总体思路：入组并检测5个糖尿病家系所有成员的CRP及基因组情况，并作统计学分析，得出结论。 技术方案、实施效果： 　　1、以2006年在鞍山市中心医院门诊、住院以及接受健康教育的有家族史的T2DM患者为先证者，对其家系进行二代（三代）成员调查。按照WHO1999年糖尿病诊断标准，初步获得T2DM家系8个（T2DM先证者的血缘一级亲属中至少1人为T2DM患者。要求家系中先证者及其同胞的年龄都在40岁以上）。在进一步排除线粒体遗传阳性家系、常染色体显性遗传的青年、成年发病型糖尿病（MODY）家系后，最后得到5个DM家系。本研究中共计63人，其中，T2DM病例23人（男10人，女13人），年龄（54.61±10.99）岁，未患病家属40人（男14人，女26人），年龄（46.50±13.10）岁，2组间的年龄差异有统计学意义。 　　2、受试者试验前1日晚餐后禁食，于7：00时空腹静脉采血5ml，5000转/min离心，取上清液，冰冻保存。 　　3、Elasa法测出CRP值 　　4、盐析法基因组DNA的提取：采外周血5ml，低温冷冻溶解红细胞后，用蛋白酶K消化，饱和氯化钠法提取，无水乙醇沉淀DNA。聚合酶链反应-单链构象多态（PCR-SSCP），将文献报道的引物序列，经Generunner2.0软件检测分析后确定，DNA序列经查询Gene Bank获得（网址：gov/genebank/index，html），保证与非扩增区无同源性。PCR反应条件为：95℃变性5min，进入30个循环：每个周期95℃变性1min，60℃退火1min，72℃延伸1min，循环结束后再72℃延伸10min。SSCP反应条件为：取PCR产物8ul，加入含甲酰胺的上样液，95℃变性10min，立即置于冰裕中，于8%非变性聚丙烯酰胺凝胶（49：1，含5%甘油）中电泳分离（电泳条件110u，8%，22h），银染显色。对PCR-SSCP中发现的异常条带进行DNA直接测序（ABI PRTSm^3100，PE Applied Biosystems，美国）。所有筛查到的突变或变异，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism）PCR-RELP方法检测家系其他成员的变异情况 　　CRP的检测已在中国医科大学、吉林大学医学部及鞍山市中心医院全面开展，基因组的检测仅处于临床研究阶段。

　　总体思路：入组并检测5个糖尿病家系所有成员的CRP及基因组情况，并作统计学分析，得出结论。 技术方案、实施效果： 　　1、以2006年在鞍山市中心医院门诊、住院以及接受健康教育的有家族史的T2DM患者为先证者，对其家系进行二代（三代）成员调查。按照WHO1999年糖尿病诊断标准，初步获得T2DM家系8个（T2DM先证者的血缘一级亲属中至少1人为T2DM患者。要求家系中先证者及其同胞的年龄都在40岁以上）。在进一步排除线粒体遗传阳性家系、常染色体显性遗传的青年、成年发病型糖尿病（MODY）家系后，最后得到5个DM家系。本研究中共计63人，其中，T2DM病例23人（男10人，女13人），年龄（54.61±10.99）岁，未患病家属40人（男14人，女26人），年龄（46.50±13.10）岁，2组间的年龄差异有统计学意义。 　　2、受试者试验前1日晚餐后禁食，于7：00时空腹静脉采血5ml，5000转/min离心，取上清液，冰冻保存。 　　3、Elasa法测出CRP值 　　4、盐析法基因组DNA的提取：采外周血5ml，低温冷冻溶解红细胞后，用蛋白酶K消化，饱和氯化钠法提取，无水乙醇沉淀DNA。聚合酶链反应-单链构象多态（PCR-SSCP），将文献报道的引物序列，经Generunner2.0软件检测分析后确定，DNA序列经查询Gene Bank获得（网址：gov/genebank/index，html），保证与非扩增区无同源性。PCR反应条件为：95℃变性5min，进入30个循环：每个周期95℃变性1min，60℃退火1min，72℃延伸1min，循环结束后再72℃延伸10min。SSCP反应条件为：取PCR产物8ul，加入含甲酰胺的上样液，95℃变性10min，立即置于冰裕中，于8%非变性聚丙烯酰胺凝胶（49：1，含5%甘油）中电泳分离（电泳条件110u，8%，22h），银染显色。对PCR-SSCP中发现的异常条带进行DNA直接测序（ABI PRTSm^3100，PE Applied Biosystems，美国）。所有筛查到的突变或变异，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism）PCR-RELP方法检测家系其他成员的变异情况 　　CRP的检测已在中国医科大学、吉林大学医学部及鞍山市中心医院全面开展，基因组的检测仅处于临床研究阶段。