本研究采用液态芯片技术构建了13种HPV（HPV6、11、16、18、31、33、35、45、51、52、53、56、58）基因分型液态芯片。应用国际上公认的HPV质粒作为阳性参照标准，对HPV引物和13种HPV探针进行了筛选，通过对影响反应的因素进行研究性的分析，建立了13种HPV型别液态芯片诊断体系的PCR反应体系和杂交反应体系。实现了高通量的基因分型检测及阳性结果的定量分析。 本研究构建的液态基因芯片技术，利用微球在溶液中反应，克服了片／膜芯片在大分子检测时表面张力、空间效应等对反应动力学的影响，同时利用激光检测技术和特别设计的自动校正和校验工具，使样品检测的准确性和重复性有大幅度的提高，具有灵敏度更高、信噪比更好、搭配更灵活、操作更简便等优点。可一次进行大量样本的检测，实现高通量检测性，可临床推广。并经我们临床检测与其他方法比较显示明显的优势和先进性。 本研究构建的液态芯片建立了阳性诊断的标准和特征判别的函数，标准样品的变异系数（CV）0.41﹪～14.69﹪。阳性检测的荧光信号值均高于其它对照背景值（信噪比）3～17倍。实验结果显示阳性标本的阳性准确率（真阳性率）在96.7﹪以上；真阴性率为100﹪，可以同时检测出临床单一型和/或混合型HPV感染。采用保存1年的微球试剂对标本进行检测，可准确检出标本的基因型别。根据临床标本情况选择不同的基因型进行检测，可一次检测单份样品或多份样品；实验操作可在2～3小时内完成，对临床大量标本进行检测时，每板可上样96份（可多板）。 通过国内多家医疗机构临床应用检测证明，本研究构建的HPV基因分型的液态芯片，可对临床HPV感染进行基因分型，可检出单一型或混合型感染，此芯片可广泛应用于临床大量样品的筛查，对HPV疾病的诊断、治疗和预后提供有价值的参考。 人乳头瘤病毒基因分型的液态芯片的构建，实现了高通量、高灵敏度和特异性强的HPV型别检测系统，可大批量应用HVP检测普查，对临床HPV感染疾病的诊断、治疗和预防提供先进的检测手段，为进一步研究HPV不同型别感染与致病性的关系提供技术平台，为以后HPV疫苗的应用提供基础平台。 项目来源：陕西省自然科学基金（2000SM59）；国家高技术研究发展计划（863）重大项目 （2002AA2Z2031）子项目。

本研究采用液态芯片技术构建了13种HPV（HPV6、11、16、18、31、33、35、45、51、52、53、56、58）基因分型液态芯片。应用国际上公认的HPV质粒作为阳性参照标准，对HPV引物和13种HPV探针进行了筛选，通过对影响反应的因素进行研究性的分析，建立了13种HPV型别液态芯片诊断体系的PCR反应体系和杂交反应体系。实现了高通量的基因分型检测及阳性结果的定量分析。 本研究构建的液态基因芯片技术，利用微球在溶液中反应，克服了片／膜芯片在大分子检测时表面张力、空间效应等对反应动力学的影响，同时利用激光检测技术和特别设计的自动校正和校验工具，使样品检测的准确性和重复性有大幅度的提高，具有灵敏度更高、信噪比更好、搭配更灵活、操作更简便等优点。可一次进行大量样本的检测，实现高通量检测性，可临床推广。并经我们临床检测与其他方法比较显示明显的优势和先进性。 本研究构建的液态芯片建立了阳性诊断的标准和特征判别的函数，标准样品的变异系数（CV）0.41﹪～14.69﹪。阳性检测的荧光信号值均高于其它对照背景值（信噪比）3～17倍。实验结果显示阳性标本的阳性准确率（真阳性率）在96.7﹪以上；真阴性率为100﹪，可以同时检测出临床单一型和/或混合型HPV感染。采用保存1年的微球试剂对标本进行检测，可准确检出标本的基因型别。根据临床标本情况选择不同的基因型进行检测，可一次检测单份样品或多份样品；实验操作可在2～3小时内完成，对临床大量标本进行检测时，每板可上样96份（可多板）。 通过国内多家医疗机构临床应用检测证明，本研究构建的HPV基因分型的液态芯片，可对临床HPV感染进行基因分型，可检出单一型或混合型感染，此芯片可广泛应用于临床大量样品的筛查，对HPV疾病的诊断、治疗和预后提供有价值的参考。 人乳头瘤病毒基因分型的液态芯片的构建，实现了高通量、高灵敏度和特异性强的HPV型别检测系统，可大批量应用HVP检测普查，对临床HPV感染疾病的诊断、治疗和预防提供先进的检测手段，为进一步研究HPV不同型别感染与致病性的关系提供技术平台，为以后HPV疫苗的应用提供基础平台。 项目来源：陕西省自然科学基金（2000SM59）；国家高技术研究发展计划（863）重大项目 （2002AA2Z2031）子项目。