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线粒体DNA4977缺失作为电离辐射回顾性剂量估算的观察

成果基本信息
关键词: 缺失;mtDNA;DNA4977;线粒体DNA;P
成果类别: 应用技术 技术成熟度: 初期阶段
体现形式(基础理论类): / 体现形式(应用技术类): 新技术
成果登记号: 津20091772 资源采集日期: 10-2-10
研究情况
单位名称: 中国医学科学院&中国协和医科大学放射医学研究所 技术水平: 国内先进
评价证书号: / 评价单位: 放射所学术委员会
评价日期: 2008.12.16 评价证书号: /
转化情况
转让范围: 不转让 推广形式: 合作开发
已转让企业数(个): 0
联系方式
联系人(平台): 孵化基地 联系人(平台)电话: 0771-3394012
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成果简介

人类线粒体内包含唯一的核外遗传物质线粒体DNA(mtDNA),其全部核苷酸序列已被证实为16569b。与细胞的核DNA相比,线粒体DNA是母系遗传,没有组蛋白和非组蛋白保护,呈裸露状态,易受侵害,又缺乏有效的修复系统,因此mtDNA更易受损伤。mtDNA发生突变的频率为核DNA的10~20倍。在线粒体DNA(mtDNA)缺失突变中,研究最多的是mtDNA4977bp缺失,人类mtDNA4977bp的缺失与大鼠mtDNA4834缺失是相对应的。所以本实验以提取大鼠mtDNA作为模板和巢式PCR方法可以克服核DNA的干扰以及假阳性和假阴性扩增结果,大大提高了PCR方法的灵敏度和特异性。通过在mtDNA4834bp缺失区的两侧设计了一对引物,将拷贝数相对低的mtDNA4834bp缺失片断扩增出来,结果是大鼠离体照射后采用巢氏PCR方法扩增线粒体DNA4834缺失的结果与整体照射后不同时间采用巢氏PCR扩增的结果基本是一致的,那么就证明大鼠线粒体DNA4834缺失具有累计性;同时采集5例健康人外血照射后采用巢氏PCR方法扩增线粒体DNA4977的缺失。实验证明mtDNA4977的缺失在受照病人体内具有累计性,从而使人mtDNA4977缺失的分析为回顾性剂量估算提供理论依据。 经文献调研,目前国外对人类mtDNA4977bp缺失的研究,主要是研究其与年龄及肿瘤的相关性(一般来说,年龄超过20岁正常人就可能会出现mtDNA4977bp缺失的现象)。对将mtDNA4977bp缺失作为回顾性剂量估算的研究还很少有报道。

成果名称: 线粒体DNA4977缺失作为电离辐射回顾性剂量估算的观察 关键词: 缺失;mtDNA;DNA4977;线粒体DNA;P
成果类别: 应用技术 一级分类名称: 医学生物工程
二级分类名称: / 三级分类名称: /
研究起止时间: 2007.07 至2008.12 成果体现形式(应用技术类): 新技术
成果属性: 原始性创新 成果体现形式(基础理论类): /
技术成熟度: 初期阶段 技术水平: 国内先进
研究形式: 独立研究 学科分类1: 320.11
单位名称: 中国医学科学院&中国协和医科大学放射医学研究所 学科分类2: /
中图分类号1: R446.9 所属高新技术类别: 生物、医药和医疗器械
中图分类号2: / 课题来源: 自选
应用行业: 卫生、社会保障和社会福利业 课题立项名称:
国家科技计划子类别: / 课题立项编号: ST0729
经费实际投入额 (万元): 2 评价单位: 放射所学术委员会
评价形式: 验收 应用状态: 未应用
评价日期: 2008.12.16 转让范围: 不转让
评价证书号: / 推荐单位: 中国医学科学院放射医学研究所
推广形式: 合作开发 成果登记号: 津20091772
成果简介:

人类线粒体内包含唯一的核外遗传物质线粒体DNA(mtDNA),其全部核苷酸序列已被证实为16569b。与细胞的核DNA相比,线粒体DNA是母系遗传,没有组蛋白和非组蛋白保护,呈裸露状态,易受侵害,又缺乏有效的修复系统,因此mtDNA更易受损伤。mtDNA发生突变的频率为核DNA的10~20倍。在线粒体DNA(mtDNA)缺失突变中,研究最多的是mtDNA4977bp缺失,人类mtDNA4977bp的缺失与大鼠mtDNA4834缺失是相对应的。所以本实验以提取大鼠mtDNA作为模板和巢式PCR方法可以克服核DNA的干扰以及假阳性和假阴性扩增结果,大大提高了PCR方法的灵敏度和特异性。通过在mtDNA4834bp缺失区的两侧设计了一对引物,将拷贝数相对低的mtDNA4834bp缺失片断扩增出来,结果是大鼠离体照射后采用巢氏PCR方法扩增线粒体DNA4834缺失的结果与整体照射后不同时间采用巢氏PCR扩增的结果基本是一致的,那么就证明大鼠线粒体DNA4834缺失具有累计性;同时采集5例健康人外血照射后采用巢氏PCR方法扩增线粒体DNA4977的缺失。实验证明mtDNA4977的缺失在受照病人体内具有累计性,从而使人mtDNA4977缺失的分析为回顾性剂量估算提供理论依据。 经文献调研,目前国外对人类mtDNA4977bp缺失的研究,主要是研究其与年龄及肿瘤的相关性(一般来说,年龄超过20岁正常人就可能会出现mtDNA4977bp缺失的现象)。对将mtDNA4977bp缺失作为回顾性剂量估算的研究还很少有报道。

联系人: 杨翊 成果登记日期: 09-12-3
联系人email: / 单位代码: 91200251
邮政编码222: 300192 联系人电话: 022-85682236
单位传真: 022-87891713 单位通讯地址: 天津市南开区白堤路238号
单位所在省市: 天津市 单位电话: 022-87891008;85682236
转让收入(万元): 0 单位属性: 独立科研机构
合作完成单位: / 已转让企业数(个): 0
成果发布年份: 2009 知识产权形式:
成果完成人: 赵欣然;姜恩海;李进;王芹;王晓光;江波;姜立平;刘强 资源采集日期: 10-2-10

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