1、本研究建立的分离PBMCs和再次洗脱非贴壁细胞诱导DCs的方法，可诱导高纯度成熟DCs，具有一定的创新性。 　　2、我们应用肿瘤细胞选择性培养基对肿瘤组织进行纯化肿瘤细胞培养。研究结果显示，经7培养天后，肿瘤细胞纯度可达到95%，纯化后的肿瘤细胞可作为肿瘤患者自体肿瘤抗原，制备高效自体DCs肿瘤疫苗。 　　3、用纯化的乳腺癌细胞、乳腺癌组织和乳腺癌SKBR-3细胞株冻融抗原，负载DCs制备肿瘤疫苗，流式细胞检测DCs肿瘤疫苗表型显示，纯化的乳腺癌细胞与乳腺癌SKBR-3细胞株冻融抗原制备的DCs肿瘤疫苗无显著性差异，明显优于乳腺癌组织冻融抗原制备的DCs肿瘤疫苗。本研究为个体化肿瘤生物治疗提供了制备高效自体DCs肿瘤疫苗的方法。 　　4、DCs与CIK细胞混合培养的研究提示，DCs瘤苗可促进自体CIK细胞增殖、增强CIK细胞特异性杀伤活性，是体外诱导肿瘤特异性CIK细胞的良好方法。 　　5、用临床级无血清培养基和临床级细胞因子培养诱导成熟DCs和CIK细胞与研究级培养基和细胞因子培养诱导的DCs和CIK细胞对照研究。其增值能力、细胞表型和细胞毒活性无显著性差异。本研究结果为临床应用DCs瘤苗和CIK细胞治疗恶性肿瘤奠定了基础。 　　6、经外周血造血干细胞动员，50mL外周血可分离（20.43±4.98）×107个PBMCs，可诱导（22.31±8.13）×106DCs，DCs的产出率为10.79%（DCs总数/ PBMCs总数）。同时50mL外周血的非贴壁单个核细胞经15～21天诱导，CIK细胞总数可达（2.73±0.71）×1010。 　　7、本研究抽取少量外周血（50mL），可同时诱导大量自体DCs瘤苗和CIK细胞，最终完成自体DCs瘤苗结合自体CIK细胞进行序贯肿瘤生物治疗的临床前期研究。 　　8、依托本项目，我们在自治区率先开展了DCs瘤苗和自体CIK细胞联合免疫重建治疗多种恶性肿瘤，取得了良好的治疗效果。

　　1、本研究建立的分离PBMCs和再次洗脱非贴壁细胞诱导DCs的方法，可诱导高纯度成熟DCs，具有一定的创新性。 　　2、我们应用肿瘤细胞选择性培养基对肿瘤组织进行纯化肿瘤细胞培养。研究结果显示，经7培养天后，肿瘤细胞纯度可达到95%，纯化后的肿瘤细胞可作为肿瘤患者自体肿瘤抗原，制备高效自体DCs肿瘤疫苗。 　　3、用纯化的乳腺癌细胞、乳腺癌组织和乳腺癌SKBR-3细胞株冻融抗原，负载DCs制备肿瘤疫苗，流式细胞检测DCs肿瘤疫苗表型显示，纯化的乳腺癌细胞与乳腺癌SKBR-3细胞株冻融抗原制备的DCs肿瘤疫苗无显著性差异，明显优于乳腺癌组织冻融抗原制备的DCs肿瘤疫苗。本研究为个体化肿瘤生物治疗提供了制备高效自体DCs肿瘤疫苗的方法。 　　4、DCs与CIK细胞混合培养的研究提示，DCs瘤苗可促进自体CIK细胞增殖、增强CIK细胞特异性杀伤活性，是体外诱导肿瘤特异性CIK细胞的良好方法。 　　5、用临床级无血清培养基和临床级细胞因子培养诱导成熟DCs和CIK细胞与研究级培养基和细胞因子培养诱导的DCs和CIK细胞对照研究。其增值能力、细胞表型和细胞毒活性无显著性差异。本研究结果为临床应用DCs瘤苗和CIK细胞治疗恶性肿瘤奠定了基础。 　　6、经外周血造血干细胞动员，50mL外周血可分离（20.43±4.98）×107个PBMCs，可诱导（22.31±8.13）×106DCs，DCs的产出率为10.79%（DCs总数/ PBMCs总数）。同时50mL外周血的非贴壁单个核细胞经15～21天诱导，CIK细胞总数可达（2.73±0.71）×1010。 　　7、本研究抽取少量外周血（50mL），可同时诱导大量自体DCs瘤苗和CIK细胞，最终完成自体DCs瘤苗结合自体CIK细胞进行序贯肿瘤生物治疗的临床前期研究。 　　8、依托本项目，我们在自治区率先开展了DCs瘤苗和自体CIK细胞联合免疫重建治疗多种恶性肿瘤，取得了良好的治疗效果。