一、课题来源： 湖北省自然基金课题（2002AB116）。 二、立项背景： G蛋白偶联受体是与GTP调节蛋白相关的跨膜受体分子超家族，包括β1、M2、 AT1、α1受体等，在受到反复刺激后通过内化机制产生自身抗体。受体自身抗体具有病理激动剂样活性，通过相应受体引起病理效应，导致自身免疫反应。我们在难治性高血压合并肾损害患者血清中检出了较高频率的AT1和a1受体自身抗体，证实该受体自身抗体与肾损害有关，在此基础上我们进一步提出设想：2型糖尿病（DM）的肾损害、心肌损害是否与抗G蛋白偶联受体自身抗体的参与有关？为此，我们展开了对2型DM血管并发症患者血清G蛋白偶联受体自身抗体实验与临床研究，其目的是从受体水平探讨致病机制，探索临床上合理有效的靶向治疗，从而降低DM血管并发症的发生率，减少死亡率，提高2型DM患者生活质量。 三、研究方法： （1）选择2型糖尿病肾病（DN）患者，用ELISA方法检测患者血清抗β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体，与2型DM及健康人作对照，探讨DN发病与血清中抗β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体的关系，从受体水平探讨致病机制，通过临床研究给予受体拮抗剂，靶向治疗DN患者，探讨对肾功能的保护作用，通过尿中白蛋白的排出量（Urinary Albumin Excretion, UAE），评价靶向治疗对肾功能的保护作用。目前公认UAE是预测糖尿病肾损害、心血管疾病血管内皮损伤的敏感指标，是可靠的病变逆转窗口指标。 （2）选择糖尿病心肌病（DC）患者，采用以合成的β1、M2、 AT1、α1受体多肽片段为抗原，采用ELISA技术，检测血清中抗G蛋白偶联型β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体，选择年龄、病程、匹配的2型DM、高血压无靶器官受损患者及正常人作对照组，探讨抗心肌β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体与糖尿病心肌病的关系。通过检测G蛋白偶联受体自身抗体，给予受体拮抗剂进行有针对性的靶向治疗，并采用双盲方法，通过超声心动图及彩色多普勒技术评定心功能（目前研究认为超声心动图及彩色多普勒技术是评定心功能的金标准），并与血压、年龄、病程相匹配的对照组治疗后比较心功能的改善情况。 （3）选择DM合并难治性高血压患者，用ELISA方法检测患者血清抗β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体，根据检测结果，及早给予受体拮抗剂，靶向治疗观察对2型DM合并难治性高血压的降压疗效。 四、内容及结果： （一）首先应用G蛋白偶联受体自身抗体检测技术，对糖尿病血管并发症进行实验与临床研究。 （二）2型DN实验研究： 1）首先发现DN患者发病与血清抗G蛋白偶联受体自身抗体AT1、α1、β1和M2受体自身抗体有关； 2）首先发现2型DM肾功能不全与AT1和α1受体自身抗体有关。 （三）DN靶向治疗临床干预研究： 1）首先开展缬沙坦靶向治疗对DN抗AT1受体自身抗体阳性患者减少蛋白尿的临床研究； 2）首先开展靶向治疗2型DN合并高血压患者对大量蛋白尿干预的临床研究。 （四）糖尿病心肌病与G－蛋白偶联受体自身抗体的实验研究： 1）首先发现DC发病与血清中抗β1和M2受体自身抗体有关； 2）首先发现2型DM伴心脏扩大心衰患者与血清抗AT1和a1受体自身抗体有关； 3）首先发现抗AT1受体自身抗体与2型DM合并高血压心功能不全的相关； 4）首先发现DC患者与抗G-蛋白偶联AT1与a1受体自身抗体实验研究； 5）DC患者与β1和a1受体自身抗体对比研究（首先发现β1受体自身抗体明显高于α1受体自身抗体）； 6）首先发现DM早期无症状心肌缺血患者抗AT1受体自身抗体和AngⅡ明显升高对预防心性猝死具有重要的临床价值。 （五）糖尿病心肌病临床干预研究： 1）首先开展了缬沙坦靶向治疗对抗AT1受体自身抗体阳性的2型DM合并高血压心功能不全患者改善心功能的研究； 2）首先开展了β受体阻断剂靶向治疗对抗β1肾上腺素受体自身抗体阳性的DC患者临床干预研究。 （六）2型DM合并难治性高血压患者靶向治疗的实验与临床研究： 1）首先开展了缬沙坦靶向治疗对DN合并高血压患者临床研究； 2）首先开展了缬沙坦靶向治疗DM合并高血压降压疗效临床研究； 3）首先观察了AT1受体拮抗剂缬沙坦对DN合并难治性高血压临床干预研究； 4）首先进行了DN合并难治性高血压抗α1受体自身抗体阳性患者哌唑嗪治疗的有效性和安全性研究。 五、关键技术和创新点： （1）在国内首先发现DN血清抗AT1、α1、β1、M2受体自身抗体明显升高。发现DN发病与抗G蛋白偶联AT1、α1、β1 、M2自身抗体有关，提出了2型DN与自身免疫反应有关新理念。 （2）在国内首先发现DC心功能不全患者血清抗AT1、α1、β1 、M2受体自身抗体明显升高，提出了2型DC心功能不全与自身抗体有关。 （3）对DN合并难治性高血压，进行靶向治疗，阐明和解决了长期DN合并难治性高血压降压达标率低的难题。 六、推广应用情况与社会经济效益： 本项目研究内容先后在《中华内分泌代谢杂志》、《中华糖尿病杂志》、《中华心血管病杂志》、《中华高血压杂志》、《中国循环杂志》等国内权威专业刊物上发表论文27篇，并在第七次全国内分泌学专业学术会议上交流。DN和DC心功能不全患者进行G蛋白偶联受体自身抗体检测，通过检测指导临床治疗，取得了明显的临床疗效。通过7年的临床应用，该方法稳定、结果可靠、经济、重复性好、为无创性、患者乐于接受，可广泛应用于临床。靶向治疗，使治疗更个体化，人性化，合理化。从我国国情出发，从一般经验用药，到受体拮抗剂—靶向治疗，可明显提高疗效。该方法已在多家医院：华中科技大学同济医院、华中科技大学附属协和医院、武汉大学人民医院、武汉市中心医院、河南省郑州市中心医院、襄樊市第一人民医院、湖北省武警总医院、武汉空军医院等医院推广运用，得出的结果和我们的结果基本一致，提示该方法是成熟的。在多家医院推广运用，受到了广大患者和医务人员的好评，取得了良好的社会、经济效益。具有广阔的应用前景，我院7年来积极在临床推广应用，共检测病人1700余例，其中，2型糖尿病1110余例，高血压590余例，累计为医院创造经济收入271余万元。

一、课题来源： 湖北省自然基金课题（2002AB116）。 二、立项背景： G蛋白偶联受体是与GTP调节蛋白相关的跨膜受体分子超家族，包括β1、M2、 AT1、α1受体等，在受到反复刺激后通过内化机制产生自身抗体。受体自身抗体具有病理激动剂样活性，通过相应受体引起病理效应，导致自身免疫反应。我们在难治性高血压合并肾损害患者血清中检出了较高频率的AT1和a1受体自身抗体，证实该受体自身抗体与肾损害有关，在此基础上我们进一步提出设想：2型糖尿病（DM）的肾损害、心肌损害是否与抗G蛋白偶联受体自身抗体的参与有关？为此，我们展开了对2型DM血管并发症患者血清G蛋白偶联受体自身抗体实验与临床研究，其目的是从受体水平探讨致病机制，探索临床上合理有效的靶向治疗，从而降低DM血管并发症的发生率，减少死亡率，提高2型DM患者生活质量。 三、研究方法： （1）选择2型糖尿病肾病（DN）患者，用ELISA方法检测患者血清抗β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体，与2型DM及健康人作对照，探讨DN发病与血清中抗β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体的关系，从受体水平探讨致病机制，通过临床研究给予受体拮抗剂，靶向治疗DN患者，探讨对肾功能的保护作用，通过尿中白蛋白的排出量（Urinary Albumin Excretion, UAE），评价靶向治疗对肾功能的保护作用。目前公认UAE是预测糖尿病肾损害、心血管疾病血管内皮损伤的敏感指标，是可靠的病变逆转窗口指标。 （2）选择糖尿病心肌病（DC）患者，采用以合成的β1、M2、 AT1、α1受体多肽片段为抗原，采用ELISA技术，检测血清中抗G蛋白偶联型β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体，选择年龄、病程、匹配的2型DM、高血压无靶器官受损患者及正常人作对照组，探讨抗心肌β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体与糖尿病心肌病的关系。通过检测G蛋白偶联受体自身抗体，给予受体拮抗剂进行有针对性的靶向治疗，并采用双盲方法，通过超声心动图及彩色多普勒技术评定心功能（目前研究认为超声心动图及彩色多普勒技术是评定心功能的金标准），并与血压、年龄、病程相匹配的对照组治疗后比较心功能的改善情况。 （3）选择DM合并难治性高血压患者，用ELISA方法检测患者血清抗β1、M2、 AT1、α1受体自身抗体，根据检测结果，及早给予受体拮抗剂，靶向治疗观察对2型DM合并难治性高血压的降压疗效。 四、内容及结果： （一）首先应用G蛋白偶联受体自身抗体检测技术，对糖尿病血管并发症进行实验与临床研究。 （二）2型DN实验研究： 1）首先发现DN患者发病与血清抗G蛋白偶联受体自身抗体AT1、α1、β1和M2受体自身抗体有关； 2）首先发现2型DM肾功能不全与AT1和α1受体自身抗体有关。 （三）DN靶向治疗临床干预研究： 1）首先开展缬沙坦靶向治疗对DN抗AT1受体自身抗体阳性患者减少蛋白尿的临床研究； 2）首先开展靶向治疗2型DN合并高血压患者对大量蛋白尿干预的临床研究。 （四）糖尿病心肌病与G－蛋白偶联受体自身抗体的实验研究： 1）首先发现DC发病与血清中抗β1和M2受体自身抗体有关； 2）首先发现2型DM伴心脏扩大心衰患者与血清抗AT1和a1受体自身抗体有关； 3）首先发现抗AT1受体自身抗体与2型DM合并高血压心功能不全的相关； 4）首先发现DC患者与抗G-蛋白偶联AT1与a1受体自身抗体实验研究； 5）DC患者与β1和a1受体自身抗体对比研究（首先发现β1受体自身抗体明显高于α1受体自身抗体）； 6）首先发现DM早期无症状心肌缺血患者抗AT1受体自身抗体和AngⅡ明显升高对预防心性猝死具有重要的临床价值。 （五）糖尿病心肌病临床干预研究： 1）首先开展了缬沙坦靶向治疗对抗AT1受体自身抗体阳性的2型DM合并高血压心功能不全患者改善心功能的研究； 2）首先开展了β受体阻断剂靶向治疗对抗β1肾上腺素受体自身抗体阳性的DC患者临床干预研究。 （六）2型DM合并难治性高血压患者靶向治疗的实验与临床研究： 1）首先开展了缬沙坦靶向治疗对DN合并高血压患者临床研究； 2）首先开展了缬沙坦靶向治疗DM合并高血压降压疗效临床研究； 3）首先观察了AT1受体拮抗剂缬沙坦对DN合并难治性高血压临床干预研究； 4）首先进行了DN合并难治性高血压抗α1受体自身抗体阳性患者哌唑嗪治疗的有效性和安全性研究。 五、关键技术和创新点： （1）在国内首先发现DN血清抗AT1、α1、β1、M2受体自身抗体明显升高。发现DN发病与抗G蛋白偶联AT1、α1、β1 、M2自身抗体有关，提出了2型DN与自身免疫反应有关新理念。 （2）在国内首先发现DC心功能不全患者血清抗AT1、α1、β1 、M2受体自身抗体明显升高，提出了2型DC心功能不全与自身抗体有关。 （3）对DN合并难治性高血压，进行靶向治疗，阐明和解决了长期DN合并难治性高血压降压达标率低的难题。 六、推广应用情况与社会经济效益： 本项目研究内容先后在《中华内分泌代谢杂志》、《中华糖尿病杂志》、《中华心血管病杂志》、《中华高血压杂志》、《中国循环杂志》等国内权威专业刊物上发表论文27篇，并在第七次全国内分泌学专业学术会议上交流。DN和DC心功能不全患者进行G蛋白偶联受体自身抗体检测，通过检测指导临床治疗，取得了明显的临床疗效。通过7年的临床应用，该方法稳定、结果可靠、经济、重复性好、为无创性、患者乐于接受，可广泛应用于临床。靶向治疗，使治疗更个体化，人性化，合理化。从我国国情出发，从一般经验用药，到受体拮抗剂—靶向治疗，可明显提高疗效。该方法已在多家医院：华中科技大学同济医院、华中科技大学附属协和医院、武汉大学人民医院、武汉市中心医院、河南省郑州市中心医院、襄樊市第一人民医院、湖北省武警总医院、武汉空军医院等医院推广运用，得出的结果和我们的结果基本一致，提示该方法是成熟的。在多家医院推广运用，受到了广大患者和医务人员的好评，取得了良好的社会、经济效益。具有广阔的应用前景，我院7年来积极在临床推广应用，共检测病人1700余例，其中，2型糖尿病1110余例，高血压590余例，累计为医院创造经济收入271余万元。