（1） 任务来源： 　　2007年河南省医学科技攻关计划项目（批准号200703049）。 　　（2） 应用领域和技术原理： 　　本研究主要应用于类风湿关节炎（RA）患者发病机制的基础研究。首先观察了白细胞介素21（IL-21）受体在类风湿关节炎患者的滑膜、关节液和外周血中单核淋巴细胞中的表达，在此基础上观察IL-21受体在CD4+ T细胞中的表达，进一步观察抗CD3抗体刺激后IL-21受体在CD4+ T细胞中的表达变化，最后检测了IL-21对CD4+ T细胞的激活增殖效应以及促炎因子的分泌作用。证实细胞因子IL-21在类风湿关节炎发病过程中的促炎作用，阻断IL-21生物学活性对类风湿关节炎临床治疗可能是一有效的方法。 　　（3） 性能指标： 　　收集RA、骨关节炎（osteoarthritis,OA）和膝关节损伤患者的滑膜组织，免疫组化分析各组病例中IL-21R在滑膜组织中的表达。收集RA、OA和健康体检者的外周血及关节液，用流式细胞仪分析各组病例中IL-21R在外周血和关节液单个核淋巴细胞表面的表达。分离、纯化外周血或关节液中淋巴细胞，抗CD3单克隆抗体刺激，在培养不同时间检测IL-21R在CD4+ T细胞中的表达。并且，用IL-21刺激激活T淋巴细胞，通过液闪技术、流式细胞分析仪和双抗体夹心酶联吸附免疫反应方法（ELISA法）检测分析淋巴细胞的增殖及其促炎细胞因子的分泌。结果显示： 　　1.IL-21受体在RA患者的滑膜组织中呈高表达，RA患者滑膜内膜层和下层阳性细胞数目显著高于OA患者和正常对照组。 　　2.RA患者的外周血和关节液中，CD4+ T、CD8+ T细胞、B细胞和NK细胞表达IL-21R的细胞数显著高于对照组。 　　3.RA患者中CD4+ T细胞IL-21R水平，在抗CD3抗体刺激后显著高于对照组，提示IL-21R可能与促炎反应免疫应答有关。 　　4.在RA患者的外周血和关节液中的T细胞在IL-21刺激后，CD69表达均上调，提示IL-21可导致RA患者T细胞活性显著增加，IL-21是一个RA患者T细胞强有力的诱导因子。 　　5.在经抗CD3抗体和IL-21刺激的RA患者的外周血和关节液T细胞分泌较高水平的INF-γ和TNF-α，提示IL-21可显著激发RA患者T细胞的活性，诱导了促炎细胞因子的分泌，与RA的发生发展有密切关系。 　　（4）与国外同类技术比较： 　　国外虽有同类研究证实IL-21受体高度表达在类风湿性关节炎患者滑膜组织。但是本研究中观察到在类风湿关节炎患者的炎性滑膜中IL-21受体阳性表达的细胞显著增加。进一步表型分析证实了IL-21受体主要表达在CD4细胞、CD8细胞、B细胞和NK细胞上，IL-21受体在类风湿性关节炎患者的外周血单核细胞中也有大量的表达，在经抗IL-21刺激的RA患者的外周血和关节液T细胞分泌较高水平的炎性细胞因子INF-γ和TNF-α，这些研究结果在国内外均未见报道。 　　（5）成果的创造性、先进性： 　　研究发现在RA患者的外周血和关节液T细胞中有IL-21受体的大量表达，并且能泌较高水平的炎性细胞因子，这些研究结果在国内外均未见报道，体现了课题的先进性，论文近期发表在国外《Scandinavian Journal of Immunology》杂志上，为进一步深入研究RA的发病机制及临床上靶向阻断IL-21生物治疗RA奠定了重要的理论基础。 　　（6）作用意义： 　　RA是临床上常见病、多发病，危害极大，致残率高，伴随着长期的、高昂的治疗费用，给社会和患者造成巨大的负担。我们的研究成果进一步探讨了RA的发病机制，为RA的生物靶向治疗提供了的重要的理论依据，为科研工作者研究开发靶向生物治疗RA开辟了新的治疗途径，具有巨大的潜在经济效益。同时将指导广大医生和RA患者对疾病发生的深入认识，解除患者的痛苦，共同建立一个和谐社会。 　　（7）推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见： 　　本研究的结果可以指导临床医生和研究人员进一步了解RA的发病机制，合理设计新的靶向生物免疫治疗药物，具有广阔的应用前景。将来可在RA患者中开展使用抗IL-21单抗治疗，并深入开展RA患者的免疫病理学研究。

　　（1） 任务来源： 　　2007年河南省医学科技攻关计划项目（批准号200703049）。 　　（2） 应用领域和技术原理： 　　本研究主要应用于类风湿关节炎（RA）患者发病机制的基础研究。首先观察了白细胞介素21（IL-21）受体在类风湿关节炎患者的滑膜、关节液和外周血中单核淋巴细胞中的表达，在此基础上观察IL-21受体在CD4+ T细胞中的表达，进一步观察抗CD3抗体刺激后IL-21受体在CD4+ T细胞中的表达变化，最后检测了IL-21对CD4+ T细胞的激活增殖效应以及促炎因子的分泌作用。证实细胞因子IL-21在类风湿关节炎发病过程中的促炎作用，阻断IL-21生物学活性对类风湿关节炎临床治疗可能是一有效的方法。 　　（3） 性能指标： 　　收集RA、骨关节炎（osteoarthritis,OA）和膝关节损伤患者的滑膜组织，免疫组化分析各组病例中IL-21R在滑膜组织中的表达。收集RA、OA和健康体检者的外周血及关节液，用流式细胞仪分析各组病例中IL-21R在外周血和关节液单个核淋巴细胞表面的表达。分离、纯化外周血或关节液中淋巴细胞，抗CD3单克隆抗体刺激，在培养不同时间检测IL-21R在CD4+ T细胞中的表达。并且，用IL-21刺激激活T淋巴细胞，通过液闪技术、流式细胞分析仪和双抗体夹心酶联吸附免疫反应方法（ELISA法）检测分析淋巴细胞的增殖及其促炎细胞因子的分泌。结果显示： 　　1.IL-21受体在RA患者的滑膜组织中呈高表达，RA患者滑膜内膜层和下层阳性细胞数目显著高于OA患者和正常对照组。 　　2.RA患者的外周血和关节液中，CD4+ T、CD8+ T细胞、B细胞和NK细胞表达IL-21R的细胞数显著高于对照组。 　　3.RA患者中CD4+ T细胞IL-21R水平，在抗CD3抗体刺激后显著高于对照组，提示IL-21R可能与促炎反应免疫应答有关。 　　4.在RA患者的外周血和关节液中的T细胞在IL-21刺激后，CD69表达均上调，提示IL-21可导致RA患者T细胞活性显著增加，IL-21是一个RA患者T细胞强有力的诱导因子。 　　5.在经抗CD3抗体和IL-21刺激的RA患者的外周血和关节液T细胞分泌较高水平的INF-γ和TNF-α，提示IL-21可显著激发RA患者T细胞的活性，诱导了促炎细胞因子的分泌，与RA的发生发展有密切关系。 　　（4）与国外同类技术比较： 　　国外虽有同类研究证实IL-21受体高度表达在类风湿性关节炎患者滑膜组织。但是本研究中观察到在类风湿关节炎患者的炎性滑膜中IL-21受体阳性表达的细胞显著增加。进一步表型分析证实了IL-21受体主要表达在CD4细胞、CD8细胞、B细胞和NK细胞上，IL-21受体在类风湿性关节炎患者的外周血单核细胞中也有大量的表达，在经抗IL-21刺激的RA患者的外周血和关节液T细胞分泌较高水平的炎性细胞因子INF-γ和TNF-α，这些研究结果在国内外均未见报道。 　　（5）成果的创造性、先进性： 　　研究发现在RA患者的外周血和关节液T细胞中有IL-21受体的大量表达，并且能泌较高水平的炎性细胞因子，这些研究结果在国内外均未见报道，体现了课题的先进性，论文近期发表在国外《Scandinavian Journal of Immunology》杂志上，为进一步深入研究RA的发病机制及临床上靶向阻断IL-21生物治疗RA奠定了重要的理论基础。 　　（6）作用意义： 　　RA是临床上常见病、多发病，危害极大，致残率高，伴随着长期的、高昂的治疗费用，给社会和患者造成巨大的负担。我们的研究成果进一步探讨了RA的发病机制，为RA的生物靶向治疗提供了的重要的理论依据，为科研工作者研究开发靶向生物治疗RA开辟了新的治疗途径，具有巨大的潜在经济效益。同时将指导广大医生和RA患者对疾病发生的深入认识，解除患者的痛苦，共同建立一个和谐社会。 　　（7）推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见： 　　本研究的结果可以指导临床医生和研究人员进一步了解RA的发病机制，合理设计新的靶向生物免疫治疗药物，具有广阔的应用前景。将来可在RA患者中开展使用抗IL-21单抗治疗，并深入开展RA患者的免疫病理学研究。