糖尿病肾病是糖尿病的重要并发症，也是病人死亡的主要原因之一，近年来不断有研究发现在糖尿病病人和实验动物体内，肾脏中出现脂质沉积，并可见肾小球硬化和肾小管周围间质纤维化。SREBPs是1993年首次从体外培养的人Hela细胞核抽提物中纯化出来的，对甘油三酯和胆固醇合成起着重要的调控作用。目前有关糖尿病肾脏脂质沉积机制的研究国内外鲜有报道，我们认为SREBP-1-脂肪酸合成酶－甘油三酯调节途径在这一过程中可能发挥着重要作用。 　　本研究以Wistar大鼠建立链脲佐菌素Ⅰ型糖尿病模型并随机分为三组：正常对照组，糖尿病模型组和胰岛素处理组，喂养2周后处死取肾皮质进行甘油三酯含量测定，油红O染色检测脂质沉积，免疫组织化学和蛋白印迹检测SREBP-1蛋白表达，原位杂交检测SREBP-1 mRNA的表达。结果在糖尿病大鼠模型中发现肾小管上皮细胞SREBP-1 mRNA和蛋白表达升高；并出现了肾脏脂质沉积、TGF-β1、FN表达增强及小管间质细胞外基质沉积，胰岛素处理可有效降低SREBP-1 mRNA和蛋白表达及肾小管病变，SREBP-1蛋白前体片段表达下降了52.8﹪，成熟片段表达量下降了30.9﹪。体外培养人肾小管上皮细胞进行研究揭示高糖可通过诱导细胞内固醇调节元件结合蛋白1前体和成熟体表达升高而进一步导致脂肪酸合成酶FAS上调和脂质合成增多；本研究又成功构建靶向抑制人SREBP-1基因的shRNA真核表达载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2，有效沉默HKC细胞SREBP-1基因表达并通过抑制FAS转录减少细胞内脂滴，为进一步利用RNA干扰技术进行相关体内研究奠定了基础。 　　以往的有关糖尿病肾脏的研究都集中于肾小球，近年来越来越多的证据表明肾小管间质纤维化与肾损伤及功能下降有着重要的联系，故本研究针对肾小管上皮细胞进行了有关糖尿病肾脏脂质代谢的研究。SREBP-1是调控脂质代谢的重要转录因子，针对这一调控子，本课题首次在糖尿病肾小管上皮细胞中进行了SREBP-1和FAS基因表达、细胞内脂质沉积、TGF-β1表达以及小管间质细胞外基质沉积的关系研究。RNA干扰是目前高效、简便的基因沉默方法，本课题首次构建了靶向SREBP-1基因的RNA干扰载体并转染人肾小管上皮细胞，进行基因沉默效果验证。 　　本课题从脂质代谢角度进行研究，针对脂质代谢的重要转录调控因子固醇调节元件结合蛋白-1（SREBP-1）探索糖尿病肾脏小管上皮细胞损伤的发生机制，结果提示高糖可刺激肾小管上皮细胞SREBP-1高表达引起细胞内脂质合成增多，进一步导致转化生长因子分泌增多和肾小管间质细胞外基质沉积，这对于开展有针对性的靶向治疗提供了可靠的依据。本研究构建了靶向人SREBP-1基因的RNA干扰载体并在体外转染人肾小管上皮细胞，显示转染并表达后下调了SREBP-1基因，减少了细胞内脂滴形成。本课题的研究结论填补我省在此方面研究的一项空白。

　　糖尿病肾病是糖尿病的重要并发症，也是病人死亡的主要原因之一，近年来不断有研究发现在糖尿病病人和实验动物体内，肾脏中出现脂质沉积，并可见肾小球硬化和肾小管周围间质纤维化。SREBPs是1993年首次从体外培养的人Hela细胞核抽提物中纯化出来的，对甘油三酯和胆固醇合成起着重要的调控作用。目前有关糖尿病肾脏脂质沉积机制的研究国内外鲜有报道，我们认为SREBP-1-脂肪酸合成酶－甘油三酯调节途径在这一过程中可能发挥着重要作用。 　　本研究以Wistar大鼠建立链脲佐菌素Ⅰ型糖尿病模型并随机分为三组：正常对照组，糖尿病模型组和胰岛素处理组，喂养2周后处死取肾皮质进行甘油三酯含量测定，油红O染色检测脂质沉积，免疫组织化学和蛋白印迹检测SREBP-1蛋白表达，原位杂交检测SREBP-1 mRNA的表达。结果在糖尿病大鼠模型中发现肾小管上皮细胞SREBP-1 mRNA和蛋白表达升高；并出现了肾脏脂质沉积、TGF-β1、FN表达增强及小管间质细胞外基质沉积，胰岛素处理可有效降低SREBP-1 mRNA和蛋白表达及肾小管病变，SREBP-1蛋白前体片段表达下降了52.8﹪，成熟片段表达量下降了30.9﹪。体外培养人肾小管上皮细胞进行研究揭示高糖可通过诱导细胞内固醇调节元件结合蛋白1前体和成熟体表达升高而进一步导致脂肪酸合成酶FAS上调和脂质合成增多；本研究又成功构建靶向抑制人SREBP-1基因的shRNA真核表达载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2，有效沉默HKC细胞SREBP-1基因表达并通过抑制FAS转录减少细胞内脂滴，为进一步利用RNA干扰技术进行相关体内研究奠定了基础。 　　以往的有关糖尿病肾脏的研究都集中于肾小球，近年来越来越多的证据表明肾小管间质纤维化与肾损伤及功能下降有着重要的联系，故本研究针对肾小管上皮细胞进行了有关糖尿病肾脏脂质代谢的研究。SREBP-1是调控脂质代谢的重要转录因子，针对这一调控子，本课题首次在糖尿病肾小管上皮细胞中进行了SREBP-1和FAS基因表达、细胞内脂质沉积、TGF-β1表达以及小管间质细胞外基质沉积的关系研究。RNA干扰是目前高效、简便的基因沉默方法，本课题首次构建了靶向SREBP-1基因的RNA干扰载体并转染人肾小管上皮细胞，进行基因沉默效果验证。 　　本课题从脂质代谢角度进行研究，针对脂质代谢的重要转录调控因子固醇调节元件结合蛋白-1（SREBP-1）探索糖尿病肾脏小管上皮细胞损伤的发生机制，结果提示高糖可刺激肾小管上皮细胞SREBP-1高表达引起细胞内脂质合成增多，进一步导致转化生长因子分泌增多和肾小管间质细胞外基质沉积，这对于开展有针对性的靶向治疗提供了可靠的依据。本研究构建了靶向人SREBP-1基因的RNA干扰载体并在体外转染人肾小管上皮细胞，显示转染并表达后下调了SREBP-1基因，减少了细胞内脂滴形成。本课题的研究结论填补我省在此方面研究的一项空白。