分析临床常见菌16S rRNA基因序列，在高度保守区自行设计通用引物和革兰阳性和阴性分型探针，建立细菌革兰阴、阳性菌双通道荧光定量PCR检测体系，选取临床较常见的53株临床分离株（25株为革兰阳性菌、28株为革兰阴性菌）和对照品进行该方法检测评价，研究发现细菌实时荧光定量、分型PCR方法具有较好的敏感度和特异性，能稳定检测到10CFU细菌数，25株革兰阳性菌株通过革兰阳性探针（FAM通道）检测均为阳性，28株革兰阴性菌株通过革兰阴性探针（VIC通道）检测均为阳性，反之均为阴性，符合率100%。巨细胞病毒、乙肝病毒，新型隐球菌，人基因组DNA及空白对照均为阴性。对1000例血标本和125份脑脊液标本进行细菌实时荧光定量、分型PCR方法和细菌培养对照实验，细菌实时荧光定量分型PCR方法的阳性率高于细菌培养，差异有统计学意义(P<0.01)；以细菌培养为对照，该方法检测敏感度为91.07%，特异性为97.36%，检测符合率为97.05%。该方法具有快速、特异、敏感的特点，可为临床早期、准确诊断败血症和化脑等细菌性感染疾病提供新方法。

　　分析临床常见菌16S rRNA基因序列，在高度保守区自行设计通用引物和革兰阳性和阴性分型探针，建立细菌革兰阴、阳性菌双通道荧光定量PCR检测体系，选取临床较常见的53株临床分离株（25株为革兰阳性菌、28株为革兰阴性菌）和对照品进行该方法检测评价，研究发现细菌实时荧光定量、分型PCR方法具有较好的敏感度和特异性，能稳定检测到10CFU细菌数，25株革兰阳性菌株通过革兰阳性探针（FAM通道）检测均为阳性，28株革兰阴性菌株通过革兰阴性探针（VIC通道）检测均为阳性，反之均为阴性，符合率100%。巨细胞病毒、乙肝病毒，新型隐球菌，人基因组DNA及空白对照均为阴性。对1000例血标本和125份脑脊液标本进行细菌实时荧光定量、分型PCR方法和细菌培养对照实验，细菌实时荧光定量分型PCR方法的阳性率高于细菌培养，差异有统计学意义(P<0.01)；以细菌培养为对照，该方法检测敏感度为91.07%，特异性为97.36%，检测符合率为97.05%。该方法具有快速、特异、敏感的特点，可为临床早期、准确诊断败血症和化脑等细菌性感染疾病提供新方法。