课题来源：本课题《Exosomes致敏的树突状细胞在中晚期大肠癌的临床应用研究》是广西壮族自治区科学技术厅桂科计字〔2007〕101号文件下达的广西科学研究与技术开发计划项目，合同编号：桂科攻07101007，同年获自治区卫生厅自筹项目，合同编号：Z2007271。 课题背景：肿瘤的生物疗法已显示出与传统常规手术、放疗、化疗三大疗法的互补性。肿瘤抗原的免疫治疗关键是通过激活机体的免疫系统来清除肿瘤细胞，其中最关键的是产生肿瘤特异的细胞毒性T淋巴细胞。肿瘤疫苗一直是肿瘤治疗研究的热点，树突状细胞（DC）疫苗已在动物及临床被证明有一定的抗瘤效果，寻找特异有效的刺激原装载DC是其关键所在。肿瘤细胞分泌Exosomes，可与DC特异性结合从而有效装载DC。如何获得、制备具有强特异性免疫原性的刺激原致敏DC，并能有效的传递给T淋巴细胞，诱发特异性CTL，达到消除肿瘤细胞的作用，一直是肿瘤免疫治疗研究的热点。 技术原理：Exosomes含有抗原递呈分子、tetraspan分子、粘附分子和CD86共刺激分子等，并在抗原递呈中起着重要作用，可以诱导体内肿瘤特异性CTL，比肽具有更好的激发和免疫治疗效果，是一种非常有前景的无细胞肿瘤疫苗。从体内进一步研究结果可以了解到来源于肿瘤Exosomes装载到自体DC上，体内可以诱导杀死自体肿瘤细胞的CTL，基于上述研究结果，我们可以作出假设，来源于肿瘤细胞株的Exosomes致敏DC回输可以引发更有效的抗原递呈和免疫反应。本课题设计从大肠癌细胞株LOVO中提取Exosomes，并进行GMP临床应用级Exosomes纯化；同时分离、纯化中晚期大肠癌患者外周血DC，经Exosomes致敏后回输。进入临床试验，完成患者的临床监测、免疫检测分析、淋巴结组织免疫组化分析等各项生理生化指标检测，评价 肿瘤细胞株来源的Exosomes在抗瘤免疫治疗中的可行性、安全性和有效性，期望通过本研究获得更高效的肿瘤刺激原。 性能指标：合同技术指标是：①大肠癌患者患者治疗前后免疫水平明显高于对照组，1、2年生存率优于对照组。②在省级以上杂志发表研究论文2篇以上。 本研究的创新性与先进性：本课题创新点在于：本课题首次设想应用大肠癌细胞株LOVO来源的Exosomes在CEA+、HLA-A0201+的中晚期大肠癌患者中进行抗肿瘤免疫治疗临床试验。课题研究样本量大，广西医学情报所查新结论：在国内未见相关研究报道有关CEA+肿瘤病人的Exosomes致敏DC的免疫治疗的研究报告发表。鉴定专家一致认为：该项目研究成果达到国内领先水平。 技术成熟程度及应用情况：本研究的选题正确，技术路线恰当，措施可靠，很好的完成了合同指标。三年期间对105例大肠癌患者在化疗的基研上进行免疫治疗，三周后，各项免疫学指标明显高于治疗前，也明显高于单纯化疗组。总有效率56.9%，1年生存率为66.7%，中位生存时间为15.6月。与单纯化疗组毒性反应比较，两组患者有不同程度骨髓抑制、胃肠道反应、腹泻、肝功能损害，两组毒性反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05)，无一例因毒性反应死亡，证明该治疗策略可提高患者免疫功能、延长生存期，是安全可靠的。 存在的问题及下一步的改进意见：1、进一步扩大研究对象，比如：鼻咽癌、宫颈癌等.。2、延长观察时间，观察长期免疫治疗后，是否产生免疫耐受性，使免疫细胞对传递的抗原信息不敏感。3、争取在国内更高层次刊物发表论文。

课题来源：本课题《Exosomes致敏的树突状细胞在中晚期大肠癌的临床应用研究》是广西壮族自治区科学技术厅桂科计字〔2007〕101号文件下达的广西科学研究与技术开发计划项目，合同编号：桂科攻07101007，同年获自治区卫生厅自筹项目，合同编号：Z2007271。 课题背景：肿瘤的生物疗法已显示出与传统常规手术、放疗、化疗三大疗法的互补性。肿瘤抗原的免疫治疗关键是通过激活机体的免疫系统来清除肿瘤细胞，其中最关键的是产生肿瘤特异的细胞毒性T淋巴细胞。肿瘤疫苗一直是肿瘤治疗研究的热点，树突状细胞（DC）疫苗已在动物及临床被证明有一定的抗瘤效果，寻找特异有效的刺激原装载DC是其关键所在。肿瘤细胞分泌Exosomes，可与DC特异性结合从而有效装载DC。如何获得、制备具有强特异性免疫原性的刺激原致敏DC，并能有效的传递给T淋巴细胞，诱发特异性CTL，达到消除肿瘤细胞的作用，一直是肿瘤免疫治疗研究的热点。 技术原理：Exosomes含有抗原递呈分子、tetraspan分子、粘附分子和CD86共刺激分子等，并在抗原递呈中起着重要作用，可以诱导体内肿瘤特异性CTL，比肽具有更好的激发和免疫治疗效果，是一种非常有前景的无细胞肿瘤疫苗。从体内进一步研究结果可以了解到来源于肿瘤Exosomes装载到自体DC上，体内可以诱导杀死自体肿瘤细胞的CTL，基于上述研究结果，我们可以作出假设，来源于肿瘤细胞株的Exosomes致敏DC回输可以引发更有效的抗原递呈和免疫反应。本课题设计从大肠癌细胞株LOVO中提取Exosomes，并进行GMP临床应用级Exosomes纯化；同时分离、纯化中晚期大肠癌患者外周血DC，经Exosomes致敏后回输。进入临床试验，完成患者的临床监测、免疫检测分析、淋巴结组织免疫组化分析等各项生理生化指标检测，评价 肿瘤细胞株来源的Exosomes在抗瘤免疫治疗中的可行性、安全性和有效性，期望通过本研究获得更高效的肿瘤刺激原。 性能指标：合同技术指标是：①大肠癌患者患者治疗前后免疫水平明显高于对照组，1、2年生存率优于对照组。②在省级以上杂志发表研究论文2篇以上。 本研究的创新性与先进性：本课题创新点在于：本课题首次设想应用大肠癌细胞株LOVO来源的Exosomes在CEA+、HLA-A0201+的中晚期大肠癌患者中进行抗肿瘤免疫治疗临床试验。课题研究样本量大，广西医学情报所查新结论：在国内未见相关研究报道有关CEA+肿瘤病人的Exosomes致敏DC的免疫治疗的研究报告发表。鉴定专家一致认为：该项目研究成果达到国内领先水平。 技术成熟程度及应用情况：本研究的选题正确，技术路线恰当，措施可靠，很好的完成了合同指标。三年期间对105例大肠癌患者在化疗的基研上进行免疫治疗，三周后，各项免疫学指标明显高于治疗前，也明显高于单纯化疗组。总有效率56.9%，1年生存率为66.7%，中位生存时间为15.6月。与单纯化疗组毒性反应比较，两组患者有不同程度骨髓抑制、胃肠道反应、腹泻、肝功能损害，两组毒性反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05)，无一例因毒性反应死亡，证明该治疗策略可提高患者免疫功能、延长生存期，是安全可靠的。 存在的问题及下一步的改进意见：1、进一步扩大研究对象，比如：鼻咽癌、宫颈癌等.。2、延长观察时间，观察长期免疫治疗后，是否产生免疫耐受性，使免疫细胞对传递的抗原信息不敏感。3、争取在国内更高层次刊物发表论文。