第一部分应用基因芯片探讨阿托伐他汀对STZ糖尿病鼠动脉组织蛋白酶S的影响 目的：应用基因芯片探讨阿托伐他汀对糖尿病大鼠动脉组织基因谱差异性表达的影响。方法：33只SD雄性大鼠随机分为正常组、(STZ)糖尿病组和糖尿病阿托伐他汀治疗组（阿托伐他汀每天50mg﹒kg-1，共4周），取其动脉，用Cy3和Cy5两种荧光染料通过逆转录反应将动脉的mRNA分别标记成两种探针，并与载有一组靶基因的基因芯片进行杂交，通过计算机扫描分析得出差异表达的某些基因。结果：糖尿病组筛选出相关表达差异的基因109条，糖尿病阿托伐他汀治疗组285条，其中170条表达上调，115条表达下调。糖尿病组有42条表达增高的基因在阿托伐他汀治疗后表达明显降低，其中阿托伐他汀能明显降低表达增高的CatS基因的表达。结论：糖尿病大鼠血管组织某些基因的异常表达可能是糖尿病血管病变的基础，阿托伐他汀在多环节上有抗糖尿病血管病变的作用，CatS表达的变化是其环节之一。 第二部分 阿托伐他汀对2型糖尿病鼠动脉组织蛋白酶S的影响 目的：观察2型糖尿病大鼠动脉组织蛋白酶S的表达及与血管病变的关系。方法：给5只Wistar大鼠、5只GK大鼠和5只阿托伐他汀治疗GK鼠（阿托伐他汀每天50mg﹒kg-1）喂食高脂饲料，12周后取主动脉，利用免疫组化方法，观察组织蛋白酶S和动脉平滑肌细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞在动脉壁中的表达，同时RT-PCR测定CatS基因的表达。结果：三组光镜下均未出现明显的动脉形态学变化。GK鼠组织蛋白酶S表达阴性，血管内皮细胞部分缺损，但未发现明显的单核巨噬细胞浸润至动脉壁，动脉平滑肌细胞层次清楚，未发现内膜平滑肌增生。糖尿病对照组主动脉组织CatS表达（-1.43±0.27）明显高于正常对照组（-2.17±0.24）（P＜0.01），阿托伐他汀治疗组CatS表达明显降低（-1.80±0.11）（P＜0.05）。结论：喂食高脂饲料12周，GK大鼠无明显动脉粥样硬化形成，此时组织蛋白酶S在动脉壁中表达阴性，但CatS基因表达明显增高，阿托伐他汀有下调CatS表达的作用。 第三部分 体外高糖、高糖基化产物及阿托伐他汀对培养脐静脉内皮细胞组织蛋白酶S表达的影响 目的：研究阿托伐他汀对高糖和高AGE培养的脐静脉内皮细胞（HUVEC）的影响。方法 体外培养脐静脉内皮细胞，随机分为6组：高糖组（30mmol/L）、AGE组（400μg/ml），高糖+阿托伐他汀组（12mg/L），AGE+阿托伐他汀组，空白对照组及高甘露醇糖组（30mmol/L），37℃ 5% CO2培养箱培养24 h后观察细胞，并摄片。同时各组细胞行实时定量RT-PCR检测，了解不同组基因谱的改变。结果 高糖和AGE干预引起体外培养脐静脉内皮细胞变形，出现多个核细胞，同时凋亡也增加。同时给予阿托伐他汀对这一现象有改善作用。RT-PCR结果提示相关氧化应激基因和CatS基因在对照组和治疗组之间表达有趋势上的不同。结论阿托伐他汀对高糖和AGE培养的细胞形态异常有明显的改善作用，对于降低氧化应激相关基因和CatS基因表达也有一定的作用，因而应用阿托伐他汀对于改善糖尿病患者内皮细胞功能及糖尿病血管并发症有积极的临床意义。

第一部分应用基因芯片探讨阿托伐他汀对STZ糖尿病鼠动脉组织蛋白酶S的影响 目的：应用基因芯片探讨阿托伐他汀对糖尿病大鼠动脉组织基因谱差异性表达的影响。方法：33只SD雄性大鼠随机分为正常组、(STZ)糖尿病组和糖尿病阿托伐他汀治疗组（阿托伐他汀每天50mg﹒kg-1，共4周），取其动脉，用Cy3和Cy5两种荧光染料通过逆转录反应将动脉的mRNA分别标记成两种探针，并与载有一组靶基因的基因芯片进行杂交，通过计算机扫描分析得出差异表达的某些基因。结果：糖尿病组筛选出相关表达差异的基因109条，糖尿病阿托伐他汀治疗组285条，其中170条表达上调，115条表达下调。糖尿病组有42条表达增高的基因在阿托伐他汀治疗后表达明显降低，其中阿托伐他汀能明显降低表达增高的CatS基因的表达。结论：糖尿病大鼠血管组织某些基因的异常表达可能是糖尿病血管病变的基础，阿托伐他汀在多环节上有抗糖尿病血管病变的作用，CatS表达的变化是其环节之一。 第二部分 阿托伐他汀对2型糖尿病鼠动脉组织蛋白酶S的影响 目的：观察2型糖尿病大鼠动脉组织蛋白酶S的表达及与血管病变的关系。方法：给5只Wistar大鼠、5只GK大鼠和5只阿托伐他汀治疗GK鼠（阿托伐他汀每天50mg﹒kg-1）喂食高脂饲料，12周后取主动脉，利用免疫组化方法，观察组织蛋白酶S和动脉平滑肌细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞在动脉壁中的表达，同时RT-PCR测定CatS基因的表达。结果：三组光镜下均未出现明显的动脉形态学变化。GK鼠组织蛋白酶S表达阴性，血管内皮细胞部分缺损，但未发现明显的单核巨噬细胞浸润至动脉壁，动脉平滑肌细胞层次清楚，未发现内膜平滑肌增生。糖尿病对照组主动脉组织CatS表达（-1.43±0.27）明显高于正常对照组（-2.17±0.24）（P＜0.01），阿托伐他汀治疗组CatS表达明显降低（-1.80±0.11）（P＜0.05）。结论：喂食高脂饲料12周，GK大鼠无明显动脉粥样硬化形成，此时组织蛋白酶S在动脉壁中表达阴性，但CatS基因表达明显增高，阿托伐他汀有下调CatS表达的作用。 第三部分 体外高糖、高糖基化产物及阿托伐他汀对培养脐静脉内皮细胞组织蛋白酶S表达的影响 目的：研究阿托伐他汀对高糖和高AGE培养的脐静脉内皮细胞（HUVEC）的影响。方法 体外培养脐静脉内皮细胞，随机分为6组：高糖组（30mmol/L）、AGE组（400μg/ml），高糖+阿托伐他汀组（12mg/L），AGE+阿托伐他汀组，空白对照组及高甘露醇糖组（30mmol/L），37℃ 5% CO2培养箱培养24 h后观察细胞，并摄片。同时各组细胞行实时定量RT-PCR检测，了解不同组基因谱的改变。结果 高糖和AGE干预引起体外培养脐静脉内皮细胞变形，出现多个核细胞，同时凋亡也增加。同时给予阿托伐他汀对这一现象有改善作用。RT-PCR结果提示相关氧化应激基因和CatS基因在对照组和治疗组之间表达有趋势上的不同。结论阿托伐他汀对高糖和AGE培养的细胞形态异常有明显的改善作用，对于降低氧化应激相关基因和CatS基因表达也有一定的作用，因而应用阿托伐他汀对于改善糖尿病患者内皮细胞功能及糖尿病血管并发症有积极的临床意义。