| 成果基本信息 | ||||||
| 关键词: | 缺失;mtDNA;DNA4977;线粒体DNA;P | |||||
| 成果类别: | 应用技术 | 技术成熟度: | 初期阶段 | |||
| 体现形式(基础理论类): | / | 体现形式(应用技术类): | 新技术 | |||
| 成果登记号: | 津20091772 | 资源采集日期: | 10-2-10 | |||
| 研究情况 | |||||
| 单位名称: | 中国医学科学院&中国协和医科大学放射医学研究所 | 技术水平: | 国内先进 | ||
| 评价证书号: | / | 评价单位: | 放射所学术委员会 | ||
| 评价日期: | 2008.12.16 | 评价证书号: | / | ||
| 转化情况 | |||||
| 转让范围: | 不转让 | 推广形式: | 合作开发 | ||
| 已转让企业数(个): | 0 | ||||
| 联系方式 | |||||
| 联系人(平台): | 孵化基地 | 联系人(平台)电话: | 0771-3394012 | ||
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| 成果简介 | |||||
人类线粒体内包含唯一的核外遗传物质线粒体DNA(mtDNA),其全部核苷酸序列已被证实为16569b。与细胞的核DNA相比,线粒体DNA是母系遗传,没有组蛋白和非组蛋白保护,呈裸露状态,易受侵害,又缺乏有效的修复系统,因此mtDNA更易受损伤。mtDNA发生突变的频率为核DNA的10~20倍。在线粒体DNA(mtDNA)缺失突变中,研究最多的是mtDNA4977bp缺失,人类mtDNA4977bp的缺失与大鼠mtDNA4834缺失是相对应的。所以本实验以提取大鼠mtDNA作为模板和巢式PCR方法可以克服核DNA的干扰以及假阳性和假阴性扩增结果,大大提高了PCR方法的灵敏度和特异性。通过在mtDNA4834bp缺失区的两侧设计了一对引物,将拷贝数相对低的mtDNA4834bp缺失片断扩增出来,结果是大鼠离体照射后采用巢氏PCR方法扩增线粒体DNA4834缺失的结果与整体照射后不同时间采用巢氏PCR扩增的结果基本是一致的,那么就证明大鼠线粒体DNA4834缺失具有累计性;同时采集5例健康人外血照射后采用巢氏PCR方法扩增线粒体DNA4977的缺失。实验证明mtDNA4977的缺失在受照病人体内具有累计性,从而使人mtDNA4977缺失的分析为回顾性剂量估算提供理论依据。 经文献调研,目前国外对人类mtDNA4977bp缺失的研究,主要是研究其与年龄及肿瘤的相关性(一般来说,年龄超过20岁正常人就可能会出现mtDNA4977bp缺失的现象)。对将mtDNA4977bp缺失作为回顾性剂量估算的研究还很少有报道。 |