本研究通过建立捕获酶联法(Capturing-ELISA)检测糖尿病患者血清抗-HCMV-IgM、多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)、逆转录多聚酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)及实时荧光定量逆转录多聚酶链反应(Real-time fluorescence quantitative RT-PCR, qRT-PCR)技术检测外周血单个核细胞(PBMC)HCMV-DNA/mRNA的表达来了解宁波市糖尿病患者中HCMV的感染状况。应用对糖尿病患者机体免疫功能的研究有助于了解HCMV感染与糖尿病之间的关系,探讨HCMV在糖尿病致病机制中可能的作用。结果表明:
1、宁波市糖尿病患者HCMV pp65 DNA、mRNA及PP65 抗原阳性率分别为36.03%、16.64%和10.04%,与对照组(4.78%、2.17%及1.30%)相比均有显著性差异(P<0.01)。宁波市糖尿病患者HCMV-IgM、IgA及IgG分别为11.14%、11.69%和92.85%,明显高于对照组(0.87%、1.30%和77.39%),有显著性差异(P<0.01)。比较国内相关文献,宁波市糖尿病患者HCMV感染率略有偏高倾向,值得临床医生关注。
2、活动性HCMV感染糖尿病患者的免疫功能的异常主要表现为细胞免疫功能的抑制。
3、发病年龄越小或/和病程越短的糖尿病人抗HCMV-IgM抗体、PBMC HCMV-mRNA阳性率明显升高;年龄较大或/和病程较长的病人抗-HCMV-IgG抗体检出率明显升高;表明年龄小或/和病程短的糖尿病人以原发性HCMV感染为主。
4、HCMV感染在糖尿病的发病机制中有一定作用,可能与其发生均有关系。
5、RT-PCR技术检测PBMC HCMV-mRNA敏感、特异,考虑国内目前尚未开展RT-PCR临床应用,定量RT-PCR检测PBMC HCMV-mRNA表达水平有望应用于临床作为HCMV活动性感染的早期诊断方法。
6、捕获ELISA法特异性及敏感性均高于间接ELISA法,不受RF因子的影响,且简便、快速、重复性好,在基层具有实际应用价值。
7、提示:在糖尿病临床诊治过程中,必须充分重视HCMV感染状况及抗病毒治疗,考虑适当给予免疫调节剂。 |