（1）现有的国标方法采用血清学加生化进行分型鉴定，不仅速度慢，对抗原发生变异的菌株则无法分型鉴定，局限性强。而PFGE技术它可以用于分离大分子DNA，技术先进，使病原菌的鉴定方法从表型的生物表达上升到分子水平。国内对这些病原菌更是缺乏系统的研究，且采样少、代表性差，故检出菌型少，不能科学反映出感染的真实情况。且国内均未见用分子生物学方法进行沙门氏菌鉴定、同源性检测和产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测报道。 　　本项目研究基于PFGE技术，利用我们先进的技术设备，充分考虑实验环境、条件、以及影响检验结果的各种因素，注重试验方法在基层实验室的应用性，摸索建立沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌的PFGE分型鉴定方法；研究利用标准分子量、genetool软件和spss软件进行条带图谱比对的方法，节省购买专业比对软件的高额费用（需18万元）；通过对三组人群急重症病房病人分离的513株病原菌进行检测，对流行菌产ESBLs检测及抗生素耐药性研究，完成了基于PFGE技术对多种致病菌分型鉴定试验，建立了相应的（沙门氏菌、变形杆菌、金葡菌、绿脓杆菌）分型方法。突破了传统的血清分型技术，实现了利用PFGE图谱的相同性鉴别其抗原性相似或同异，以及根据已有的图谱确定未知或无法分型的菌株的型别，解决了因抗原变异不能分型的难题，形成了不同病原菌的分型图谱库。具有稳定、快速、高分辩率的特点，检测效率比传统方法提高了一倍以上。 （2）通过对相同血清型或不同血清型的多个菌株、同一菌株抗原变异前后的基因测试实验，揭示血清型与PFGE分型的相关性，突破传统的血清学分型技术，创新PFGE分型图谱库；在总结国内外已有研究成果的基础上，充分考虑实验环境条件以及影响检测结果的各种因素，注重试验方法在基层实验室的适用性，形成实用的分型鉴定方法与技术，将PFGE图谱转化为数值进行相关性分析，开发相应的适用于大量图谱比对分析的软件，以其替代专用分析软件，形成对沙门菌等多种病原菌快速分型鉴定的技术，并在实验室中推广应用。 （3）对食物中毒及健康体检人员、重症监护病房进行产ESBLs检测及抗生素耐药性研究， 发现9种沙门氏菌产生ESBLs，并建立了快速、简便的检测方法。

（1）现有的国标方法采用血清学加生化进行分型鉴定，不仅速度慢，对抗原发生变异的菌株则无法分型鉴定，局限性强。而PFGE技术它可以用于分离大分子DNA，技术先进，使病原菌的鉴定方法从表型的生物表达上升到分子水平。国内对这些病原菌更是缺乏系统的研究，且采样少、代表性差，故检出菌型少，不能科学反映出感染的真实情况。且国内均未见用分子生物学方法进行沙门氏菌鉴定、同源性检测和产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测报道。 　　本项目研究基于PFGE技术，利用我们先进的技术设备，充分考虑实验环境、条件、以及影响检验结果的各种因素，注重试验方法在基层实验室的应用性，摸索建立沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌的PFGE分型鉴定方法；研究利用标准分子量、genetool软件和spss软件进行条带图谱比对的方法，节省购买专业比对软件的高额费用（需18万元）；通过对三组人群急重症病房病人分离的513株病原菌进行检测，对流行菌产ESBLs检测及抗生素耐药性研究，完成了基于PFGE技术对多种致病菌分型鉴定试验，建立了相应的（沙门氏菌、变形杆菌、金葡菌、绿脓杆菌）分型方法。突破了传统的血清分型技术，实现了利用PFGE图谱的相同性鉴别其抗原性相似或同异，以及根据已有的图谱确定未知或无法分型的菌株的型别，解决了因抗原变异不能分型的难题，形成了不同病原菌的分型图谱库。具有稳定、快速、高分辩率的特点，检测效率比传统方法提高了一倍以上。 （2）通过对相同血清型或不同血清型的多个菌株、同一菌株抗原变异前后的基因测试实验，揭示血清型与PFGE分型的相关性，突破传统的血清学分型技术，创新PFGE分型图谱库；在总结国内外已有研究成果的基础上，充分考虑实验环境条件以及影响检测结果的各种因素，注重试验方法在基层实验室的适用性，形成实用的分型鉴定方法与技术，将PFGE图谱转化为数值进行相关性分析，开发相应的适用于大量图谱比对分析的软件，以其替代专用分析软件，形成对沙门菌等多种病原菌快速分型鉴定的技术，并在实验室中推广应用。 （3）对食物中毒及健康体检人员、重症监护病房进行产ESBLs检测及抗生素耐药性研究， 发现9种沙门氏菌产生ESBLs，并建立了快速、简便的检测方法。