虫病为研究对象，采用几种策略对核酸疫苗的免疫效果进行调节。 (1)筛选侯选抗原 候选抗原的筛选实质上是比较分析不同保护性抗原编码基因在被免疫动物体内的表达与诱导免疫保护作用的过程。获得理想的候选抗原基因是核酸疫苗研制的关键前提。在囊虫病候选抗原的筛选中，选择了两种抗原。cC1抗原是本课题组从囊尾蚴表达文库中筛选出来的抗原；AgB是寄生虫扁形门蠕虫中的疫苗候选抗原。在结核病的候选抗原基因的筛选中，根据报道的亚单位疫苗的免疫效果进行选择抗原。本实验中选择了结核杆菌的ESAT6、MPT64、Ag85A、HSP65蛋白作为候选抗原。它们都是结核杆菌滤液蛋白。 (2)在核酸疫苗的研究中，免疫接种方式往往影响到免疫效果。近几年来国内外研究者开始尝试用核酸疫苗来防治结核病的实验室研究，但保护效果均未超过卡介苗，所以有必要选用有效的佐剂来增强疫苗的效果。本成果根据结核病保护性免疫的特点，选用泛素分子作为佐剂。 (3)采用DNA prime-protein boost的方案进行接种 目前该方案如何影响免疫应答目前尚存在争议。本研究以ESAT6抗原和cC1抗原为目标抗原，以该方案进行接种来调节核酸疫苗的免疫效果。 (4)表位核酸疫苗是近几年来基于核酸疫苗而发展起来的新型疫苗。表位序列连接在一起后，又产生了一些新的问题，如表位的呈递问题。本成果构建了结核CTL表位疫苗，并研究侧翼序列对表位呈递的影响。 创新点： (1)成功构建了囊尾蚴cC1核酸疫苗，该疫苗可以对仔猪起到很好的免疫保护作用。该核酸疫苗是通过使囊尾蚴囊壁细胞发生凋亡而起到免疫保护作用的。 (2)构建了泛素分子与结核四种抗原融合的核酸疫苗，并在小鼠中系统地观察了融合疫苗诱导的免疫应答。 (3)选用DNA prime-protein boost联合接种形式显著增强了结核病和囊虫病核酸疫苗的免疫效果。 (4)AAY侧翼序列、泛素分子可以提高表位疫苗的呈递，大大增强表位核酸疫苗的免疫效果。 本研究采用不同的策略来增强核酸疫苗在动物体内诱导的免疫应答，为核酸疫苗的推广应用奠定了基础。同时本研究为结核病和囊虫病防治提供了新的思路。