任务来源： 　　河南省科技厅自然科学基金，计划名称：强MAR序列的克隆及其克服转基因沉默机制的探讨；项目编号：0511042300 　　应用领域和技术原理： 　　主要应用于基因工程领域。由于位置效应等原因导致的外源基因沉默、表达水平较低是目前基因工程领域普遍存在的一种现象。中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cell,CHO）是一种重要的哺乳动物细胞表达系统，是目前重组糖蛋白生产首选体系。目前已有越来越多的药用蛋白在CHO细胞中获得了高效表达，然而由于位置效应等导致的转基因CHO细胞株表达不稳定，转基因表达水平不高却是制约CHO细胞应用的一个重要因素。为建立高效稳定表达的CHO细胞表达系统及探索MAR对转基因表达的影响及作用机制，本项目研究了MAR在稳定转化CHO细胞中的表达调控功能及其作用机制。 　　性能指标： 　　研究结果表明：克隆的β-珠蛋白MAR可使转基因表达水平平均提高5.5倍，β-干扰素MAR可使转基因表达水平平均提高2.8倍，并且MAR可降低不同CHO细胞转化株转基因表达水平的差异。并且MAR对转基因表达作用与MAR在载体上的插入位置有关，存在“位置效应”。转基因表达量与基因拷贝数不成比例，未呈现出“拷贝数依赖性”。 　　与国外同类技术比较： 　　该项目筛选出2个能明显提高外源基因表达水平的MAR，与国外同类技术相比较，处于领先水平。国外虽有关于MAR的相关报道，但并没有上述2个MAR在CHO细胞中对转基因表达作用的的相关报道。 　　成果的创造性、先进性： 　　经过查新表明，目前尚未有MAR在CHO细胞中对转基因表达作用的相关报道。 　　作用意义： 　　筛选的MAR可用于基因工程中表达载体的构建，提高外源基因的表达水平。如用于基因工程产业能明显提高转基因的表达水平，其经济效益是巨大的。 　　推广应用前景： 　　高效稳定的CHO细胞表达系统是实现重组蛋白高水平表达的基础。MAR用于CHO细胞表达系统具有独特的技术优势和良好的社会经济效益。本项目推广的范围为基因工程及基因治疗产业及分子生物学相关研究实验等。目前基因工程及基因治疗产品已经能够治疗包括肿瘤、遗传性疾病、感染性疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病等。该成果如能应用到相关领域，其带来的经济效益与社会效益将是巨大的。 　　条件应该具备良好的分子生物学实验设备，能完成分子生物学相关试验的实验室、企业等。该项目如能转化为生产力，能大大提高基因工程领域产品产量。 　　推广措施： 　　查新结果表明，本项目在国内、外尚未见报道，无同类技术相比。下一步准备申请相关专利，拥有独立的知识产权。

　　任务来源： 　　河南省科技厅自然科学基金，计划名称：强MAR序列的克隆及其克服转基因沉默机制的探讨；项目编号：0511042300 　　应用领域和技术原理： 　　主要应用于基因工程领域。由于位置效应等原因导致的外源基因沉默、表达水平较低是目前基因工程领域普遍存在的一种现象。中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cell,CHO）是一种重要的哺乳动物细胞表达系统，是目前重组糖蛋白生产首选体系。目前已有越来越多的药用蛋白在CHO细胞中获得了高效表达，然而由于位置效应等导致的转基因CHO细胞株表达不稳定，转基因表达水平不高却是制约CHO细胞应用的一个重要因素。为建立高效稳定表达的CHO细胞表达系统及探索MAR对转基因表达的影响及作用机制，本项目研究了MAR在稳定转化CHO细胞中的表达调控功能及其作用机制。 　　性能指标： 　　研究结果表明：克隆的β-珠蛋白MAR可使转基因表达水平平均提高5.5倍，β-干扰素MAR可使转基因表达水平平均提高2.8倍，并且MAR可降低不同CHO细胞转化株转基因表达水平的差异。并且MAR对转基因表达作用与MAR在载体上的插入位置有关，存在“位置效应”。转基因表达量与基因拷贝数不成比例，未呈现出“拷贝数依赖性”。 　　与国外同类技术比较： 　　该项目筛选出2个能明显提高外源基因表达水平的MAR，与国外同类技术相比较，处于领先水平。国外虽有关于MAR的相关报道，但并没有上述2个MAR在CHO细胞中对转基因表达作用的的相关报道。 　　成果的创造性、先进性： 　　经过查新表明，目前尚未有MAR在CHO细胞中对转基因表达作用的相关报道。 　　作用意义： 　　筛选的MAR可用于基因工程中表达载体的构建，提高外源基因的表达水平。如用于基因工程产业能明显提高转基因的表达水平，其经济效益是巨大的。 　　推广应用前景： 　　高效稳定的CHO细胞表达系统是实现重组蛋白高水平表达的基础。MAR用于CHO细胞表达系统具有独特的技术优势和良好的社会经济效益。本项目推广的范围为基因工程及基因治疗产业及分子生物学相关研究实验等。目前基因工程及基因治疗产品已经能够治疗包括肿瘤、遗传性疾病、感染性疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病等。该成果如能应用到相关领域，其带来的经济效益与社会效益将是巨大的。 　　条件应该具备良好的分子生物学实验设备，能完成分子生物学相关试验的实验室、企业等。该项目如能转化为生产力，能大大提高基因工程领域产品产量。 　　推广措施： 　　查新结果表明，本项目在国内、外尚未见报道，无同类技术相比。下一步准备申请相关专利，拥有独立的知识产权。