《沈阳地区副溶血弧菌分型及毒力因子的研究》是沈阳市科技局的立项课题。计划文号：沈科发[2006]48号；项目编号：10632311-3-00。 　　通过采集沈阳市肠道门诊腹泻病人及食物中毒患者粪便标本进行副溶血弧菌的分离培养，采用法国梅里埃VITEK60生化分析仪对副溶血弧菌进行生化鉴定，采用日生研的进口副溶血弧菌血清进行分群、分型实验，对分离到的菌株运用分子生物学技术进行多种毒力基因（包括目前最新发现的毒力基因）的检测，运用Rep-PCR聚类分析副溶血弧菌的同源性。 　　目前，对沈阳乃至辽宁地区的副溶血弧菌的血清型分布、分子分型及毒力特征研究尚处于空白阶段，国内相关研究也较少。通过本项研究拟掌握沈阳地区副溶血弧菌的毒力基因的分布情况及主要致病株的血清分布，为预防和控制夏秋季节食物中毒提供科学依据。 该项目的创造性与先进性是： 　　1.2005年193份粪便标本中共分离到43株副溶血弧菌，总分离率为22.28﹪，占据沈阳地区2005年细菌性腹泻的首位。2006年共采集粪便标本60份，分离到13株副溶血弧菌，总分离率为21.67﹪，仍为沈阳地区2006年细菌性腹泻的首位。 　　2.首次研究证明沈阳地区株副溶血弧菌O3群最多，占60.47﹪(26/43)。 　　3.首次研究证明沈阳地区株副溶血弧菌KP溶血现象均为阳性。toxR副溶血弧菌特异性基因扩增结果均为阳性。 　　4.毒力基因PCR检测结果表明，毒力基因分布以tdh阳性，trh阴性为主，占93﹪，为主要毒力型。 　　5.通过REP-PCR分子分型研究， 表明血清型O1群与血清型O3群的亲缘关系很近，为当前流行的副溶血弧菌溯源工作奠定了基础。　　6.毒力基因PCR和REP-PCR条件的建立使快速准确的鉴定和检测副溶血弧菌成为可能。 　　本项研究虽然不能创造直接的经济效益，但可带来很大的社会效益。通过本项研究了解沈阳地区副溶血弧菌的感染情况、血清分型及毒力分布特征，为预防和控制沈阳地区夏秋季节食物中毒提供科学依据；建立起沈阳地区副溶血弧菌菌株数据库，为今后开展溯源工作提供基础。建立起的PCR检测鉴定副溶血弧菌技术应用于夏秋季节疑似副溶血弧菌引起的食物中毒的快速检验。REP-PCR的建立为副溶血弧菌引起的食物中毒的溯源工作提供技术支撑。 　　目前流行的副溶血弧菌检测方法－培养法操作繁杂、检测周期长。运用PCR检测toxR基因和毒力相关基因tdh和trh不仅可以鉴定副溶血弧菌，而且可以鉴定其毒力型，大大缩短检验时间。Rep-PCR是一种对于副溶血弧菌分型可靠的方法，它不仅具有操作简便、省时省力、分辨率高等优点，同时具有结果的稳定性，是研究副溶血弧菌分子流行病学较好的手段之一，也有助于在基层疾控中心推广。

　　《沈阳地区副溶血弧菌分型及毒力因子的研究》是沈阳市科技局的立项课题。计划文号：沈科发[2006]48号；项目编号：10632311-3-00。 　　通过采集沈阳市肠道门诊腹泻病人及食物中毒患者粪便标本进行副溶血弧菌的分离培养，采用法国梅里埃VITEK60生化分析仪对副溶血弧菌进行生化鉴定，采用日生研的进口副溶血弧菌血清进行分群、分型实验，对分离到的菌株运用分子生物学技术进行多种毒力基因（包括目前最新发现的毒力基因）的检测，运用Rep-PCR聚类分析副溶血弧菌的同源性。 　　目前，对沈阳乃至辽宁地区的副溶血弧菌的血清型分布、分子分型及毒力特征研究尚处于空白阶段，国内相关研究也较少。通过本项研究拟掌握沈阳地区副溶血弧菌的毒力基因的分布情况及主要致病株的血清分布，为预防和控制夏秋季节食物中毒提供科学依据。 该项目的创造性与先进性是： 　　1.2005年193份粪便标本中共分离到43株副溶血弧菌，总分离率为22.28﹪，占据沈阳地区2005年细菌性腹泻的首位。2006年共采集粪便标本60份，分离到13株副溶血弧菌，总分离率为21.67﹪，仍为沈阳地区2006年细菌性腹泻的首位。 　　2.首次研究证明沈阳地区株副溶血弧菌O3群最多，占60.47﹪(26/43)。 　　3.首次研究证明沈阳地区株副溶血弧菌KP溶血现象均为阳性。toxR副溶血弧菌特异性基因扩增结果均为阳性。 　　4.毒力基因PCR检测结果表明，毒力基因分布以tdh阳性，trh阴性为主，占93﹪，为主要毒力型。 　　5.通过REP-PCR分子分型研究， 表明血清型O1群与血清型O3群的亲缘关系很近，为当前流行的副溶血弧菌溯源工作奠定了基础。　　6.毒力基因PCR和REP-PCR条件的建立使快速准确的鉴定和检测副溶血弧菌成为可能。 　　本项研究虽然不能创造直接的经济效益，但可带来很大的社会效益。通过本项研究了解沈阳地区副溶血弧菌的感染情况、血清分型及毒力分布特征，为预防和控制沈阳地区夏秋季节食物中毒提供科学依据；建立起沈阳地区副溶血弧菌菌株数据库，为今后开展溯源工作提供基础。建立起的PCR检测鉴定副溶血弧菌技术应用于夏秋季节疑似副溶血弧菌引起的食物中毒的快速检验。REP-PCR的建立为副溶血弧菌引起的食物中毒的溯源工作提供技术支撑。 　　目前流行的副溶血弧菌检测方法－培养法操作繁杂、检测周期长。运用PCR检测toxR基因和毒力相关基因tdh和trh不仅可以鉴定副溶血弧菌，而且可以鉴定其毒力型，大大缩短检验时间。Rep-PCR是一种对于副溶血弧菌分型可靠的方法，它不仅具有操作简便、省时省力、分辨率高等优点，同时具有结果的稳定性，是研究副溶血弧菌分子流行病学较好的手段之一，也有助于在基层疾控中心推广。